Preview

Инфекция и иммунитет

Расширенный поиск
Том 8, № 2 (2018)
Скачать выпуск PDF
https://doi.org/10.15789/2220-7619-2018-2

ОБЗОРЫ

107-118 194
Аннотация

Определение термина «геном» было дано немецким ученым-ботаником Г. Винклером почти сто лет назад, в 1920 году. Недавно было представлено определение генома для бактерий  (риккетсий) с одной хромосомой с позиции теории информации, биологии и  биоинформатики как информационной цепи нуклеотидов. Систематика риккетсий,  являющихся облигатными внутриклеточными микроорганизмами, основана на ограниченном количестве фенотипических признаков. Классификации, построенные при анализе генов,  фрагментов геномов и их конкатенаций вызывают дискуссии. Применение разработанного  аппарата формального анализа строя (http://foarlab.org) при изучении полноразмерных  геномов позволило представить систематику риккетсий и Orientia tsutsugamushi из  семейства Rickettsiaceae. Использование этого подхода подтвердило существование групп  сыпного тифа, клещевой пятнистой лихорадки (КПЛ) и «предковой» группы внутри рода  Rickettsia и позволило выделить внутри этого рода группу Rickettsia felis, располагающуюся  между «предковой» группой и группой КПЛ, и группу R. akari на границе между группой  КПЛ и родом Orientia. Разработка инструментов формального анализа строя — «Карта  генов» и «Матрица сходства» — помогла провести углубленное изучение полноразмерных  геномов риккетсий с учетом характеристик их генов и некодирующих последовательностей.  Применение данных инструментов позволило подтвердить с помощью полученной  классификации представление об экологических особенностях риккетсий, структуре  нозологических форм и эпидемиологических закономерностях риккетсиозов, а также  оценить вирулентность штаммов двух наиболее патогенных видов риккетсий — R. prowazekii и R. rickettsii. В данной работе впервые удалось осуществить целостное, согласованное и  многоаспектное рассмотрение совокупности близкородственных бактерий (семейства  бактерий) и связанных с ними проявлений. В основу разработанного и описанного здесь системного подхода к изучению бактерий положена новая математическая модель —  расположение нуклеотидов в полноразмерном геноме и его чувствительные однозначные  числовые характеристики. Предложенный методологический подход назван  «геномосистематика» и основывается на математическом моделировании полноразмерных  геномов риккетсий (бактерий) с помощью средств формального анализа строя. Классификация риккетсий и риккетсиозов, полученная с помощью этого подхода,  соответствует экологическим, эпидемиологическим и этиологическим принципам.  Применение геномосистематики может послужить выполнению задач и целей  профилактической медицины. Публикация является завершением этапа серии научных исследований по разработке методологии комплексного подхода, основанного на  применении новых средств математического моделирования при изучении объектов и  закономерностей естественнонаучных дисциплин биологического и медицинского профиля.

119-126 98
Аннотация

Сепсис представляет собой угрожающее жизни нарушение функций внутренних органов, вызванное дизрегуляцией макроорганизма инфекционным агентом, и является сложным  взаимодействием провоспалительных и противовоспалительных процессов, что нередко  определяет судьбу пациента. Предопределяющим фактором сепсиса является именно  возбудитель. Вызываемая возбудителем иммуносупрессия способствует генерализации  инфекции, а интенсивная бактериемия, обусловленная генерализацией, приводит к  нарастающей эндотоксинемии, что еще больше усугубляет иммуносупрессию и приводит в  конечном итоге к системной воспалительной реакции — основному и наиболее опасному  проявлению сепсиса. В основе сепсиса лежит синдром системного воспаления с  неконтролируемым выбросом цитокинов. Патофизиологически сепсис начинается с бурной  воспалительной реакции, которая может длиться несколько дней, а затем переходить в  более затяжной иммуносупрессивный период, исход которого зависит от иммунной системы  больного. Клеточный апоптоз является одним из ведущих компонентов развития  иммуносупрессии при сепсисе. Нарушения механизмов апоптоза нейтрофилов утяжеляют  течение сепсиса и могут приводить к неблагоприятному исходу. Миграция нейтрофилов в  естественных условиях включает четыре различные фазы, которые также нарушаются во  время сепсиса. Механизмы, ухудшающие миграцию нейтрофилов и способствующие  развитию сепсиса, были исследованы в многочисленных научных работах. Авторами  Пекинского университета предложены схемы нарушения апоптоза нейтрофилов и миграции  нейтрофилов при сепсисе. Несмотря на огромный накопленный опыт по изучению  патогенеза септических состояний, в настоящее время отсутствуют эффективные и  специфические средства борьбы с сепсиса. Возможно, одним из путей предотвращения  нарушения программированной гибели клетки будет являться применение  антиапоптических цитокинов, ингибиторов каспаз.

127-138 125
Аннотация

Настоящий обзор посвящен оценке распространенности рекомбинантных форм ВИЧ в России и странах СНГ, с которыми имеются тесные социально-экономические связи. Был  проведен поиск на глубину 8 лет по базам данных Russian Science Citation Index и PubMed. В обзор включены 22 статьи, в которых приведены результаты 35 самостоятельных  поперечных исследований. Проведен метаанализ распространенности рекомбинантных форм ВИЧ в приложении Open Meta-analyst по методу Der Simonian & Laird с использованием  арксинусовой трансформации и поправочного коэффициента для нулевых результатов.  Дополнительно использованы анализ в подгруппах и метарегрессия (по дате сбора  материала). Обобщенная распространенность рекомбинантных форм ВИЧ составила 21,3%  (95% ДИ 16,2–26,5) и характеризовалась высокой гетерогенностью. Были исследованы  образцов крови от 3494 больных ВИЧ-инфекцией, проживающих в различных субъектах РФ  и стран СНГ — Беларуси, Казахстане, Кыргызстане, Узбекистане, Таджикистане, Армении, Грузии. Среди субтипов ВИЧ-1 основную долю занимал субтип А (75,6%, n =  2643), субтип В — 5,5% (n = 193), С — 0,8% (n = 31), G — 0,2%, (n = 7), F — 0,14% (n =  5). Среди рекомбинантных форм (n = 616) доля CRF02_AG составляла 39,6% (n = 244),  CRF02_AG/A — 32,9% (n = 203), CRF63_02A1 — 15,9% (n = 98), CRF03_АВ — 5,2% (n = 32), CRF06_cpx — 2,1% (n = 13). Уникальные рекомбинантные формы составили 2,7% (n = 17),  в том числе URF63_A1 (2,5%). На территории России наибольшая распространенность  рекомбинантных форм ВИЧ-1 отмечена на территории Сибирского федерального округа —  33,2% (95% ДИ 12,2–54,1), наименьшая — в Северо-Западном федеральном округе — 1,6%  (95% ДИ 0,9–2,3). В странах СНГ наибольшая распространенность рекомбинантных форм  ВИЧ-1 выявлена в подгруппе среднеазиатских республик — Узбекистана, Таджикистана,  Кыргызстана, Казахстана — 51,7% (95% ДИ 38,5–64,9). Обнаружен статистически значимый восходящий тренд метарегрессии. Данный обзор является первым подобным исследованием  в России и представляет определенный интерес, однако результаты должны использоваться  с осторожностью из-за высокого риска публикационного смещения и существенной гетерогенности обобщенной оценки.

139-149 1034
Аннотация

Антиретровирусная терапия (АРВТ), направленная на угнетение репликации ВИЧ, способствует рос ту количества CD4-лимфоцитов, а также частичному восстановлению или  активации функции иммунной системы. Следствием является снижение частоты  возникновения оппортунистических заболеваний, увеличение продолжительности и  качества жизни людей, живущих с ВИЧ (ЛЖВ). Однако у некоторых пациентов с  выраженной иммуносупрессией это может сопровождаться ухудшением состояния и рисками формирования синдрома восстановления иммунитета (СВИ), который проявляется в виде  развития новых или ранее пролеченных оппортунистических, вторичных и обострением  неинфекционных заболеваний на фоне вирусологически эффективной АРВТ. Частота  развития СВИ колеблется в широких пределах, в случаях туберкулез-ассоциированного  проявления может достигать 50%. Факторами риска развития СВИ являются низкое  исходное количество CD4-лимфоцитов и высокое содержание РНК ВИЧ в крови, наличие  оппортунистических инфекций в процессе начала АРВТ. В обзоре рассмотрены вопросы  терминологии, другие возможные факторы риска развития синдрома, закономерности  патологического процесса. Приведены эпидемиологическая статистика СВИ,  патогенетические основы, варианты клинических и клинико-лабораторных проявлений  осложнений. Рассмотрены критерии диагностики синдрома, а также необходимые условия  для его возникновения. Особое внимание обращено к наиболее часто встречающимся  оппортунистическим инфекциям, обуславливающих манифестацию СВИ, особенностям и  полиморфизму клинических проявлений и профилактике их возникновения. На данный  момент наблюдается учащение выявления ВИЧ-инфекции на поздних стадиях. Освещены  лабораторные и клинические различия проявлений синдрома приобретенного  иммунодефицита (СПИД) и СВИ. В виду размытости диагностических критериев, в РФ  специалисты редко выставляют СВИ в клинический или патологический диагнозы, поэтому  проследить частоту встречаемости данного состояния достаточно сложно.  Систематизированы клинические и лабораторные проявления, что позволяет на основании  их совокупности формулировать этот диагноз. Профилактика СВИ заключается в  благоразумном назначении антиретровирусных препаратов (АРВП). Необходимо проведение  качественной и своевременной диагностики сопутствующих заболеваний инфекционной и  неинфекционной природы перед началом АРВТ и в процессе лечения, назначение  эффективной этиотропной терапии оппортунистнических и вторичных инфекций. В целях  улучшения прогноза течения ВИЧ-инфекции, предпочтительно раннее начало АРВТ при устойчивых показателях CD4-лимфоцитов и низком содержании РНК ВИЧ в крови.

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

150-156 98
Аннотация

Моноцитарный хемоаттрактантный протеин-1 (МСР-1) — низкомолекулярный цитокин, секретируемый многими клетками организма. Синтез МСР-1 могут индуцировать  липополисахариды бактерий, ряд цитокинов. Считается, что МСР-1 регулирует миграцию и  инфильтрацию тканей моноцитами, Т-лимфоцитами памяти, натуральными киллерными  клетками, участвует в дифференцировке «наивных» Т-хелперов. Имеются данные об  онкогенной и противоопухолевой активности МСР-1 на разных этапах опухолевой прогрессии.

Целью работы явилось определение и сопоставление сывороточного уровня МСР-1 с инфицированностью Helicobacter (Н.) pylori при предраковых состояниях и раке желудка.

Материал и методы. Обследованы при получении информированного согласия 204  больных с предопухолевыми заболеваниями желудка, 40 больных раком желудка и 40  здоровых добровольцев. У обследованных при эзофагогастродуоденоскопии проводили  забор материала при прицельной биопсии для гистологического и микробиологического  исследований. Кровь на иммунологическое обследование забиралась в утренние часы  натощак из локтевой вены в объеме 5 мл в пробирку без консервантов, сыворотка  выделялась центрифугированием в течение 10 мин. Иммуноферментным методом в  сыворотке крови обследуемых определяли уровень МСР-1, титр суммарных антител к цитотоксин-ассоциированному протеину H. pylori. Полученные данные статистически обработали.

Результаты. Количество МСР-1 в сыворотке крови обследованных больных значимо превышало данные здоровых лиц во всех группах сравнения. Значения МСР-1 при  обострении язвенной болезни желудка были выше показателя больных с обострением  хронического неатрофического и очагово-атрофического гастрита. Концентрация МСР-1 >  280 пг/мл определилась у 17,6% больных с предраковыми состояниями желудка. При  ульцерозном процессе отмечалась сильная прямая взаимосвязь тяжести его течения и  количества МСР-1 в сыворотке крови. Сывороточный уровень МСР-1 у 5,0% больных раком  желудка находился на верхней границе нормальных значений, а у 77,5% больных  превышал ее. Показатель при раке желудка значимо превалировал над значениями при  предраковых состояниях, был взаимосвязан со стадией опухолевого процесса. Уровень  МСР-1 в сыворотке крови обследованных здоровых добровольцев, больных с обострением хронического гастрита, язвенной болезни желудка, полипозом, раком желудка  был взаимосвязан с титрами суммарных антител к цитотоксин-ассоциированному протеину H. pylori.

Заключение. Определение сывороточного уровня МСР-1 при предраковых состояниях и раке желудка является диагностически ценным. Сопоставление значений показателя с  титрами суммарных антител к цитотоксин-ассоциированному протеину H. pylori  прогностически значимо, так как позволяет оценить выраженность индукционного сигнала к цитокинопродукции.

157-163 161
Аннотация

Целью исследования было изучение кислородозависимого фагоцитоза моноцитов крови у детей с эрозивно-язвенным поражением желудка и 12-перстной кишки с помощью  хемилюминесцентного анализа. Объектами исследования служили моноциты крови,  выделенные у 44 детей с эрозивно-язвенным поражением желудка и 12-перстной кишки в  возрасте от 11 до 18 лет. В результате микроскопического исследования биоптатов  слизистой оболочки желудка (СОЖ) из стандартных зон и краев язвенных дефектов были  выделены 2 группы больных с эрозивно-язвенным поражением желудка и 12-перстной  кишки: 1 группа — c наличием высокой степени обсемененности бактериями Helicobacter  pylori и 2 группа — с низкой степенью обсемененности. Исследование люминол-зависимой  хемилюминесценции моноцитов крови у больных с высокой степенью обсемененности  слизистой желудка и 12-перстной кишки H. pylori показало достоверное повышение  интенсивности и площади под кривой спонтанной реакции и площади под кривой в зимозан- индуцированном процессе относительно активности моноцитов в группе с низкой  обсемененностью. В люцигенин-зависимой хемилюминесцентной реакции в группе больных  с высокой обсемененностью H. pylori наблюдалось достоверное повышение времени выхода  на пик в спонтанной реакции и зимозан-индуцированном процессе при повышении индекса  активации по сравнению с фагоцитарной активностью моноцитов в группе с низкой обсемененностью. Дальнейшим этапом эксперимента было выявление CagA- позитивных штаммов H. pylori у детей с эрозивно-язвенным поражением желудка и 12- перстной кишки. Исследование хемилюминесцентной активности моноцитов крови у  больных с анти-CagA антителами показало достоверное повышение времени выхода на пик,  интенсивности и площади под кривой в спонтанном процессе в люминол-зависимой реакции и времени выхода на пик и интенсивности в спонтанной хемилюминесцентной реакции, где  активатором является люцигенин. Таким образом, в результате исследования было  установлено повышение активности кислородозависимого фагоцитоза моноцитов крови у  детей с эрозивно-язвенным поражением желудка и 12-перстной кишки, ассоциированным H. pylori при повышении обсемененности бактериями H. pylori. Увеличение обсемененности  бактериями H. pylori повышает степень воспаления СОЖ. При воспалении активные фагоциты интенсивнее генерируют образование активных форм кислорода, свободных  радикалов и продуктов перекисного окисления. Присутствие CagA-позитивных штаммов H.  pylori, как правило, сопровождаются более высокой степенью воспалительной активности,  чем CagA-негативных. В результате такого воздействия повышается функциональная  активность моноцитов, поскольку именно они являются «профессиональными» фагоцитами. Способность к фагоцитозу в них выражена больше, чем у других лейкоцитов.

164-168 164
Аннотация

Род Сomamonas, описанный в 1985 году, включал один вид — Сomamonas terrigena. В настоящее время род Сomamonas включает 21 вид. Способность бактерий рода Сomamonas  выживать в объектах внешней среды (пробах воды, почвы и растений), в том числе во  влажных условиях госпитальной среды и на медицинском оборудовании, позволяет считать  их условно-патогенными микроорганизмами. Цель исследования состояла в изучении  биологических свойств и чувствительности к антибиотикам штаммов Сomamonas kerstersii, выделенных из проб испражнений здоровых людей, проживающих в Санкт- Петербурге и Гвинейской Респуб лике. Работа проводилась в лаборатории кишечных  инфекций ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург.  Исследованы 1532 пробы фекалий, полученных от жителей Санкт-Петербурга и 46 проб  жителей Гвинейской Республики. Родовую и видовую идентификацию выделенных  микроорганизмов проводили, используя рутинные биохимические тесты; коммерческую  тест-систему «НЕФЕРМ тест24» (MIKROLATEST, Эрба Рус, РФ) и бактериологический  анализатор Vitek 2 Compact (BioMerieux). Трудноидентифицируемые микроорганизмы  исследовали масс-спектрометрическим методом на MALDI-TOF масс-спектрометре «Microflex  LRF». Чувствительность к антибиотикам определяли методом градиентных концентраций с  полосками M.I.C.Evaluator™ (OXOID, Великобритания) на агаре Мюллера-Хинтон (НИЦФ,  Россия). В составе микробиоты кишечника у 1532 жителей Санкт-Петербурга были выделены 2 штамма С. kerstersii (0,13%). При обследовании 46 жителей Гвинейской  Республики в 8 случаях (17,4%) были выделены С. kerstersii. Идентификация штаммов С.  kerstersii с использованием различных методов дала различные результаты: рутинные  биохимические тесты позволили отнести штаммы к группе неферментирующих  грамотрицательных бактерий; «НЕФЕРМ тест24» идентифицировал штаммы как С.  testosteroni; анализатор VITEC 2 отнес штаммы к С. testosteroni; методом масс- спектрометрии с коэффициентом совпадения 2,19–2,33 все штаммы идентифицированы как  С. kerstersii. Следует учесть, что бактерии С. kerstersii не могут быть идентифицированы  тестами, входящими в набор «НЕФЕРМ тест24» и карту GN VITEC 2, так как в базах данных  обоих методов представлена характеристика только С. testosteroni. Таксономическая база  масс-спектрометрии включает эталонные спектры пяти видов Сomamonas из 21 известных,  в том числе и С. kerstersii. Штаммы, выделенные от жителей Гвинейской Республики,  характеризовались нечувствительностью хотя бы к одному тестируемому антибиотику:  ципрофлоксацину (4 штамма), тетрациклину (5 штаммов) и триметоприм/сульфаметоксазолу (5 штаммов), причем практически все штаммы характеризовались одновременно  нечувствительностью к нескольким АМП: ципрофлоксацину и триметоприм/сульфаметоксазолу (2 штамма), тетрациклину и триметоприм/сульфаметоксазолу (2  штамма), ципрофлоксацину и тетрациклину (1 штамм). Один штамм был нечувствителен  одновременно к ципрофлоксацину, тетрациклину и триметоприм/сульфаметоксазолу.

169-174 101
Аннотация

При высоком уровне генетически обусловленной чувствительности к туберкулезу (ТБ) гранулематозные реакции в ткани легкого не справляются с задачей по изолированию очага инфекции и приводят к диффузным поражениям легочной ткани, слиянию гранулем и  образованию некротических очагов. Неконтролируемое воспаление наносит тяжелый урон  дыхательной функции легкого, поэтому для контроля инфекции необходим баланс между  защитными и патогенетическими реакциями иммунного ответа. Важными клеточными  регуляторами воспаления являются незрелые регуляторные дендритные клетки (DCreg) и  регуляторные Т-лимфоциты (Treg). Ранее мы показали, что клетки стромы легкого в  культуре in vitro поддерживают развитие DCreg с фенотипом CD11b+CD11clowCD103– из  предшественников, выделенных из костного мозга. Было также установлено, что между  чувствительными и резистентными к ТБ мышами имеются заметные различия по размерам и  динамическим характеристикам популяции регуляторных Т-клеток CD4+Foxp3+ (Treg) в  легких: их количество у более резистентных мышей линии В6 достоверно выше, чем у  чувствительных мышей линии I/St. В настоящей работе было установлено, что адоптивный  перенос DCreg зараженным ТБ мышам генетически чувствительной линии I/St способен  индуцировать увеличение популяции Treg в ткани легкого. Увеличение пула Treg приводит к ослаблению туберкулезной легочной патологии, замедлению размножения микобактерий в  органе и снижению инфильтрации ткани легкого нейтрофилами, то есть к избирательному  снижению количества именно тех иммуноцитов, которые считаются основным фактором  патогенеза при ТБ генетически чувствительных животных. Основным отличием в характере  легочной патологии было отсутствие у реципиентов DCreg очагов деструкции легочной  ткани и зон некроза, которые обнаруживались в контрольной группе. При этом мыши всех  групп не отличались по уровню продукции регуляторных (IL-10 и TGF-β) и ключевых  воспалительных (IFNγ и IL-6) цитокинов клетками легкого. Этот результат дает основания  полагать, что умеренное снижение тяжести туберкулезного процесса в группе мышей с  повышенным содержанием Treg в легких может быть связано с подавлением воспаления не  через секреторные, а через контактные механизмы, множество которых широко используют  регуляторные клетки. Хотя терапевтический эффект переноса клеток был умеренным, наши  результаты можно рассматривать как доказательство действенности клеточной терапии для регуляции воспаления легочной ткани при ТБ.

175-186 130
Аннотация

Фенотипические свойства штаммов M. tuberculosis, выделенных от больных легочным или внелегочным туберкулезом, определяются комплексом факторов: генетическими  особенностями патогена, его способностью к адаптации in vivo и in vitro, воздействием  иммунной системы хозяина, влиянием химиотерапии. Наиболее доступным для  исследования взаимоотношений хозяин-патоген на уровне «макроорганизм/ штаммовая  популяция» является фенотипическое свойство — скорость роста. Темп репликации, как  правило, исследуют в сопоставлении с лекарственной чувствительностью микобактерий или  с их генотипическими особенностями. Целью работы была оценка in vitro скорости роста  штаммов M. tuberculosis, выделенных из диагностического материала больных туберкулезом  при легочной и внелегочной локализации, нелеченых и леченых (оперированных и  неоперированных), а также чувствительных и устойчивых изолятов в сравнении с  референтным штаммом H37Rv. Для оценки скорости роста 116 клинических изолятов  использовали модификацию метода, предложенного A. von Groll et al.: для построения  кривой роста измеряли интенсивность флуоресценции в 96-луночном планшете (с помощью  индикатора резазурина) ежедневно в течение 8 дней. Скорость роста определяли как  наклон полученной кривой. Вычисляли средние значения в группах: 1 — нелеченые  больные туберкулезом органов дыхания (ТОД), респираторный материал; 2 — леченые неоперированные больные ТОД, респираторный материал; 3 группа — леченые  оперированные больные ТОД (преимущественно с хроническим и гиперхроническием  течением процесса), респираторный материал; 4 — аналогичные пациенты, операционный  материал; 5 — больные костно-суставным туберкулезом (КСТ), операционный материал.  Кроме того, исследовали группы чувствительных и резистентных штаммов, между которыми  значимых различий в скорости роста не обнаружили. Параметры роста штаммов,  выделенных из материала больных ТОД, превышали таковые при КСТ. Это объясняется  менее благоприятными условиями вегетации возбудителя при КСТ. Поскольку при  локализации туберкулезного поражения, отграниченного от внешней среды, невозможна  передача возбудителя к другому хозяину, то невозможна и селекция штаммов по  способности выживать в тканях костно-суставной системы, следовательно, в этом случае  следует говорить об адаптации штаммовой популяции патогена к индивидуальному хозяину. Скорость роста изолятов от нелеченых пациентов с ТОД была выше, чем у леченых.  Сравнение параметров роста только МЛУ штаммов 1–5 групп для устранения влияния  фактора чувствительности/устойчивости в целом выявило ту же картину. Снижение  скорости роста штаммов, выделенных от леченых пациентов с ТОД, мы считаем результатом не только лечения, но и адаптации патогена к его окружающей среде — внутренней среде  макроорганизма. Для подтверждения этого предположения оценили бактериальную  нагрузку 1083 образцов диагностического материала, сгруппированных аналогичным  образом, при этом отбирали только МЛУ/ШЛУ штаммы. В группах леченых больных частота  высокой обсемененности (КОЕ ≥ 100) достигала 52,5–63,8%, что свидетельствует о  сохранении жизнеспособности возбудителя у таких пациентов. Скорость роста не адаптированного (вследствие длительных пассажей на искусственных средах) к  макроорганизму штамма H37Rv по средним значениям была значимо выше, чем во всех  группах клинических штаммов. Таким образом, выявлена гетерогенность фенотипических  свойств клинических штаммов M. tuberculosis по признаку скорости роста. Скорость роста клинических штаммов M. tuberculosis зависит от локализации процесса (ТОД, КСТ) и  совместного воздействия факторов лечения пациентов и адаптации патогена к хозяину.

187-194 88
Аннотация

Интерлейкин-2 (IL-2) является одним из важнейших цитокинов, участвующих в процессах регуляции врожденного и адаптивного иммунитета. Его основная иммунологическая  функция состоит в регуляции специфического (антигензависимого) иммунного ответа путем  стимуляции пролиферации и дифференцировки иммунных клеток, участвующих в его  реализации, в том числе Т-лимфоцитов. Дисфункция клеточного звена иммунитета является  основным патогенетическим механизмом развития ВИЧ-инфекции.

Цель работы: выявление закономерностей изменения уровней IL-2 у ВИЧ-инфицированных пациентов на фоне сформированной лекарственной резистентности на поздних стадиях  инфекции. В исследование включены 83 пациента с ВИЧ-инфекцией, получающих  высокоактивную антиретровирусную терапию; контрольную группу составили 20 здоровых доноров крови. У всех пациентов проведено исследование эффективности антиретровирусной терапии, включающее оценку вирусной нагрузки ВИЧ и  уровней CD4+ Т-лимфоцитов. У пациентов с неэффективной антиретровирусной терапией  дополнительно проведено исследование лекарственной устойчивости ВИЧ методом  секвенирования по Сенгеру. По результатам секвенирования генома ВИЧ-инфицированные  пациенты с неэффективной антиретровирусной терапией были разделены на две подгруппы  — с выявленной лекарственной резистентностью (58,5%) и отсутствием  детектируемых мутаций резистентности в геноме (41,5%). У всех лиц, включенных в  исследование, измерены уровни IL-2 методом иммуноферментного анализа. При сравнении  уровней IL-2 между группами пациентов с сохраняющейся вирусной нагрузкой на фоне  антиретровирусной терапии (вирусная нагрузка выявляется) с лекарственной устойчивостью и без нее были получены достоверные различия (1,75±0,26 пг/мл против  1,95±0,29 пг/мл соответственно, р ≤ 0,05, U-критерий). Содержание IL-2 статистически  значимо ниже в группе пациентов, не достигших успеха на фоне антиретровирусной  терапии, чем в группе пациентов с эффективностью лечения (1,83±0,29 пг/мл против  4,89±0,55 пг/мл соответственно, р < 0,001, U-критерий). Таким образом, показано, что у  пациентов с выявленной лекарственной резистентностью на фоне прогрессирования ВИЧ- инфекции происходит снижение уровней IL-2. Увеличение его уровней у пациентов с ВИЧ- инфекцией, достигших вирусологического и иммунологического успеха проводимой терапии связано с восстановлением числа продуцирующих данный цитокин иммунных клеток (Т- лимфоцитов). Мы предполагаем, что значительное снижение уровней IL-2 вносит  дополнительный вклад в нарушение процессов пролиферации и дифференцировки  иммунокомпетентных клеток при ВИЧ-инфекции, что приобретает большое значение при  формировании лекарственной устойчивости ВИЧ в условиях постоянно сохраняющейся вирусной репликации.

195-200 127
Аннотация

Грипп является острой респираторной вирусной инфекцией, представляющей важную проблему для здравоохранения. Ежегодно грипп вызывает эпидемии, приводящие к  повышению заболеваемости и смертности во всех регионах земного шара. Благодаря  сегментарной организации генома и низкой точности его репликации вирус гриппа способен к ускользанию от иммунного ответа хозяина (антигенный дрейф), а также к селекции лекарственно-устойчивых вариантов. Это вызывает необходимость постоянного  мониторинга за чувствительностью вирусных изолятов к противовирусным препаратам и  разработке новых этиотропных противовирусных средств, имеющих альтернативные мишени и механизмы активности. Целью настоящего исследования была характеристика новых  производных аминобензимидазола как протективных средств при летальной гриппозной  инфекции у белых мышей. Эффективность соединений была оценена по их способности  снижать специфическую смертность животных в ходе летальной гриппозной пневмонии,  вызванной вирусом гриппа A/Puerto Rico/8/34 (H1N1), повышать продолжительность жизни  животных, а также нормализовать морфологическую структуру ткани легких по сравнению с  группой плацебо. Для всех изученных соединений было показано снижение  специфической смертности животных (от 20 до 60%). При этом препарат сравнения  (осельтамивир фосфат) снижал смертность мышей на 80%. Наибольшие показатели  протективной активности имело производное бензимидазола 2519, применение которого  снижало гибель животных на 60% и повышало среднюю продолжительность их жизни на 1,6 сут по сравнению с контрольной группой. Морфологический анализ показал, что активность  производного 2519 проявлялась в нормализации морфологической структуры ткани легких в ходе  гриппозной пневмонии. На 5 сут после инфицирования клетки бронхиального  эпителия выглядели сохранными, в отличие от разрушенных клеток с многочисленными  вирусными включениями у контрольных животных. Сами очаги воспаления занимали  меньшую по сравнению с контролем площадь. При этом корреляция между ранее  полученными данными о вирусингибирующем действии этих соединений in vitro и данными,  полученными на животных, отсутствовала. Это позволяет говорить о том, что несмотря на  наличие прямой противовирусной активности, выявляемой в опытах in vitro, протективные  свойства изученных аминобензимидазолов на животных обусловлены, помимо этиотропного  эффекта, другими, патогенетическими, факторами. Таким образом, аминопроизводные  бензимидазола следует рассматривать как соединения, перспективные для дальнейшей разработки и внедрения в качестве противогриппозных средств.

201-210 136
Аннотация

Целью исследования явилось изучение регуляторного влияния моноцитов и их субпопуляций на популяционный состав гранулоцитарных лейкоцитов и состояние их респираторного взрыва при распространенном гнойном перитоните (РГП). Обследовано 24  пациента с острыми хирургическими заболеваниями и травмами органов брюшной полости,  осложнившимися РГП, в возрасте 30–65 лет. В качестве контроля обследовано 25  относительно здоровых людей аналогичного возрастного диапазона. Исследование  популяционного состава моноцитов и гранулоцитарных лейкоцитов крови осуществляли по  двухплатформенной технологии на гематологическом анализаторе Sysmex XE-5000 (Sysmex  Inc., США) и проточном цитометре FC-500 (Beckman Coulter, США) с применением набора  антител Cytodiff (Beckman Coulter, США). Исследование количества моноцитов, экспрессирующих HLA-DR- и CD64-рецептор, проводили методом проточной  цитометрии с использованием прямой иммунофлуоресценции цельной периферической  крови. Состояние респираторного взрыва нейтрофильных гранулоцитов исследовали с помощью хемилюминесцентного анализа на 36-канальном хемилюминесцентном  анализаторе БЛМ-3607 (ООО «МедБиоТех», Россия). В качестве индикаторов  хемилюминесценции использовали люминол и люцигенин. Усиление хемилюминесценции,  индуцированной зимозаном, оценивали отношением площади индуцированной  хемилюминесценции к площади спонтанной и определяли как индекс активации.  Установлено, что иммуновоспалительный процесс при РГП характеризуется снижением  количества классических моноцитов в периферической крови и увеличением содержания  неклассических моноцитов. При РГП в периферической крови понижается уровень  моноцитов, экспрессирующих HLA-DR-рецепторы. Изменение соотношения субпопуляций моноцитов характеризует повышение роли провоспалительной фракции в патогенезе РГП.  Изменения в популяционном составе гранулоцитов в крови у больных РГП также характеризуют развитие острого воспалительного процесса. При этом наблюдается  снижение количества базофилов в периферической крови, что, по-видимому, определяется  наличием аллергического компонента при РГП и, соответственно, их миграцией в зону  воспаления. У больных РГП обнаружена активация респираторного взрыва гранулоцитов  крови, интенсивность которого определяется синтезом первичных и вторичных активных  форм кислорода. Результаты корреляционного анализа позволили установить, что при РГП  повышается регуляторная роль неклассических моноцитов, направленная на стимуляцию  воспалительных процессов (повышение количества зрелых и незрелых форм нейтрофилов и стимуляция активности респираторного взрыва гранулоцитов). Выявленные особенности  регуляторного влияния моноцитов на популяционный состав и интенсивность  респираторного взрыва гранулоцитов могут быть использованы при разработке  иммунотерапевтических методов, направленных на снижение активности воспалительного процесса при РГП.

211-218 146
Аннотация

Защитная роль макрофагов тесно связана с продукцией этими клетками бактерицидных молекул, в ряду которых важное место занимает монооксид азота (NO). Аргинин служит  субстратом для продукции NO при участии фермента индуцибельной NO синтазы (iNOS).  Экспрессия и активность iNOS регулируются доступностью субстрата (аргинина) в  межклеточном пространстве. Бактериальный фермент аргининдеиминаза также использует  аргинин в качестве субстрата, вызывая его дефицит для клеток организма хозяина. Целью  настоящего исследования стало подтверждение возможной роли аргининдеиминазы S.  pyogenes в ингибировании синтеза NO макрофагами. Для этого проводили сравнительное  изучение влияния на синтез NO макрофагами продуктов разрушения двух штаммов:  исходного S. pyogenes М49-16 и мутантного S. pyogenes M49-16 delArcA с  инактивированным геном аргинидеиминазы (arcA). Было показано, что способность S.  pyogenes M49-16 ингибировать продукцию макрофагами NO зависит от его  аргининдеиминазной активности так как изогенный мутант S. pyogenes M49-16 delArcA с  инактивированным геном arcA утратил способность ингибировать синтез NO. Это позволяет  рассматривать изученные нами эффекты S. pyogenes как эффекты аргининдеиминазы.  Анализ механизмов ингибирующего действия фермента, показал, что подавление синтеза  NO не было связано с влиянием продуктов разрушения S. pyogenes на жизнеспособность макрофагов. По данным проточной цитометрии, инкубация клеток в  присутствии продуктов разруше- ния S. pyogenes исходного и мутантного штаммов не изменяла уровень экспрессии iNOS, то есть не влияла на синтез или стабильность этого фермента. При этом, снижение  продукции NO под влиянием исходного штамма S. pyogenes М49-16 коррелировало со  снижением содержания в культуральной среде аргинина. А при добавлении в среду  экзогенного аргинина, подавляющее продукцию NO действие исходного штамма нивелировалось. Это подтверждает, что основным механизмом ингибирующего  действия аргининдеиминазы на продукцию NO макрофагами является истощение запасов  аргинина. Недостаток продукции NO при стрептококковой инфекции может приводить к  ослаблению бактерицидности макрофагов и к снижению эффективности противомикробной защиты.

КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ

219-222 136
Аннотация

Клещевые инфекции являются самой распространенной группой зооантропонозных заболеваний в Северном полушарии. Для региона Балтийского моря и Фенноскандии  доминирующими инфекционными патологиями являются иксодовый клещевой боррелиоз и  вирусный клещевой энцефалит. Наличие обширных облесенных территорий, активно  посещаемых людьми в Санкт-Петербурге и Ленинградской области, способствует достаточно высокому уровню покусанности клещами и распространению ВКЭ и ИКБ среди населения  данных регионов. Определенную опасность представляют и относительно малоизученные  патогены, которые могут переноситься с укусом клеща: Anaplasma sp., Ehrlichia sp., Coxiella  burnetii, Rickettsia sp. В данной работе была проведена детекция с помощью молекулярно- генетических методов ВКЭ, боррелий комп лекса B. burgdorferi sensu lato и Rickettsia sp. в  клещах, снятых с людей, а также голодных клещей, собранных с растительности.  Установленные уровни инфицирования ВКЭ у напитавшихся клещей превышают таковые у  голодных клещей, уровни пораженности патогенными боррелиями голодных и напитавшихся клещей оказались примерно равными. Риккетсии в напитавшихся клещах не были  обнаружены. Проведен анализ распространенности патогенов в сравнении с данными отечественных и западных авторов. Мониторинг за распространением клещевых  патогенов в очагах является важным направлением в профилактике инфекций, передаваемых с укусом клеща, на северо-западе России.

223-229 147
Аннотация

Вирус герпеса человека 6 типа (ВГЧ-6) — лимфотропный вирус, являющийся этиологическим агентом инфекционного мононуклеоза (ИМ) у детей. ВГЧ-6-опосредованный  инфекционный мононуклеоз (ВГЧ-6М) не имеет четко выраженных  клинических особенностей. Иммунопатогенетические аспекты данного заболевания на сегодняшний день изучены не полностью. Целью настоящей работы явилось изучение особенностей количественного состава популяций иммунокомпетентных клеток  периферической крови детей с ВГЧ-6М. Материалом для исследования послужили образцы  периферической крови детей с диагнозом «инфекционный мононуклеоз», а также  практически здоровых детей. В зависимости от этиологической причины заболевания дети с  ИМ были разделены на три группы: ВГЧ-6М, ИМ иной этиологии и микстинфекция  (сочетание ВГЧ-6 и вируса Эпштейна–Барр и/или цитомегаловируса). Практически здоровые дети сформировали четвертую группу. В образцах крови методом проточной  цитофлуориметрии определяли абсолютное содержание следующих популяций  иммунокомпетентных клеток: общей популяции Т-лимфоцитов, Т-хелперов, цитотоксических Т-лимфоцитов, дубль-позитивных Т-лимфоцитов (CD4+CD8+), NK-клеток и В-лимфоцитов.  На основе полученных данных о популяционном составе клеток крови проводили дискриминантный анализ — строили модель зависимости принадлежности ребенка к одной  из четырех групп, анализируемых попарно. Применяли метод машинного обучения —  алгоритм градиентного бустинга над решающими деревьями. При этом определяли,  возможна ли классификация пациентов на основе изучаемых показателей и какая  комбинация показателей является оптимальной для классификации. В результате исследования удалось классифицировать следующие пары групп: здоровые дети — дети с  ВГЧ-6М, здоровые дети — дети с ИМ иной этиологии, дети с ВГЧ-6М — дети с ИМ иной  этиологии. При решении задачи классификации детей с микст-инфекцией и детей любой  другой группы не удалось найти модель удовлетворительного качества. По сравнению с  практически здоровыми детьми, дети с ВГЧ-6М отличались повышенным содержанием  общего пула Т-лимфоцитов и цитотоксических Т-клеток, а также пониженным содержанием дубль-позитивных Т-лимфоцитов. В отличие от детей с ИМ иной этиологии,  дети с ВГЧ-6М характеризовались повышенным содержанием цитотоксических Т- лимфоцитов, Т-хелперов, В-лимфоцитов и пониженным количеством дубль-позитивных Т- клеток. Полученные нами результаты свидетельствуют о том, что ВГЧ-6-опосредованный  инфекционный мононуклеоз вызывает у детей изменения в количественном составе некоторых популяций иммунокомпетентных клеток периферической крови, отличное от ИМ иной этиологии.

230-234 312
Аннотация

Признанным ВОЗ стандартом лабораторного подтверждения диагноза «корь» является выявление в сыворотке крови больных методом ИФА IgM-корь антител. Ранее было  показано, что IgM-корь определены в 97,2– 100% сывороток больных с помощью тестов  формата «capture» (Microimmun Ltd. и Вектор-Бест), но при использовании тест-систем  формата «indirect» (Siemens, Германия) доля положительных сывороток не превышала  63,9%. И напротив, при использовании одной из тест-систем для выявления IgM-корь  формата «indirect» (Euroimmun, Германия) были получены ложноположительные  результаты.

Цель работы: сравнительная оценка тест-систем разного формата при  исследовании сывороток крови на IgM-антитела от лиц из разных географичес ких зон. 

Материалы и методы. Клинические образцы (n = 108), получены в 2015–2017 гг. от  здоровых взрослых жителей Гвинейской Республики (ГР); от больных 1–70 лет с  первичными диагнозами «инфекционный мононуклеоз», «цитомегаловирусная инфекция» и  «краснуха» из банка сывороток лаборатории СПбРЦ по надзору за корью и краснухой в  СЗФО. Использовали тест-системы производства ЗАО «Вектор-Бест», Россия («capture»  формат) и производства Euroimmun Medizinische Labordiagnostik AG, Германия («indirect»  формат). Наличие антител к вирусу Эпштейна–Барр определяли в ИФА с тест-системами  производства НПО «Диагностические системы», Россия («ДС-ИФА-Анти-ВЭБ-VCA-M», «ДС- ИФА-Анти-ВЭБ-ЕA-G», «ДС-ИФА-Анти-ВЭБ-NA-G»).

Результаты и обсуждение. При  исследовании сывороток крови от здоровых и больных лиц, проживающих на территории СЗФО и в Гвинейской Республике, в ИФА с тест-системой  «ВектоКорь IgM» антитела IgM-корь не были выявлены. Отсутствие острой инфекции также  подтверждено наличием высокого уровня IgG-антител и высоким процентом авидности IgG-  корь антител. При исследовании этих же сывороток в ИФА с тест-системой Euroimmun, Германия, выявлено 6 положительных сывороток (5,5%), в которых  обнаружены также антитела к вирусу Эпштейна–Барр (ВЭБ). Полученные результаты можно  рассматривать как неспецифическую реакцию, обусловленную возможной  перекрестной реакцией с антителами против ВЭБ, что предусмотрено фирмой-производителем. Выявлено преобладание ложноположительных реакций у лиц, постоянно  проживающих в ГР (8,5±4,0%), по отношению к гражданам РФ (3,2±2,2%). Полученные  данные оцениваются как предварительные. Для получения окончательных результатов  следует увеличить объем выборки исследуемых сывороток.

235-240 150
Аннотация

Представлены результаты собственных исследований наиболее значимых факторов в генезе различных форм стерильности. Пятьдесят супружеских пар обследовались с учетом  возможной этиологической структуры данных форм патологии — герпетических инфекций,  обусловленных вирусами простого герпеса (ВПГ) 1 и 2 типов, цитомегаловирусом (ЦМВ),  вирусом Эпштейна–Барр (ВЭБ), и генетического распределения по антигенам главного  комплекса гистосовместимости второго класса (HLA II класса): HLA-DRB1, HLA-DQA1 и HLA- DQB1. Приведены собственные данные по генетическому типированию супружеских пар по  HLA II класса, которые позволяют соотнести эти данные с клинико-лабораторными  признаками герпесвирусных инфекций. Генетические особенности, определяющие  репродуктивные возможности семейной пары, ассоциируются и с чувствительностью к  определенным инфекционным агентам. Показано, что у доминирующего большинства  семейных пар определялся ген HLA-DRB1, который с большей частотой ассоциировался с  герпесвирусными инфекциями. Несмотря на то, что уровень ПЦР-положительных  результатов в группе семейных пар с первичным бесплодием был выше, чем в семейных  парах со вторичной стерильностью (100 и 92% соответственно), максимальные значения титров специфических антител к герпесвирусам, в том числе и частота обнаружения  маркеров обострения инфекции (IgM-антител) в группе семейных пар со вторичной  стерильностью были выше, чем в группе семейных пар с первичным бесплодием, и  значительно выше, чем в семейных парах с нормальной фертильностью. Следовательно,  именно данный антиген гистосовместимости — HLA-DRB1 — ассоциируется со значительной  частотой стерильности и инфекционной контаминацией герпесвирусами (ВПГ 1, 2 типов,  ЦМВ, ВЭБ) у семейных пар со вторичным бесплодием. Маркер HLA-DRB1, наиболее часто  встречающийся в семейных парах с бесплодием, в том числе и с идиопатическим,  ассоциируется у данного контингента не только со значительной контаминацией  герпесвирусами, но и наличием хронического инфекционного процесса в стадии  реактивации. Проведенные клинико-иммунологические исследования наглядно  демонстрируют необходимость комплексного обследования женщин с функциональными  нарушениями в системе иммуногенеза с обязательной оценкой уровня инфекционной (вирусной) контаминации. Анализ результатов собственных клинико- иммунологических исследований позволяет предложить алгоритм комплексного  обследования при функциональных нарушениях в системе иммуногенеза, включив в него  изучение уровня вирусной нагрузки в качестве необходимого компонента. 



Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2220-7619 (Print)
ISSN 2313-7398 (Online)