Preview

Инфекция и иммунитет

Расширенный поиск

ОЦЕНКА МЕТОДА МУЛЬТИПЛЕКСНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ВОЗБУДИТЕЛЯМ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Аннотация

Первичное обследование групп населения с повышенным риском заражения  инфекционными заболеваниями (ИЗ) предполагает выполнение ряда анализов с использованием моноспецифических диагностических систем и представляет собой длительную, трудоемкую и дорогостоящую процедуру. Ранее нами разработан мультиплексный тест, позволяющий оперативно и недорого проводить комплексное первичное тестирование. Создан набор, позволяющий одновременно выявлять в препаратах крови антитела к 6 возбудителям ИЗ: вирусу иммунодефицита человека, вирусам гепатитов Б и С, цитомегаловирусу, Treponema pallidum и Toxoplasma gondii. Набор основан на мультиплексном дот-иммуноанализе на плоских белковых матрицах (иммуночипах) с использованием конъюгатов коллоидного золота и серебряного проявления. Он позволяет выполнять комплексный анализ при комнатной температуре в течение 70 минут и не требует высокой квалификации оператора. В настоящей статье представлены результаты лабораторных испытаний экспериментального образца мультиплексного набора в сравнении с наборами для иммуноферментного анализа (ИФА) пяти российских производителей с использованием массива из 240 образцов препаратов крови,  включающих 200 клинических проб сывороток (плазмы) крови от больных ИЗ и 40 образцов плазмы доноров. Показано, что мультиплексный тест обладает чувствительностью и специфичностью анализа не менее 95 %, а оптические сигналы дот-анализа хорошо коррелируют с показателями оптической плотности, полученными с использованием коммерческих наборов для ИФА, и позволяют проводить полуколичественную оценку содержания специфических антител в образце. При этом мультиплексный дот-анализ более оперативен и экономичен, по сравнению с ИФА и может выполняться во внелабораторных условиях. Набор для мультиплексного дот-иммуноанализа антител может обеспечить комплексный подход к диагностике ИЗ, значительно облегчить проведение первичного тестирования, сделать его более оперативным, и доступным для пациентов.

Об авторах

Александр Георгиевич Полтавченко
ФБУН ГНЦ вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Россия
доктор биологических наук, зав. лабораторией иммунохимической диагностики  иммунохимических методов диагностики ФБУН ГНЦ вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора, SPIN-код: 9153-2935


Олег Вячеславович Нечитайло
ФБУН ГНЦ вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Россия
стажёр-исследователь лаборатории иммунохимических методов диагностики ФБУН ГНЦ вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора


Павел Владимирович Филатов
ФБУН ГНЦ вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Россия
канд. биол. наук., научн. сотр. лаборатории иммунохимических методов диагностики ФБУН ГНЦ вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора, РИНЦ - 781254 SPIN-код: 2055-2826 ResearcherID: O-8653-2014 Scopus Author ID: 54882522300


Анна Васильевна Ерш
ФБУН ГНЦ вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора
Россия
канд. биол. наук., научн. сотр. лаборатории иммунохимических методов диагностики ФБУН ГНЦ вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора


Список литературы

1. Tighe P.J., Ryder R.R., Todd I., Fairclough L.C. ELISA in the multiplex era: potentials and pitfalls. Proteomics Clin. Appl., 2015, vol. 9, pp. 406–422. http://dx.doi.org/10.1016/ j.jim.2015.12.007

2. Ellington A.A., Kullo I.J., Bailey K.R., Klee G.G. Antibody-based protein multiplex platforms: technical and operational challenges. Clin. Chem., 2010, vol. 56, pp. 186-94. https://doi.org/10.1373/ clinchem.2009.127514

3. Hartmann M., Roeraade J., Stoll D., Templin M.F., Joos T.O. Protein microarrays for diagnostic assays. Anal. Bioanal. Chem., 2009, vol. 393, pp. 1407–1416. https://doi.org/10.1007/ s00216-008-2379-z

4. Petrik J. Diagnostic applications of microarrays. Transfus. Med., 2006, vol. 16, pp. 233–247. https://doi.org/10.1111/ j.1365-148.2006.00673.x

5. Burgess S. T.G., Kenyon F., O’Looney N., Ross A. J., Kwan M. C., Beattie J. S., Petrik J., Ghazal P., Campbell J. C. A multiplexed protein microarray for the simultaneous serodiagnosis of human immunodeficiency virus/hepatitis C virus infection and typing of whole blood. Anal. Biochem., 2008, vol. 382, pp. 9–15. https://doi.org/10.1016/ j.ab.2008.07.017

6. Len O., Garzoni C., Lumbreras C., Molina I., Meije Y., Pahissa A., Grossi P., Recommendations for screening of donor and recipient prior to solid organ transplantation and to minimize transmission of donor-derived infections. Clin. Microbiol. Infect. 2014; 20 (7): 10–18. https://doi.org/10.1111/ 1469-0691.12557

7. Lochhead M.J., Todorof K., Delaney M., Ives J.T., Greef C., Moll K., Rowley K., Vogel K., Myatt C., Zhang X.Q., Logan C., Benson C., Reed S., Schooley R.T. Rapid multiplexed immunoassay for simultaneous serodiagnosis of HIV-1 and coinfections. J. Clin. Microbiol., 2011; vol. 49, pp. 3584–3590. https://doi.org/10.1128/ JCM.00970-11

8. Corstjens P.L.A.M., Chen Z., Zuiderwijk M., Bau H.H., Abrams W.R., Malamud D., Niedbala R.S., Tanke H.J. Rapid assay format for multiplex detection of humoral immune responses to infectious disease pathogens (HIV, HCV, and TB). Ann. N. Y. Acad. Sci., 2007, vol. 1098, pp. 437–445. https://doi.org/0.1196/ annals.1384.016.

9. Myyrylainen T., Talha S.M., Swaminathan S., Vainionpaa R., Soukka T., Khanna N., Pettersson K. Simultaneous detection of human immunodeficiency virus 1 and Hepatitis B virus infections using a dual-label time-resolved fluorometric assay. J. Nanobiotechnol., 2010, vol. 8, pp. 27-32. https://doi.org/10.1186/ 1477-3155-8-27

10. Wong J., Sibani S., Lokko N. N., LaBaer J., Anderson K. S. Rapid detection of antibodies in sera using multiplexed self-assembling bead arrays. J. Immunol. Meth., 2009, vol. 350, pp. 171–182. https://doi.org/10.1016/ j.jim.2009.08.013

11. Talha S. M., Saviranta P., Hattara L., Vuorinen T., Hytönen J., Khanna N., Pettersson K. Array-in-well platform–based multiplex assay for the simultaneous detection of anti-HIV- and treponemal-antibodies, and Hepatitis B surface antigen. J. Immunol. Meth., 2016, vol. 429, pp. 21–27. https://doi.org/10.1016/ j.jim.2015.12.007

12. Poltavchenko A.G., Nechitaylo O.V., Filatov P.V., Ersh A.V., Gureyev V.N. Multiplex method for initial complex testing of antibodies to blood transmitted diseases agents. J. Virol. Meth., 2016, vol. 236, pp. 231–236. http://dx.doi.org/10.1016/ j.jviromet.2016.08.003

13. Poltavchenko A.G., Zaitsev B.N., Ersh A.V., Korneev D.V., Taranov O.S., Filatov P.V., Nechitaylo O.V. The selection and optimization of the detection system for self-contained multiplexed dot-immunoassay. J. Immunoassay Immunochem., 2016, vol. 37, pp. 540–554. http://dx.doi.org/10.1080/ 15321819.2016.1174134.

14. Полтавченко А.Г., Ерш А.В., Пьянков С.А., Никонов А.М., Волков Г.Н, Кривенчук Н.А. Многопрофильная серодиагностика инфекционных заболеваний. Инструментальный учет результатов анализа. Биотехнология, 2013, № 4, c. 74-82. Poltavchenko A.G., Ersh A.V., P'yankov S.A., Nikonov A.M., Volkov G.N., Krivenchuk N.A. The multiplex serodiagnosis of infection diseases. The tool account results of the analisis. Biotechnologiya, 2013, no. 4, pp. 74-82. (in Russian)

15. Ляужева Ф.М., Тленкопачев Р.С., Жибурт Е.Б. Выбраковка доноров по маркерам инфекций в Кабардино-Балкарской республике. Трансфузиология, 2014, № 4, с. 32-36. Lyauzheva F.M., Tlenkopachev R.S., Zhiburt E.B., Blood donor deferral due to infections in Kabardino-Balkaria. Transfuziologiya, 2014, no. 4, pp. 40–46 (in Russian)


Дополнительные файлы

1. Метаданные
Тема
Тип Данные
Скачать (38KB)    
Метаданные
2. Подписи авторов
Тема
Тип Данные
Скачать (745KB)    
Метаданные
3. Титульный лист
Тема
Тип Прочее
Скачать (35KB)    
Метаданные
4. Резюме
Тема
Тип Прочее
Скачать (30KB)    
Метаданные
5. Рисунок 1
Тема
Тип Прочее
Скачать (93KB)    
Метаданные
6. Рисунок 1_График зависимости оптических сигналов дот-иммуноанализа и ИФА от концентрации антител к T. gondii
Тема
Тип Прочее
Скачать (94KB)    
Метаданные
7. Таблица 1_Сравнительный анализ специфических антител
Тема
Тип Прочее
Скачать (91KB)    
Метаданные
8. Таблица 2_Коэффициенты корреляции
Тема
Тип Прочее
Скачать (64KB)    
Метаданные
9. Литература
Тема
Тип Прочее
Скачать (57KB)    
Метаданные

Для цитирования:


Полтавченко А.Г., Нечитайло О.В., Филатов П.В., Ерш А.В. ОЦЕНКА МЕТОДА МУЛЬТИПЛЕКСНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ВОЗБУДИТЕЛЯМ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ. Инфекция и иммунитет. 2019;.

For citation:


Poltavchenko A.G., Nechitaylo O.V., Filatov P.V., Ersh A.V. VERIFICATION OF THE METHOD FOR MULTIPLEXED DETECTION OF ANTIBODIES TO INFECTIOUS PATHOGENS. Russian Journal of Infection and Immunity. 2019;.

Просмотров: 7


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2220-7619 (Print)
ISSN 2313-7398 (Online)