Preview

Инфекция и иммунитет

Расширенный поиск

ГЕНОМОСИСТЕМАТИКА РИККЕТСИЙ

https://doi.org/10.15789/2220-7619-2018-2-107-118

Полный текст:

Аннотация

Определение термина «геном» было дано немецким ученым-ботаником Г. Винклером почти сто лет назад, в 1920 году. Недавно было представлено определение генома для бактерий  (риккетсий) с одной хромосомой с позиции теории информации, биологии и  биоинформатики как информационной цепи нуклеотидов. Систематика риккетсий,  являющихся облигатными внутриклеточными микроорганизмами, основана на ограниченном количестве фенотипических признаков. Классификации, построенные при анализе генов,  фрагментов геномов и их конкатенаций вызывают дискуссии. Применение разработанного  аппарата формального анализа строя (http://foarlab.org) при изучении полноразмерных  геномов позволило представить систематику риккетсий и Orientia tsutsugamushi из  семейства Rickettsiaceae. Использование этого подхода подтвердило существование групп  сыпного тифа, клещевой пятнистой лихорадки (КПЛ) и «предковой» группы внутри рода  Rickettsia и позволило выделить внутри этого рода группу Rickettsia felis, располагающуюся  между «предковой» группой и группой КПЛ, и группу R. akari на границе между группой  КПЛ и родом Orientia. Разработка инструментов формального анализа строя — «Карта  генов» и «Матрица сходства» — помогла провести углубленное изучение полноразмерных  геномов риккетсий с учетом характеристик их генов и некодирующих последовательностей.  Применение данных инструментов позволило подтвердить с помощью полученной  классификации представление об экологических особенностях риккетсий, структуре  нозологических форм и эпидемиологических закономерностях риккетсиозов, а также  оценить вирулентность штаммов двух наиболее патогенных видов риккетсий — R. prowazekii и R. rickettsii. В данной работе впервые удалось осуществить целостное, согласованное и  многоаспектное рассмотрение совокупности близкородственных бактерий (семейства  бактерий) и связанных с ними проявлений. В основу разработанного и описанного здесь системного подхода к изучению бактерий положена новая математическая модель —  расположение нуклеотидов в полноразмерном геноме и его чувствительные однозначные  числовые характеристики. Предложенный методологический подход назван  «геномосистематика» и основывается на математическом моделировании полноразмерных  геномов риккетсий (бактерий) с помощью средств формального анализа строя. Классификация риккетсий и риккетсиозов, полученная с помощью этого подхода,  соответствует экологическим, эпидемиологическим и этиологическим принципам.  Применение геномосистематики может послужить выполнению задач и целей  профилактической медицины. Публикация является завершением этапа серии научных исследований по разработке методологии комплексного подхода, основанного на  применении новых средств математического моделирования при изучении объектов и  закономерностей естественнонаучных дисциплин биологического и медицинского профиля.

Об авторах

С. Н. Шпынов
ФГБУ Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н.Ф. Гамалеи МЗ РФ
Россия

д.м.н., руководитель лаборатории экологии риккетсий

123098, Россия, Москва, ул. Гамалеи, 18

Тел./факс: 8 (499) 193-61-85 (служебн.)



Н. Н. Поздниченко
Омский государственный технический университет
Россия

старший преподаватель кафедры информатики и вычислительной техники



А. С. Гуменюк
Омский государственный технический университет
Россия

к.т.н., доцент кафедры информатики и вычислительной техники



А. А. Скиба
Омский государственный технический университет
Россия

инженер-программист кафедры информатики и вычислительной техники



Список литературы

1. Балашов Ю.С., Дайтер А.Б. Кровососущие членистоногие и риккетсии. Л.: Наука, 1973. 251 с. [Balashov Yu.S., Daiter A.B. Krovososushchie chlenistonogie i rikketsii [Blood- sucking arthropods and rickettsias]. Leningrad: Nauka, 1973. 251 p.]

2. Громашевский Л.В. Общая эпидемиология. М.: Медицина, 1965. 290 с. [Gromashevskii L.V. Obshchaya epidemiologiya [General epidemiology]. Moscow: Meditsina, 1965. 290 p.]

3. Гуменюк А.С., Поздниченко Н.Н., Родионов И.Н., Шпынов С.Н. О средствах формального анализа строя нуклеотидных цепей // Математическая биология и биоинформатика. 2013. Т. 8, № 1. С. 373–397. [Gumenyuk A.S., Postnichenko N.N., Rodionov I.N., Shpynov S.N. On the formal analysis of the building of nucleotide chains. Matematicheskaya biologiya i bioinformatika = Mathematical Biology and Bioinformatics, 2013, vol. 8, no. 1, pp. 373–397. doi: 10.17537/2013.8.373 (In Russ.)]

4. Гуменюк А.С., Поздниченко Н.Н., Скиба А.А., Шпынов С.Н. Программа ЭВМ «Матрица сходства нуклеотидных последовательностей по их компонентам». Свидетельство о Государственной регистрации программы ЭВМ в Реестре программ ЭВМ № 2017616679 от 09.06.2017 г. [Gumenuk A.S., Pozdnichenko N.N., Skiba A.A., Shpynov S.N. Computer Program «Matrix of similarity of nucleotide sequences by their components». Certificate of State Registration of the Computer Program in the Register of Computer Programs № 2017616679, 09.06.2017]

5. Гуменюк А.С., Поздниченко Н.Н., Скиба А.А., Шпынов С.Н. Программа ЭВМ «Карта генов». Свидетельство о Государственной регистрации программы ЭВМ в Реестре программ ЭВМ № 2017616730 от 13.06.2017 г. [Gumenuk A.S., Pozdnichenko N.N., Skiba A.A., Shpynov S.N. Computer Program «Map of genes». Certificate of State Registration of the Computer Program in the Register of Computer Programs No. 2017616730, 13.06.2017]

6. Здродовский П.Ф., Голиневич Е.М. Учение о риккетсиях и риккетсиозах. 3-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина, 1972. 496 с. [Zdrodovskii P.F., Golinevich E.M. Uchenie o rikketsiyakh i rikketsiozakh. 3-e izd., pererab. i dop. [The doctrine of rickett sias and rickettsiosis. 3rd edition revised and enlarged]. Moscow: Medicina, 1972. 496 p.]

7. Игнатович В.Ф. Антигенные связи риккетсий Провачека и риккетсий Канада, установленные при изучении сывороток больных болезнью Брилля // Журнал гигиены, эпидемиологии, микробиологии и иммунологии. 1977. T. 21, № 1. C. 48–52. [Ignatovich V.F. Antigenic relations of Rickettsia of Prowazeki and Rickettsia Canada established in the study of sera of patients with Brill’s disease. Zhurnal gigieny, epidemiologii, mikrobiologii i immunologii = Journal of Hygiene, Epidemiology, Microbiology and Immunology, 1977, vol. 21, no. 1, pp. 48–52. (In Russ.)]

8. Мазур М. Качественная теория информации. М.: Мир, 1974. 240 с. [Mazur M. Kachestvennaya teoriya informatsii. [Qualitative theory of information]. Moscow: Mir, 1974. 240 p.]

9. Марков А.В., Захаров И.А. Использование количественных мер сходства генных порядков для построения филогенетических реконструкций на примере бактерий рода Rickettsia // Генетика. 2008. Т. 44, № 4. С. 456–466. [Markov A.V., Zakharov I.A. Application of quantitative measures of gene order similarity to phylogenetic reconstructions for bacteria’s of the genus Rickettsia. Genetika = Genetics, 2008, vol. 44, no. 4, pp. 456–466. (In Russ.)]

10. Павловский Е.Н. Основные положения учения о природной очаговости болезней. Эпидемиология и принципы борьбы с инфекционными болезнями. М.: Медицина, 1965, c. 285–308. [Pavlovskii E.N. Osnovnye polozheniya ucheniya o prirodnoi ochagovosti boleznei. Epidemiologiya i printsipy bor’by s infektsionnymi boleznyami [The main provisions of the doctrine of natural foci of disease. Epidemiology and principles of infectious disease control]. Moscow: Meditsina, 1965, pp. 285–308]

11. Шпынов С.Н., Гуменюк А.С., Поздниченко Н.Н. Применение числовой характеристики строя нуклеотидов в геномах прокариот для реклассификации внутри рода Rickettsia // Математическая биология и биоинформатика. 2016. Т. 11, № 2. С. 87– 101. [Shpynov S.N., Gumenuk A.S., Pozdnichenko N.N. Application of the numerical characteristic of formal order analysis of the prokaryotic genomes for reclassification within the genus Rickettsia. Matematicheskaya biologiya i bioinformatika = Mathematical Biology and Bioinformatics, 2016, vol. 11, no. 2, pp. 336–350. doi: 10.17537/2016.11.336 (In Russ.)]

12. Abarca K., Lopez J., Acosta-Jamett G., Martínez-Valdebenito C. Rickettsia felis in Rhipicephalus sanguineus from two distant Chilean cities. Vector Borne Zoonotic Dis., 2013, vol. 13, iss. 8, pp. 607–609. doi: 10.1089/vbz.2012.1201

13. Altschul S.F., Gish W., Miller W., Myers E.W., Lipman D.J. Basic local alignment search tool. J. Mol. Biol., 1990, vol. 215, no. 3, pp. 403–410. doi: 10.1016/S0022-2836(05)80360-2

14. Angelakis E., Mediannikov O., Parola P., Raoult D. Rickettsia felis: the complex journey of an emergent human pathogen. Trends Parasitol., 2016, vol. 32, iss. 7, pp. 554–564. doi: 10.1016/j.pt.2016.04.009

15. Anstead C.A., Chilton N.B. A novel Rickettsia species detected in vole ticks (Ixodes angustus) from Western Canada. Appl. Environ. Microbiol., 2013, vol. 79, no. 24, pp. 7583–7589. doi: 10.1128/AEM.02286-13

16. Azad A.F. Epidemiology of murine typhus. Ann. Rev. Entomol., 1990, vol. 35, pp. 553–569. doi: 10.1146/annurev.en.35.010190.003005

17. Azad A.F., Radulovic S., Higgins J.A., Noden B.H., Troyer J.M. Flea-borne rickettsioses: ecologic considerations. Emerg. Infect. Dis., 1997, vol. 3, no. 3, pp. 319–327. doi: 10.3201/eid0303.970308

18. Bechah Y., Capo C., Mege J.L., Raoult D. Epidemic typhus. Lancet Infect. Dis., 2008, vol. 8, iss. 7, pp. 417–426. doi: 10.1016/S1473-3099(08)70150-6

19. Bechah Y., Karkouri K.E., Mediannikov O., Leroy Q., Pelletier N., Robert C., Médigue C., Mege J.L., Raoult D. Genomic, proteomic, and transcriptomic analysis of virulent and avirulent Rickettsia prowazekii reveals its adaptive mutation capabilities. Genome Res., 2010, vol. 20, no. 5, pp. 655–663. doi: 10.1101/gr.103564.109

20. Bishop-Lilly K.A., Ge H., Butani A., Osborne B., Verratti K., Mokashi V., Nagarajan N., Pop M., Read T.D., Richards A.L. Genome sequencing of four strains of Rickettsia prowazekii, the causative agent of epidemic typhus, including one flying squirrel isolate. Genome Announc, 2013, vol. 1, no. 3: e00399-13. doi: 10.1128/genomeA.00399-13

21. Choi Y.-J., Lee E.-M., Park J.-M., Lee K.-M., Han S.-H., Kim J.-K., Lee S.-H., Song H.-J., Choi M.-S., Kim I.-S., Park K.-H., Jang W.-J. Molecular detection of various Rickettsiae in mites (Acari: Trombiculidae) in southern Jeolla Province, Korea. Microbiol. Immunol., 2007, vol. 51, iss. 3, pp. 307–312. doi: 10.1111/j.1348-0421.2007.tb03912.x

22. Civen R., Ngo V. Murine typhus: an unrecognized suburban vectorborne disease. Clin. Infect. Dis., 2008, vol. 46, iss. 6, pp. 913–918. doi: 10.1086/527443

23. Clark T.R., Noriea N.F., Bublitz D.C., Ellison D.W., Martens C., Lutter E.I., Hackstadt T. Comparative genome sequencing of Rickettsia rickettsii strains that differ in virulence. Infect. Immun., 2015, vol. 83, no. 4, pp. 1568–1576. doi: 10.1128/IAI.03140-14

24. Dieme C., Bechah Y., Socolovschi C., Audoly G., Berenger J.M., Faye O., Raoult D., Parola P. Transmission potential of Rickettsia felis infection by Anopheles gambiae mosquitoes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2015, vol. 112, no. 26, pp. 8088–8093. doi: 10.1073/pnas.1413835112

25. Eisen J.A., Fraser C.M. Phylogenomics: intersection of evolution and genomics. Science, 2003, vol. 300, iss. 5626, pp. 1706–1707. doi: 10.1126/science.1086292

26. Eremeeva M.E., Dasch G.A., Silverman D.J. Quantitative analyses of variations in the injury of endothelial cells elicited by 11 isolates of Rickettsia rickettsii. Clin. Diagn. Lab. Immunol., 2001, vol. 8, no. 4, pp. 788–796. doi: 10.1128/CDLI.8.4.788-796.2001

27. Felsheim R.F., Kurtti T.J., Munderloh U.G. Genome sequence of the endosymbiont Rickettsia peacockii and comparison with virulent Rickettsia rickettsii: identification of virulence factors. PLoS One, 2009, vol. 4, iss. 12: e8361. doi: 10.1371/journal.pone.0008361

28. Fournier P.-E., Dumler J.S., Greub G., Zhang J., Wu Y., Raoult D. Gene sequence-based criteria for identification of new rickett sia isolates and description of Rickettsia heilongjiangensis sp. nov. J. Clin. Microbiol., 2003, vol. 41, no. 12, pp. 5456–5465. doi: 10.1128/JCM.41.12.5456-5465.2003

29. Fournier P.-E., Raoult D. Current knowledge on phylogeny and taxonomy of Rickettsia spp. Ann. N. Y. Acad. Sci., 2009, vol. 1166, iss. 1, pp. 1–11. doi: 10.1111/j.1749-6632.2009.04528.x

30. Gillespie J.J., Beier M.S., Rahman M.S., Ammerman N.C., Shallom J.M., Purkayastha A., Sobral B.S., Azad A.F. Plasmids and rickettsial evolution: insight from Rickettsia felis. PLoS One, 2007, iss. 3: e266. doi: 10.1371/journal.pone.0000266

31. Gillespie J.J., Williams K., Shukla M., Snyder E.E., Nordberg E.K., Ceraul S.M., Dharmanolla C., Rainey D., Soneja J., Shallom J.M., Vishnubhat N.D., Wattam R., Purkayastha A., Czar M., Crasta O., Setubal J.C., Azad A.F., Sobral B.S. Rickettsia phylogenomics: unwinding the intricacies of obligate intracellular life. PLoS One, 2008, vol. 3, iss. 4: e2018. doi: 10.1371/journal.pone.0002018

32. Ishikura M., Ando S., Shinagawa Y., Matsuura K., Hasegawa S., Nakayama T., Fujita H., Watanabe M. Phylogenetic analysis of spotted fever group rickettsiae based on gltA, 17- kDa, and rOmpA genes amplified by nested PCR from ticks in Japan. Microbiol. Immunol., 2003, vol. 47, no. 11, pp. 823–832. doi: 10.1111/j.1348-0421.2003.tb03448.x

33. Jado I., Oteo J.A., Aldámiz M., Gil H., Escudero R., Ibarra V., Portu J., Portillo A., Lezaun M.J., García-Amil C., Rodríguez-Moreno I., Anda P. Rickettsia monacensis and human disease, Spain. Emerg. Infect. Dis., 2007, vol. 13, no. 9, pp. 1405–1407. doi: 10.3201/eid1309.060186

34. Jiang J., Maina A.N., Knobel D.L., Cleaveland S., Laudisoit A., Wamburu K. Molecular detection of Rickettsia felis and Candidatus Rickettsia asemboensis in fleas from human habitats, Asembo, Kenya. Vector Borne Zoonotic Dis., 2013, vol. 13, iss. 8, pp. 550–558. doi: 10.1089/vbz.2012.1123

35. Koonin E.V., Mushegian A.R., Galperin M.Y., Walker D.R. Comparison of archaeal and bacterial genomes: computer analysis of protein sequences predicts novel functions and suggests a chimeric origin for the archaea. Mol. Microbiol., 1997, vol. 25, iss. 4, pp. 619–637. doi: 10.1046/j.1365-2958.1997.4821861.x

36. Krantz G.W., Walter D.E. A manual of acarology. 3rd ed. Lubbock: Texas Tech University Press, 2009. 807 p.

37. Kumar S., Stecher G., Tamura K. MEGA7: molecular evolutionary genetics analysis version 7.0 for bigger datasets. Mol. Biol. Evol., 2016, vol. 33, iss. 7, pp. 1870–1874. doi: 10.1093/molbev/msw054

38. Linnemann C.C., Petzman C.I., Peterson E.D. Acute febrile cerebrovasculitis. A non-spotted fever group rickettsial disease. Arch. Intern. Med., 1989, vol. 149, no. 7, pp. 1682– 1684. doi: 10.1001/archinte.1989.00390070182031

39. Mediannikov O., Aubadie-Ladrix M., Raoult D. Candidatus ‘Rickettsia senegalensis’ in cat fleas in Senegal. New Microbes New Infect., 2015, vol. 3, pp. 24–28. doi: 10.1016/j.nmni.2014.10.005

40. Merhej V., Angelakis E., Socolovschi C., Raoult D. Genotyping, evolution and epidemiological findings of Rickettsia species. Infect. Genet. Evol., 2014, vol. 25, pp. 122– 137. doi: 10.1016/j.meegid.2014.03.014

41. Merhej V., Raoult D. Rickettsial evolution in the light of comparative genomics. Biol. Rev. Camb. Philos. Soc., 2011, vol. 86, iss. 2, pp. 379–405. doi: 10.1111/j.1469-185X.2010.00151.x

42. Nichols E., Rindge M.E., Russell G.G. The relationship of the habits of the house mouse and the mouse mite (Allodermanyssus sanguineus) to the spread of rickettsialpox. Ann. Intern. Med., 1953, vol. 39, no. 1, pp. 92–102. doi: 10.7326/0003-4819-39-1-92

43. Nicholson W.L., Allen K.E., McQuiston J.H., Breitschwerdt E.B., Little S.E. The increasing recognition of rickettsial pathogens in dogs and people. Trends Parasitol., 2010, vol. 26, iss. 4, pp. 205–212. doi: 10.1016/j.pt.2010.01.007

44. Oliveira K.A., Oliveira L.S., Dias C.C.A., Silva Jr.A., Almeida M.R., Almada G., Bouyer D.H., Galvão M.A.M., Mafra C.L. Molecular identification of Rickettsia felis in ticks and fleas from an endemic area for Brazilian Spotted Fever. Mem. Inst. Oswaldo Cruz, 2008, vol. 103, no. 2, pp. 191–194. doi: 10.1590/S0074-02762008000200011

45. Parola P., Paddock C.D., Socolovschi C., Labruna M.B., Mediannikov O., Kernif T., Abdad M.Y., Stenos J., Bitam I., Fournier P.-E., Raoult D. Update on tick-borne rickettsioses around the world: a geographic approach. Clin. Microbiol. Rev., 2013, vol. 26, no. 4, pp. 657–702. doi: 10.1128/CMR.00032-13

46. Prusinski M.A., White J.L., Wong S.J., Conlon M.A., Egan C., Kelly-Cirino C.D., Laniewicz B.R., Backenson P.B., Nicholson W.L., Eremeeva M.E., Karpathy S.E., Dasch G.A., White D.J. Sylvatic typhus associated with flying squirrels (Glaucomys volans) in New York State, United States. Vector Borne Zoonotic Dis., 2014, vol. 14, iss. 4, pp. 240–244. doi: 10.1089/vbz.2013.1392

47. Raoult D., Roux V. Rickettsioses as paradigms of new or emerging infectious diseases. Clin. Microbiol. Rev., 1997, vol. 10, no. 4, pp. 694–719.

48. Reif K.E., Macaluso K.R. Ecology of Rickettsia felis: a review. J. Med. Entomol., 2009, vol. 46, no. 4, pp. 723–736.

49. Shpynov S., Fournier P.-E., Pozdnichenko N., Gumenyuk A., Skiba A. New approaches in the systematics of Rickettsiae. New Microbes New Infect., 2018, vol. 23, pp. 93–102. doi: 10.1016/j.nmni.2018.02.012

50. Shpynov S., Pozdnichenko N., Gumenuk A. Approach for classification and taxonomy within family Rickettsiaceae based on the Formal Order Analysis. Microbes Infect., 2015, vol. 17, iss. 11–12, pp. 839–844. doi: 10.1016/j.micinf.2015.09.012

51. Simser J.A., Rahman M.S., Dreher-Lesnick S.M., Azad A.F. A novel and naturally occurring transposon, ISRpe1 in the Rickettsia peacockii genome disrupting the rickA gene involved in actin-based motility. Mol. Microbiol., 2005, vol. 58, iss. 1, pp. 71–79. doi: 10.1111/j.1365-2958.2005.04806.x

52. Soares H.S., Barbieri A.R.M., Martins T.F., Minervino A.H.H., de Lima J.T.R., Marcili A., Gennari S.M., Labruna M.B. Ticks and rickettsial infection in the wildlife of two regions of the Brazilian Amazon. Exp. Appl. Acarol., 2015, vol. 65, iss. 1, pp. 125–140. doi: 10.1007/s10493-014-9851-6

53. Socolovschi C., Mediannikov O., Raoult D., Parola P. The relationship between spotted fever group Rickettsiae and ixodid ticks. Vet. Res., 2009, vol. 40, no. 4: 34. doi: 10.1051/vetres/2009017

54. Socolovschi C., Pages F., Ndiath M.O., Ratmanov P., Raoult D. Rickettsia species in African Anopheles mosquitoes. PLoS One, 2012, vol. 7, iss. 10: e48254. doi: 10.1371/journal.pone.0048254

55. Stothard D.R., Clark J.B., Fuerst P.A. Ancestral divergence of Rickettsia bellii from the spotted fever and typhus groups of Rickettsia and antiquity of the genus Rickettsia. Int. J. Syst. Bacteriol., 1994, vol. 44, iss. 4, pp. 798–804. doi: 10.1099/00207713-44-4-798

56. Tamura A., Ohashi N., Urakami H., Miyamura S. Classification of Rickettsia tsutsugamushi in a new genus, Orientia gen. nov., as Orientia tsutsugamushi comb. nov. Int. J. Syst. Bacteriol., 1995, vol. 45, iss. 3, pp. 589–591. doi: 10.1099/00207713-45-3-589

57. Traub R., Wisseman C.L.Jr. The ecology of chigger-borne rickettsiosis (scrub typhus). J. Med. Entomol., 1974, vol. 11, iss. 3, pp. 237–303. doi: 10.1093/jmedent/11.3.237

58. Traub R., Wisseman C.L.Jr, Farhang-Azad A. The ecology of murine typhus: a critical review. Trop. Dis. Bull., 1978, vol. 75, no. 4, pp. 237–317.

59. Weiss E., Moulder J.W. Order I. Rickettsiales, Gieszczkiewicz 1939. Bergey’s manual of systematic bacteriology. Baltimore: Williams and Wilkins, 1984, vol. 1, pp. 687–703.

60. Wisseman Ch.L.Jr. Observation on global aspects of louse-borne typhus transmission and potential. Proc. Intern. Symp. The control of lice and louse-borne diseases. Washington, 1973, pp. 60–66.

61. Zemtsova G., Killmaster L.F., Mumcuoglu K.Y., Levin M.L. Co-feeding as a route for transmission of Rickettsia conorii israelensis between Rhipicephalus sanguineus ticks. Exp. Appl. Acarol., 2010, vol. 52, no. 4, pp. 383–392. doi: 10.1007/s10493-010-9375-7


Для цитирования:


Шпынов С.Н., Поздниченко Н.Н., Гуменюк А.С., Скиба А.А. ГЕНОМОСИСТЕМАТИКА РИККЕТСИЙ. Инфекция и иммунитет. 2018;8(2):107-118. https://doi.org/10.15789/2220-7619-2018-2-107-118

For citation:


Shpynov S.N., Pozdnichenko N.N., Gumenyuk A.S., Skiba A.A. GENOMOSYSTEMATICS OF RICKETTSIAE. Russian Journal of Infection and Immunity. 2018;8(2):107-118. (In Russ.) https://doi.org/10.15789/2220-7619-2018-2-107-118

Просмотров: 209


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2220-7619 (Print)
ISSN 2313-7398 (Online)