Preview

Инфекция и иммунитет

Расширенный поиск

Оценка метода мультиплексного выявления антител к возбудителям инфекционных заболеваний

https://doi.org/10.15789/2220-7619-2019-1-209-215

Полный текст:

Аннотация

Первичное обследование групп населения с повышенным риском заражения инфекционными  заболеваниями (ИЗ) предполагает выполнение ряда анализов с использованием моноспецифических диагностических систем и представляет собой длительную, трудоемкую и дорогостоящую процедуру. Ранее нами разработан мультиплексный тест, позволяющий оперативно и недорого проводить комплексное первичное тестирование. Создан набор, позволяющий одновременно выявлять в препаратах крови антитела к 6 возбудителям ИЗ: вирусу иммунодефицита человека, вирусам гепатитов B и C, цитомегаловирусу, Treponema pallidum и Toxoplasma gondii. Набор основан на мультиплексном дот-иммуноанализе на плоских белковых матрицах (иммуночипах) с использованием конъюгатов коллоидного золота и серебряного проявления. Он позволяет выполнять комплексный анализ при комнатной температуре в течение 70 мин и не требует высокой квалификации  оператора. В настоящей статье представлены результаты лабораторных испытаний  экспериментального образца мультиплексного набора в сравнении с наборами для иммуноферментного анализа (ИФА) пяти российских производителей с использованием массива из 240 образцов препаратов крови, включающих 200 клинических проб сывороток (плазмы) крови от больных ИЗ и 40 образцов плазмы доноров. Показано, что мультиплексный тест обладает чувствительностью и специфичностью анализа не менее 95%, а оптические сигналы дот-анализа хорошо коррелируют с показателями оптической плотности, полученными с использованием коммерческих наборов для ИФА, и позволяют проводить полуколичественную оценку содержания специфических антител в образце. При этом мультиплексный дот-анализ более оперативен и экономичен, по сравнению с ИФА и может выполняться во внелабораторных условиях. Набор для мультиплексного дот-иммуноанализа антител может обеспечить комплексный подход к диагностике ИЗ, значительно облегчить проведение первичного тестирования, сделать его более оперативным и доступным для пациентов.

Об авторах

А. Г. Полтавченко
ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»
Россия

Полтавченко Александр Георгиевич - доктор биологических наук, заведующий лабораторией иммунохимической диагностики.

630559, Новосибирская обл., п. Кольцово.

Тел./факс: 8 (383) 336-74-09 (служебн.); 8 (913) 735-91-74 (моб.).

SPIN-код: 9153-2935



О. В. Нечитайло
ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»
Россия

Нечитайло Олег Вячеславович - стажер-исследователь лаборатории иммунохимической диагностики.

630559, Новосибирская обл., п. Кольцово.



П. В. Филатов
ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»
Россия

Филатов Павел Владимирович - кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории иммунохимической диагностики.

630559, Новосибирская обл., п. Кольцово.

РИНЦ - 781254

SPIN-код: 2055-2826

Researcher ID: O-8653-2014

Scopus Author ID: 54882522300



А. В. Ерш
ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»
Россия

Ерш Анна Васильевна - кандидат биологических наук, научный сотрудник лаборатории иммунохимической диагностики.

630559, Новосибирская обл., п. Кольцово.



Список литературы

1. Ляужева Ф.М., Тленкопачев Р.С., Жибурт Е.Б. Выбраковка доноров по маркерам инфекций в Кабардино-Балкарской Республике // Трансфузиология. 2014. № 4. С. 32–36.

2. Полтавченко А.Г., Ерш А.В., Пьянков С.А., Никонов А.М., Волков Г.Н, Кривенчук Н.А. Многопрофильная серодиагностика инфекционных заболеваний. Инструментальный учет результатов анализа // Биотехнология. 2013. № 4. С. 74–82.

3. Burgess S.T.G., Kenyon F., O’Looney N., Ross A.J., Kwan M.C., Beattie J.S., Petrik J., Ghazal P., Campbell J.C. A multiplexed protein microarray for the simultaneous serodiagnosis of human immunodeficiency virus/hepatitis C virus infection and typing of whole blood. Anal. Biochem., 2008, vol. 382, pp. 9–15. doi: 10.1016/j.ab.2008.07.017

4. Corstjens P.L.A.M., Chen Z., Zuiderwijk M., Bau H.H., Abrams W.R., Malamud D., Niedbala R.S., Tanke H.J. Rapid assay format for multiplex detection of humoral immune responses to infectious disease pathogens (HIV, HCV, and TB). Ann. N.Y. Acad. Sci., 2007, vol. 1098, pp. 437–445. doi: 0.1196/annals.1384.016

5. Ellington A.A., Kullo I.J., Bailey K.R., Klee G.G. Antibody-based protein multiplex platforms: technical and operational challenges. Clin. Chem., 2010, vol. 56, pp. 186–194. doi: 10.1373/clinchem.2009.127514

6. Hartmann M., Roeraade J., Stoll D., Templin M.F., Joos T.O. Protein microarrays for diagnostic assays. Anal. Bioanal. Chem., 2009, vol. 393, pp. 1407–1416. doi: 10.1007/s00216-008-2379-z

7. Len O., Garzoni C., Lumbreras C., Molina I., Meije Y., Pahissa A., Grossi P. Recommendations for screening of donor and reci- pient prior to solid organ transplantation and to minimize transmission of donor-derived infections. Clin. Microbiol. Infect., 2014, vol. 20, iss. 7, pp. 10 –18. doi: 10.1111/1469-0691.12557

8. Lochhead M.J., Todorof K., Delaney M., Ives J.T., Greef C., Moll K., Rowley K., Vogel K., Myatt C., Zhang X.Q., Logan C., Benson C., Reed S., Schooley R.T. Rapid multiplexed immunoassay for simultaneous serodiagnosis of HIV-1 and coinfections. J. Clin. Microbiol., 2011, vol. 49, pp. 3584–3590. doi: 10.1128/JCM.00970-11

9. Myyrylainen T., Talha S.M., Swaminathan S., Vainionpaa R., Soukka T., Khanna N., Pettersson K. Simultaneous detection of human immunodeficiency virus 1 and hepatitis B virus infections using a dual-label time-resolved f luorometric assay. J. Nanobiotechnol., 2010, vol. 8, pp. 27–32. doi: 10.1186/1477-3155-8-27

10. Petrik J. Diagnostic applications of microarrays. Transfus. Med., 2006, vol. 16, pp. 233–247. doi: 10.1111/j.1365-148.2006.00673.x

11. Poltavchenko A.G., Nechitaylo O.V., Filatov P.V., Ersh A.V., Gureyev V.N. Multiplex method for initial complex testing of antibodies to blood transmitted diseases agents. J. Virol. Meth., 2016, vol. 236, pp. 231–236. doi: 10.1016/j.jviromet.2016.08.003

12. Poltavchenko A.G., Zaitsev B.N., Ersh A.V., Korneev D.V., Taranov O.S., Filatov P.V., Nechitaylo O.V. The selection and optimization of the detection system for self-contained multiplexed dot-immunoassay. J. Immunoassay Immunochem., 2016, vol. 37, pp. 540 –554. doi: 10.1080/15321819.2016.1174134

13. Talha S.M., Saviranta P., Hattara L., Vuorinen T., Hytönen J., Khanna N., Pettersson K. Array-in-well platform-based multiplex assay for the simultaneous detection of anti-HIV- and treponemal-antibodies, and hepatitis B surface antigen. J. Immunol. Meth., 2016, vol. 429, pp. 21–27. doi: 10.1016/j.jim.2015.12.007

14. Tighe P.J., Ryder R.R., Todd I., Fairclough L.C. ELISA in the multiplex era: potentials and pitfalls. Proteomics Clin. Appl., 2015, vol. 9, pp. 406–422. doi: 10.1016/j.jim.2015.12.007

15. Wong J., Sibani S., Lokko N.N., LaBaer J., Anderson K.S. Rapid detection of antibodies in sera using multiplexed self-assembling bead arrays. J. Immunol. Meth., 2009, vol. 350, pp. 171–182. doi: 10.1016/j.jim.2009.08.013


Дополнительные файлы

1. Метаданные
Тема
Тип Данные
Скачать (38KB)    
Метаданные
2. Подписи авторов
Тема
Тип Данные
Скачать (745KB)    
Метаданные
3. Титульный лист
Тема
Тип Прочее
Скачать (35KB)    
Метаданные
4. Резюме
Тема
Тип Прочее
Скачать (30KB)    
Метаданные
5. Рисунок 1
Тема
Тип Прочее
Скачать (93KB)    
Метаданные
6. Рисунок 1_График зависимости оптических сигналов дот-иммуноанализа и ИФА от концентрации антител к T. gondii
Тема
Тип Прочее
Скачать (94KB)    
Метаданные
7. Таблица 1_Сравнительный анализ специфических антител
Тема
Тип Прочее
Скачать (91KB)    
Метаданные
8. Таблица 2_Коэффициенты корреляции
Тема
Тип Прочее
Скачать (64KB)    
Метаданные
9. Литература
Тема
Тип Прочее
Скачать (57KB)    
Метаданные

Для цитирования:


Полтавченко А.Г., Нечитайло О.В., Филатов П.В., Ерш А.В. Оценка метода мультиплексного выявления антител к возбудителям инфекционных заболеваний. Инфекция и иммунитет. 2019;9(1):209-215. https://doi.org/10.15789/2220-7619-2019-1-209-215

For citation:


Poltavchenko A.G., Nechitaylo O.V., Filatov P.V., Ersh A.V. A verified multiplexed immunoassay for detecting antibodies against infectious pathogens. Russian Journal of Infection and Immunity. 2019;9(1):209-215. (In Russ.) https://doi.org/10.15789/2220-7619-2019-1-209-215

Просмотров: 166


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2220-7619 (Print)
ISSN 2313-7398 (Online)