СЕЛЕКТИВНАЯ СИНТЕТИЧЕСКАЯ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА «АЦИНЕТОБАКТЕР ФЕНИЛАЛАНИН АГАР» ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ БАКТЕРИЙ КОМПЛЕКСА ACINETOBACTER CALCOACETICUS – ACINETOBACTER BAUMANNII

Цель исследования – клинико-микробиологическая апробация селективной питательной среды «Ацинетобактер фенилаланин агар» для выделения и идентификации бактерий комплекса Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii (комплекса АСВ). В клинико-бактериологической лаборатории  Военно-медицинской академии были изучены в 2018 году 400 проб  клинического материала (отделяемое ран, кровь, моча, бронхо-альвеолярный лаваж) параллельно традиционным методом (посев на кровяной агар, выделение и идентификация чистых культур биохимическими тестами и микробиологическим анализатором  Vitek 2 ,bioMerieux) и посевом на чашки с питательной средой «Ацинетобактер фенилаланин агар». Селективность этой среды обусловлена трофической селекцией ацинетобактеров L- фенилаланином в качестве единственного источника азота и  углерода и дополнительной селекцией триметопримом. Ацинетобактеры комплекса АСВ идентифицировали через 18-24 ч инкубации при 37^оС  по наличию характерных колоний на селективной среде. Контрольные тесты на цитохромоксидазу и ОФ-тест с глюкозой пероксидводородным микрообъемным методом (в течение 1 ч ) позволяли экспрессно отличать ацинетобактеры комплекса АСВ от других бактерий и группы ацинетобактеров  неокисляющих глюкозу. Далее определяли вид всех выделенных штаммов ацинетобактеров методом матрично-активированной лазерной десорбции/ионизации с время пролетной масс-спектрометрией (MALDI – TOF MS). Ацинетобактеры были выделены на селективной среде в 26 пробах ( 18 проб в монокультуре, 8 – в ассоциации с Pseudomonas aeruginosa или Klebsiella pneumoniae  subsp. pneumoniae при очень мелких колониях ассоциантов); традиционным методом – в 20 пробах  (7 в монокультуре, 13 – в ассоциациях с синегнойной палочкой, клебсиеллами, эшерихиями, цитробактер, провиденциями, стафилококками, энтерококками, кандида альбиканс). Методом MALDI-TOF MS было установлено, что из 26 штаммов ацинетобактеров, выделенных на селективной среде, 25 относятся к комплексу АСВ ( A. baumannii – 23, A. pittii – 2). Один штамм ( A. baylyi ) не относился к видам комплекса АСВ. Следовательно, диагностическая специфичность селективной синтетической питательной среды «Ацинетобактер фенилаланин агар» по выделению и идентификации бактерий комплекса  A. calcoaceticus – A. baumannii составляет 96,2%, а ее диагностическая  чувствительность превышает на 25% традиционный метод. Применение селективной среды ускоряет исследование – выделение и идентификация ацинетобактеров комплекса АСВ завершается через 18-24 ч после посева клинического материала. Селективность питательной среды потенциально стабильна, так как ее основной трофический фактор селекции не зависит от приобретенной антибиотикоустойчивости бактерий. Как синтетическая питательная среда она пригодна для стандартизованных исследований.

бактерии комплекса Acinetobacter calcoaceticus – Acinetobacter baumannii, селективная синтетическая питательная среда, L– фенилаланин, триметоприм, стабильная селекция, стандартизация исследований.

1. Сиволодский Е.П. Пероксидводородный микрообъемный метод ОФ-теста: экспрессное определение окисления и ферментации глюкозы грамотрицательными бактериями // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 1991. № 1. С. 14-17.

2. Sivolodskii E.P. Hydrogen peroxide microvolume metod of the of test the rapid determination of the oxidation and fermentation of glucose by gram-negative bacteria. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii, 1991, no.1, pp.14-17. (In Russ. ). https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/1950255

3. Сиволодский Е.П. Способ выделения и идентификации бактерий комплекса Acinetobacter calcoaceticus – Acinetobacter baumannii. Патент РФ. № 2660567; 2018

4. Sivolodskii E.P. The metod of isolation and identification of bacteria in complex Acinetobacter calcoaceticus – Acinetobacter baumannii. Patent RF, no.2660567, 2018 (In Russ.).

5. wwwl.fips.ru/fips_servl/fips_servletnew.fips.ru/registers-web/

6. Сиволодский Е.П., Зуева Е.В. Таксономическое и прикладное значение профилей утилизации белковых аминокислот бактерий Acinetobacter baumannii, Acinetobacter pittii, Acinetobacter nosocomialis // Вестник Российской военно-медицинской академии. 2018. № 4( 64 ). С. 113-116.

7. Sivolodskii E.P., Zueva E.B. Taxonomic and applied value of profiles utilization of protein amino acids of bacteria Acinetobacter baumannii, Acinetobacter pittii, Acinetobacter nosocomialis. Vestnik Rossiyskoi voenno-medicinskoi akademii, 2018, no.4(64). Pp.113-116. (In Russ.). https://elibrary.ru/download/elibrary_36462893_9302610/.pdf