Preview

Инфекция и иммунитет

Расширенный поиск

TIME-KILL ASSAY: ЭФФЕКТИВНОСТЬ СИНЕРГИДНОГО ДЕЙСТВИЯ КАРБАПЕНЕМОВ И КЛОДРОНОВОЙ КИСЛОТЫ

https://doi.org/10.15789/2220-7619-2018-4-497-502

Полный текст:

Аннотация

Резюме. В связи с возросшей частотой выделения изолятов грамотрицательных микроорганизмов, резистентных к карбапенемам, важным остается поиск способов усиления действия этого класса антибиотиков. Одним из возможных способов решения этой проблемы является комбинация карбапенемов с препаратами — ингибиторами металло-бета-лактамаз (МБЛ). К сожалению, в настоящее время разрешенных для применения в клинике ингибиторов МБЛ карбапенемрезистентных микроорганизмов. Патогенные микроорганизмы могут переживать антибиотическую атаку, проявлять свойства толерантности и персистенции, при этом инфекционный процесс продолжается. В связи с этим важно определение зависимости между бактерицидным действием антимикробных средств и временем экспозиции их воздействия на микроорганизм не в одной временной точке через 24 ч инкубации, а в нескольких — через 4, 8, 12 и 24 ч, так называемая кривая зависимости «время — летальное действие» (time-kill assay). Синергидный эффект двух препаратов отмечается при условии снижения уровня микробной популяции на ≥ 3 log10. Для оценки эффективности синергидного действия карбапенемов и клодроновой кислоты использовали микрометод перекрестного титрования («шахматной доски») с последующим высевом содержимого ячеек на плотную питательную среду в разные временные промежутки. Исследования проводили в отношении клинического штамма Pseudomonas aeruginosa 532/14, выделенного от пациентов с инфекционными осложнениями, продуцирующего МБЛ генотипа VIM и характеризующегося высокой степенью резистентности к карбапенемам (МПК имипенама или меропенема 512 мкг/мл); микробная нагрузка 106 КОЕ/мл. На ридере ELx800 проводили измерение оптической плотности при двух длинах волн (490 и 630 нм) при экспозициях от 4 до 24 ч и выявляли время появления логарифмичес кой фазы роста тест-культуры. Следует отметить, что при бихроматическом измерении значение оптической плотности является разницей двух измерений, при этом значительно снижается погрешность результатов, вызванная царапинами или отпечатками пальцев на планшете. В исследовании показана способность клод роновой кислоты проявлять синергидный бактерицидный эффект с карбапенемами в отношении клиничес кого резистентного штамма P. aeruginosa 532/14, продуцирующего металло-бета-лактамазу генотипа VIM. При этом в таком сочетании антимикробное действия у имипенема начинается с 8 часов инкубации до уровня 1,4 log10 по сравнению с контролем, а с 12 ч отмечено полное подавление роста тест-культуры. При этом снижение роста тест-штамма составило 6 log10. Меропенем в комбинации с клодроновой кислотой проявлял более выраженную активность: полное отсутствие роста P. aeruginosa 532/14 к 8 часам инкубации, подавление роста на 3,2 log10. Этот показатель через 12–24 ч составил 6 log10. Получение кривой зависимости «время — летальное действие» позволяет выявлять эффективные комбинации карбапенемов и ингибиторов металло-бета-лактамаз грамотрицательных бактерий, что имеет большое значение для повышения эффективности лечения тяжелых гнойно-септических осложнений у пациентов.

Об авторах

А. Г. Афиногенова
ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург; Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург
Россия

д.б.н., руководитель испытательного лабораторного центра;

профессор кафедры челюстно-лицевой хирургии и хирургической стоматологии СПбГУ

197101, Россия, Санкт-Петербург, ул. Мира, 14
Тел.: 8 (812) 232-86-31 (служебн.); 8 921 557-88-94 (моб.)



Т. М. Ворошилова
ФГБУ Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины им. А.М. Никифорова МЧС России, Санкт-Петербург
Россия
врач-бактериолог, зав. лабораторией бактериологических исследований


Г. Е. Афиногенов
Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург
Россия
д.м.н., профессор кафедры челюстнолицевой хирургии и хирургической стоматологии СПбГУ


Д. Ю. Мадай
Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург
Россия
д.м.н., профессор, зав. кафедрой челюстнолицевой хирургии и хирургической стоматологии СПбГУ


А. А. Спиридонова
ФГБОУ ВО Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. академика Павлова, Санкт-Петербург
Россия
врач-бактериолог, зав. отделением клинической микробиологии


Список литературы

1. Афиногенова А.Г., Ворошилова Т.М., Афиногенов Г.Е., Мадай Д.Ю. Оценка эффективности нового ингибитора металло-бета-лактамазы в условиях модельной системы in vitro // Инфекция и иммунитет. 2016. Т. 6, № 4. С. 335– 344. [Afinogenova A.G., Voroshilova T.M., Afinogenov G.E., Maday D.Y. The new metall-beta-lactamase’s inhibitor efficacy in a model system in vitro. Infektsiya i immunitet = Russian Journal of Infection and Immunity, 2016, vol. 6, no. 4, pp. 335–344. doi: 10.15789/2220-7619-2016-4-335-344 (In Russ.)]

2. Афиногенова А.Г., Ворошилова Т.М., Афиногенов Г.Е., Родионов Г.Г. «Метод шахматной доски» как тест для оценки снижения уровня резистентности грамотрицательных микроорганизмов к карбапенемам в присутствии бисфосфоната // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2015. Т. 17, № 1. С. 24–32. [Afinogenova A.G., Voroshilova T.M., Afinogenov G.E., Rodionov G.G. «Checkerboard array» as a test for evaluation of decrease of microbial resistance decrease to capbapenems in the presence of bisphosphonate. Klinicheskaya mikrobiologiya i antimikrobnaya khimio terapiya = Clinical Microbiology and Antimicrobial Chemotherapy, 2015, vol. 17, no. 1, pp. 24–32. (In Russ.)]

3. Борисова М.И., Лазакович Д.Н., Сидорова Н.А., Савушкин А.И. Биопленкообразующая активность и феномен персистенции микроорганизмов // Journal of Biomedical Technologies. 2015. № 2. С. 28–35. [Borisova M.I., Lazakovich D.N., Sidorova N.A., Savushkin A.I. Biofilm-forming activity and the phenomenon of persistense in microorganisms. Journal of Biomedical Technologies, 2015, no. 2, pp. 28–35. doi: 10.15393/j6.art.2015.3382 (In Russ.)]

4. Бухарин О.В. Персистенция бактериальных патогенов как физиологический феномен // Вестник Московского Университета. Серия 16. Биология. 2008. № 1. С. 6–13. [Bukharin O.V. Persistence of bacterial pathogens as a physiological phenomenon. Vestnik Moskovskogo universiteta. Seriya 16. Biologiya = Herald of the Moscow State University. Series 16. Biology, 2008, no. 1, pp. 6–13. (In Russ.)]

5. Определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам: методические указания. М.: Федеральный центр госсанэпиднадзора Минздрава России, 2004. 91 с. [Determination of the sensitivity of microorganisms to antimicrobial drugs: methodological guidelines. Moscow: Federal Center for State Sanitary and Epidemiological Supervision of the Russian Ministry of Health, 2004, 91 p.]. URL: http://fcgie.ru/download/elektronnaya_baza_metod_dokum/muk_1890-04.pdf (19.10.2018)]

6. Поляк М.С. Лабораторное обеспечение антибиотикотерапии. СПб.: ООО «Анатолия», 2012. 256 с. [Polyak M.S. Laboratornoe obespechenie antibiotikoterapii [Laboratory provision of antibiotic therapy]. SPb: LLC “Anatoliya”, 2012. 256 p.]

7. Aiyegoro O.A., Afolayan A.J., Okoh A.I. In vitro time kill assessment of crude methanol extract of Helichrysum pedunculatum leaves. African J. Biotechnol., 2008, vol. 7, no. 11, pp. 1684–1688. doi: 10.5897/AJB08.055

8. Basri D.F., Khairon R. Pharmacodynamic interaction of Quercus infectoria galls extract in combination with vancomycin against MRSA using microdilution checkerboard and time-kill assay. Evid. Based Complement. Alternat. Med., 2012, vol. 2012: 493156. doi: 10.1155/2012/493156

9. Bedenic B., Vraneš J., Sviben M., Beader N., Kalenić S. Postantibiotic and post-beta-lactamase inhibitor effect of carbapenems combined with EDTA against Pseudomonas aeruginosa strains producing VIM-metallo beta-lactamases. Chemotherapy, 2008, vol. 54, pp. 188–193. doi: 10.1159/000140461

10. Bhardwaj M., Singh B.R., Sinha D.K., Kumar V., Prasanna Vadhana O.R., Varan Singh S., Nirupama K.R., Pruthvishree and Archana Saraf B.S. Potential of herbal drug and antibiotic combination therapy: a new approach to treat multidrug resistant bacteria. Pharm. Anal. Acta, 2016, vol. 7, no. 11. doi: 10.4172/2153-2435.1000523

11. Drawz S.M., Bonomo R.A. Three decades of β-lactamase inhibitors. Clin. Microb. Rev., 2010, vol. 23, no. 1, pp. 160–201. doi: 10.1128/CMR.00037-09

12. Eliopoulos G.M., Moellering R.C. Antimicrobial combinations. In: Antibiotics in Laboratory Medicine; 4th edition. Ed. V. Lorian. Baltimore, MD, USA: Williams & Wilkins, 1996, pp. 330–396.

13. Leber A. Synergism testing: broth microdilution checkerboard and broth macrodilution methods. In: Clinical Microbiology Procedures Handbook; 4th edition. Washington, DC: ASM Press, 2016, pp. 5.16.1-5.16.23. doi: 10.1128/9781555818814.ch5.16

14. Rani R., Sharma D., Chaturvedi M., Yadav J.P. Antibacterial activity of twenty different endophytic fungi isolated from Calotropis procera and time kill assay. Clin. Microbiol., 2017, vol. 6, no. 3. doi: 10.4172/2327-5073.1000280


Для цитирования:


Афиногенова А.Г., Ворошилова Т.М., Афиногенов Г.Е., Мадай Д.Ю., Спиридонова А.А. TIME-KILL ASSAY: ЭФФЕКТИВНОСТЬ СИНЕРГИДНОГО ДЕЙСТВИЯ КАРБАПЕНЕМОВ И КЛОДРОНОВОЙ КИСЛОТЫ. Инфекция и иммунитет. 2018;8(4):497-502. https://doi.org/10.15789/2220-7619-2018-4-497-502

For citation:


Afinogenova A.G., Voroshilova T.M., Afinogenov G.E., Maday D.Y., Spiridonova A.A. TIME-KILL ASSAY: AN EFFICACY OF SYNERGY BETWEEN CARBAPENEMS AND CLODRONIC ACID. Russian Journal of Infection and Immunity. 2018;8(4):497-502. https://doi.org/10.15789/2220-7619-2018-4-497-502

Просмотров: 120


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2220-7619 (Print)
ISSN 2313-7398 (Online)