Preview

Инфекция и иммунитет

Расширенный поиск

СПОСОБ ФЕНОТИПИЧЕСКОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ БАКТЕРИЙ ACINETOBACTER NOSOCOMIALIS

https://doi.org/10.15789/2220-7619-MFP-1422

Полный текст:

Аннотация

Резюме. Цель исследования – разработка способа идентификации бактерий вида Acinetobacter nosocomialis по совокупности фенотипических признаков с использованием признака уреазной активности. Объектами исследования были 116 штаммов бактерий группы Acinetobacter baumannii (Ab) и 2 штамма Acinetobacter calcoaceticus. Клинические штаммы были выделены в 2018-2019 годах в бактериологической лаборатории Военно-медицинской академии им.С.М. Кирова (Санкт-Петербург), из них A. baumannii – 85 штаммов, A. nosocomialis – 12 штаммов, A. pittii – 10 штаммов. Кроме того, девять штаммов A. nosocomialis были выделены из проб воды, взятой из реки Невы в городской черте Санкт-Петербурга. Два штамма A. calcoaceticus из коллекции НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера были изолированы из цианобактериальных матов Антарктиды. Принадлежность штаммов к группе A. baumannii (Ab) устанавливали по совокупности фенотипических признаков: грамотрицательные кокко-бактерии, неподвижные, аэробы, растут при 370С, 410С или 440С, не дают гемолиз на среде с кровью барана; не имеют цитохромоксидазы и нитратредуктазы, имеют каталазу; не ферментируют, но окисляют D-глюкозу на среде Хью-Лейфсона и микрометодом; утилизируют этанол, L-арабинозу, L-аргинин, L-гистидин, путресцин, трикарбаллиловую кислоту на плотной минимальной солевой среде с 0,2% субстрата в качестве единственного источника углерода;  не утилизируют D-глюкозу. Штаммы бактерий культивировали на Колумбийском агаре. Уреазную активность бактерий определяли микрообъемным методом. Использовали  среду с мочевиной  рН=7,0±0,1 следующего состава: Na2HPO4 - 1,1 г; KH2PO4  - 1,1 г; NaCl - 5,0 г;  0,4% водно-щелочной раствор фенолового красного - 5 мл; мочевина 10,0÷15,0 г; вода дистиллированная - 1л. Ингредиенты, кроме мочевины, растворяли в дистиллированной воде, разливали во флаконы, стерилизовали 20 мин при 121оС, затем добавляли во флаконы мочевину в расчетном количестве. Среду с мочевиной вносили по 0,1 мл в лунки планшета, затем засевали по полной петле (диаметром 2 мм) суточной агаровой культуры исследуемых и контрольных штаммов и инкубировали в аэробных условиях при 37 °C. Результаты реакции на уреазу быстрой активности учитывали через 3 часа по изменению исходной окраски среды. Для выявления уреазы слабой активности реакцию учитывали через 7 - 24 часа. Полученные данные уреазной активности сравнивали с результатами видовой идентификации всех исследуемых штаммов методом матрично-ассоциированной лазерной десорбции/ионизации время пролетной (MALDI-TOF) масс-спектрометрии. Было установлено, что у бактерий группы Ab уреазную активность имели 100% штаммов A. nosocomialis и 18,82% штаммов A. baumannii. При этом уреазу быстрой активности имели все штаммы A. nosocomialis и только один  штамм A. baumannii (1,17%). У бактерий видов A. pittii и A. calcoaceticus уреаза как быстрой, так и слабой активности не была выявлена. Следовательно, уреаза высокой активности имеет таксономическое значение как маркер бактерий вида A. nosocomialis отличающий этот вид от других видов группы A. baumannii. Чувствительность и специфичность способа идентификации штаммов A. nosocomialis, основанного на определении уреазы быстрой активности в совокупности с фенотипическими признаками группы Ab, относительно идентификации методом MALDI-TOF масс-спектрометрии исследуемых штаммов составили 100% и 98,83% (χ2=103,2; Р<0,0001) соответственно.

Об авторах

Е. П. Сиволодский
ФГБОУ ВО Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова МО РФ ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург
Россия

д.м.н., профессор, профессор кафедры микробиологии

старший научный сотрудник лаборатории молекулярно-биологических технологий 



Е. В. Зуева
ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург
Россия
старший научный сотрудник лаборатории молекулярной иммунологии


Дополнительные файлы

1. Метаданные
Тема
Тип Исследовательские инструменты
Скачать (15KB)    
Метаданные
2. ТИТУЛЬНЫЙ ЛИСТ
Тема
Тип Исследовательские инструменты
Скачать (16KB)    
Метаданные
3. РЕЗЮМЕ
Тема
Тип Исследовательские инструменты
Скачать (22KB)    
Метаданные
4. ЛИТЕРАТУРА
Тема
Тип Исследовательские инструменты
Скачать (23KB)    
Метаданные
5. ТАБЛИЦА 1
Тема
Тип Исследовательские инструменты
Скачать (15KB)    
Метаданные
6. ТАБЛИЦА 2
Тема
Тип Исследовательские инструменты
Скачать (16KB)    
Метаданные

Для цитирования:


Сиволодский Е.П., Зуева Е.В. СПОСОБ ФЕНОТИПИЧЕСКОЙ ИДЕНТИФИКАЦИИ БАКТЕРИЙ ACINETOBACTER NOSOCOMIALIS. Инфекция и иммунитет. 2020;. https://doi.org/10.15789/2220-7619-MFP-1422

For citation:


Sivolodskii E., Zueva E. METHOD FOR PHENOTYPIC IDENTIFICATION OF ACINETOBACTER NOSOCOMIALIS BACTERIA. Russian Journal of Infection and Immunity. 2020;. (In Russ.) https://doi.org/10.15789/2220-7619-MFP-1422

Просмотров: 122


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2220-7619 (Print)
ISSN 2313-7398 (Online)