Preview

Инфекция и иммунитет

Расширенный поиск
Online First
https://doi.org/10.15789/2220-7619-2019-0

ОБЗОРЫ

145
Аннотация

Обзор посвящен оценке эффективности применения препаратов интерферона и индукторов его биосинтеза для лечения лейкоза кошек, а также – разработке методических подходов для повышения эффективности методов интерферонотерапии. Лейкоз кошачьих - это системное злокачественное заболевание крови вирусной природы, заканчивающееся летальным исходом в сроки примерно до 3 лет после инфицирования. Этиологический агентом, вызывающий это заболевание, является одноцепочечным  РНК-содержащим ретровирусом Feline leukemia virus (FeLV). FelV широко распространен в популяциях домашних кошек всех стран, а также нередко выявляется и в крови диких кошек, в том числе - представителей редких и исчезающих видов семейства кошачьих.  В некоторых регионах распространенность FeLV может быть значительной не только среди домашних кошек, но и среди диких. В настоящее время существует несколько коммерчески доступных вакцинных препаратов для защиты кошек от FeLV-инфекции (например, инактивированные цельновирионные вакцины типа Nobivac feline 2-FeLV с адъювантом, двух-адъвантная субъединичая вакцина на основе белковых антигенов возбудителя и безадъювантная векторная ДНК вакцина. Однако ни одна из существующих вакцин не обеспечивает надежную защиту от этого вируса. Кроме того, вакцинация кошек против FeLV нередко сопряжена с развитием разнообразных осложнений воспалительного, аллергического характера, шоковых реакций и даже таких крайне серьезных побочных эффектов как развитие вакцин-ассоциированной саркомы в месте инъекции, что некоторые авторы связывают с применением адъювантов типа солей алюминия и др.

В данном обзоре дается краткая характеристика вируса FeLV, элементы патогенеза ассоциированных с FeLV-инфекцией патологических состояний, а также - современных технологий профилактики и лечения лейкоза кошек. Дается оценка истории и современного состояния интерферонотерапии FeLV-инфекции и связанных с ней неопластических процессов у домашних кошек и некоторых диких видов семейства кошачьих. Рассматриваются возможные мероприятия, направленные на повышение эффективности интерфероно-терапии лейкоза кошек на основе применения новых препаратов рекомбинантного интерферона различных типов и подтипов, а также – индукторов интерферона. В заключении отмечается, что еще одним интересным и потенциально очень перспективным выбором при определении стратегии биотерапии, связанной с модуляцией системы IFN  в организме животных, пораженных FeLV-инфекцией, является применение индукторов образования эндогенного IFN.

78
Аннотация

Резюме. Псориаз – системное иммуноассоциированное заболевание полифакториальной природы. Предполагается, что одним из факторов, способствующих его развитию, является дисбиоз толстого кишечника. В обзоре приведены сведения о роли дисбиоза толстого кишечника в индукции и прогрессировании псориатического воспаления на примере трёх бактериальных видов-акторов: Akkermansia muciniphila, Faecalibacterium prausnitzii и Escherichia coli. Указанные бактериальные виды, с одной стороны, являются индикаторами состояния бактериального сообщества при дисбиозе толстого кишечника. С другой стороны, они функционально связаны с запуском цепочки событий, заключающейся в индукции дефекта кишечного барьера, переходящего в хроническое воспаление слизистой оболочки кишечника и системное воспаление. Этот сценарий приводит к изменению реактивности клеток врождённого и адаптивного иммунитета на системном уровне, дефекту функции клеток регуляторного звена иммунитета, что на фоне феномена молекулярной мимикрии бактерий – персистенции Streptococcus pyogenes с антигенами, гомологичными кожным, ведёт к расширению популяции аутореактивных к коже Т-клеток, индукции и прогрессированию псориатического воспаления. Псориатический процесс рассматривается с точки зрения коморбидности с воспалительными заболеваниями кишечника. Поскольку дисбиотические изменения при псориазе и воспалительных заболеваниях кишечника, таких как болезнь Крона, имеют схожие моменты, есть вероятность, что при этих заболеваниях реализуется аналогичная патогенетическая цепь, ведущая от дисбиотических изменений микробиоты толстого кишечника к дефекту кишечного барьера, хроническому системному воспалению и дефекту противовоспалительного звена иммунитета. Поэтому данные о патогенетических путях заболеваний, коморбидных с псориазом, способны раскрыть неизвестные элементы патогенетической цепи последнего. Псориаз, как генетически опосредованное заболевание, на данный момент, ассоциировано с однонуклеотидными полиморфизмами более чем четырёхсот генов. Рассмотрено участие однонуклеотидных полиморфизмов кандидатных генов, включённых в патогенетическую цепь псориаза на уровне процессинга и презентации антигена, миграции иммунных клеток, рецепции и производства провоспалительных цитокинов. C болезнью Крона ассоциированы однонуклеотидные полиморфизмы генов, кодирующих белки кишечного барьера и формирующих его функциональную неполноценность. В контексте коморбидности и сходства микробиота-ассоциированной патогенетической цепи псориаза и воспалительных заболеваний кишечника допустимо предположить, что данные полиморфизмы, определяющие генетический дефект кишечного барьера, реализуются дисбиотическими изменениями бактериального сообщества толстого кишечника и способствуют прогрессированию не только воспалительных заболеваний кишечника, но и псориаза.

120
Аннотация

     

Респираторно-синцитиальный вирус (РСВ) инфицирует детей, пожилых людей и больных с иммунодефицитами. В 2016 году РСВ был переименован в Orthopneumovirus в связи с латинизацией таксономии вирусов, а также был включен в семейство Pneumoviridae. Однако в данном обзоре мы будем применять старое, более известное название вируса - РСВ. РСВ-инфекция не индуцирует развитие пожизненного стерилизующего иммунитета. Разные типы клеток иммунной системы, такие как дендритные клетки, макрофаги, Т-клетки, B-клетки и эозинофилы принимают участие в противовирусном ответе при РСВ-инфекции. Некоторые из них играют важную роль в элиминации вируса, тогда как другие могут провоцировать повреждение тканей. Взаимодействие между этими клетками происходит посредством индукции различных цитокинов и хемокинов часть из которых индуцируются на ранних стадиях заболевания, тогда как другие на более поздних. Кроме того, они могут оказывать влияние на течение как первичной, так и повторной РСВ-инфекции. Пролонгированная или персистирующая РСВ-инфекция наблюдается у детей с Т-клеточными иммунодефицитами, что свидетельствует от том, что Т-клетки являются необходимым компонентом для разрешения острой фазы инфекции и для формирования вирус-специфической иммунологической памяти.  РСВ-специфичные антитела присутствуют практически у всех взрослых и детей, однако их наличие не защищает от повторного заражения вирусом.  Некоторые исследования указывают на то, что именно уровень РСВ-специфичных мукозальных, а не сывороточных антител коррелирует с более эффективной защитой от РСВ-инфекции. В отношении РСВ разрабатываются следующие виды вакцин: живые аттенуированные, субъединичные, вакцины на основе инактивированного вируса, вакцины на основе вирусных частиц, вакцины на основе нуклеиновых кислот, а также моноклональные антитела. При разработке вакцин следует принимать во внимание особенности иммунного ответа при РСВ-инфекции, а также учитывать возраст вакцинируемых. Так, для детей, во избежание вакцин-ассоциированного усиления инфекции, оправдано применение живых аттенуированных вакцин, тогда как для лиц среднего возраста и пожилых людей возможно применение субъединичных вакцин. Однако в настоящее время все еще нет лицензированных вакцин в отношении РСВ-инфекции.

В рамках данного обзора мы подробно рассмотрим особенности взаимодействия вируса с разными звеньями иммунной системы, современное представление о вакцинопрофилактике РСВ-инфекции.

                                                                                                                                                         

                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                        

                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                         

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

32
Аннотация

После выхода из костного мозга (КМ) в кровообращение зрелые нейтрофильные гранулоциты в отсутствие воспаления претерпевают ряд фенотипических и физиологических изменений, в комплексе названных «старением», конститутивно получая праймирующие сигналы от комменсальной микробиоты и приобретая бόльшую функциональную готовность в случае активации при травматизации тканей или инвазии патогенов. Физиологическое старение нейтрофилов в крови и последующее их возвращение в КМ генерирует сигналы, модулирующие размер и функции гемопоэтической ниши. Циркадная физиологическая инфильтрация КМ нейтрофилами содействует поддержанию базового уровня внекостномозговых гемопоэтических клеток-предшественников, обладающих функциями регенерации и иммунного наблюдения. Помимо КМ, нейтрофилы активно проникают и в другие здоровые ткани, вероятно, оказывая действие на их базальную физиологию. На примере легочной ткани показано, что нейтрофилы могут «управлять» работой ряда генов, регулирующих клеточный рост, миграцию, пролиферацию, дифференцировку клеток и канцерогенез. Нейтрофильные гранулоциты принимают участие в деструкции эндометриальных тканей во время фазы десквамации, в последующей их репарации и физиологическом ангиогенезе в пролиферативной фазе менструального цикла; участвуют в процессе разрыва стенки преовуляторного фолликула яичников и выхода ооцита; способствуют деградации и рассасыванию желтого тела при ненаступлении беременности; играют важную физиологическую роль в ремоделировании сосудов беременной матки и формировании материнской иммунной толерантности по отношению к полуаллогенному плоду. При инфекции и/или повреждении слизистой оболочки кишечника активно мигрирующие на поверхность кишечного эпителия нейтрофилы стимулируют реституцию эпителия и восстановление его барьерной функции. Рекрутированные в ротовую полость нейтрофилы регулируют количественный и качественный состав микробных сообществ оральных биоплёнок, отвечают за обеспечение здоровья пародонтальных структур. Являясь основным участником и регулятором заживления кожных ран на ранней стадии, стадии воспаления, нейтрофилы не только уничтожают возможных патогенов, но также участвуют в очищении раны от клеточного дебриса, генерируют цитокины, ферменты, ростовые факторы, влияющие на дальнейшие этапы процесса репарации. И апоптоз, и нетоз, являясь механизмами гибели нейтрофилов, вносят огромный вклад в процесс заживления ран. Однако дисрегуляция и нарушение баланса как апоптоза, так и нетоза могут приводить к негативным последствиям с формированием хронических длительно незаживающих ран.

78
Аннотация

После выхода из костного мозга (КМ) в кровообращение зрелые нейтрофильные гранулоциты в отсутствие воспаления претерпевают ряд фенотипических и физиологических изменений, в комплексе названных «старением», в процессе которого они конститутивно получают праймирующие сигналы от комменсальной микробиоты и приобретают бόльшую функциональную готовность в случае активации при травматизации тканей или инвазии патогенов. Физиологическое старение нейтрофилов в крови и последующее их возвращение в КМ генерирует сигналы, модулирующие размер и функции гемопоэтической ниши у мышей и, возможно, у человека. Циркадная физиологическая инфильтрация КМ нейтрофилами содействует поддержанию базового уровня внекостномозговых гемопоэтических клеток-предшественников, обладающих функциями регенерации и иммунного наблюдения. Помимо КМ, нейтрофилы активно проникают и в другие здоровые ткани в количестве и с динамикой, специфичной для каждой ткани, вероятно, оказывая действие на их базальную физиологию. На примере легочной ткани мышей показано, что нейтрофилы могут «управлять» работой ряда генов, регулирующих клеточный рост, миграцию, пролиферацию, дифференцировку клеток, а также канцерогенез. Внутрисосудистые нейтрофилы легких являются «стратегическим запасом», который может при необходимости высвобождаться в кровообращение, либо реагировать на повреждения, легочную или генерализованную инфекции. Нейтрофильные гранулоциты принимают участие в деструкции эндометриальных тканей во время фазы десквамации, в последующей их репарации и физиологическом ангиогенезе в пролиферативной фазе менструального цикла; участвуют в процессе разрыва стенки преовуляторного фолликула яичников и выхода ооцита; способствуют деградации и рассасыванию желтого тела в случае ненаступления беременности; играют важную физиологическую роль в ремоделировании сосудов беременной матки и формировании материнской иммунной толерантности по отношению к полуаллогенному плоду. При инфекции и/или повреждении слизистой оболочки кишечника активно мигрирующие на поверхность кишечного эпителия нейтрофилы усиливают пролиферацию эпителиоцитов; ставят на них «гипоксическую подпись», запуская транскрипцию когорты генов, кодирующих синтез муцинов, муцин-модифицирующих пептидов, антимикробных белков, β-дефензинов, что в конечном итоге стимулирует реституцию эпителия и восстановление его барьерной функции. Рекрутированные в ротовую полость нейтрофилы регулируют количественный и качественный состав микробных сообществ оральных биоплёнок человека, отвечают за обеспечение здоровья пародонтальных структур. На примере патогенеза пародонтита при дефиците адгезии лейкоцитов (LAD-1) показано, что развитие заболеваний пародонта при ряде врождённых нарушений количества и функций нейтрофильных гранулоцитов может быть связано не только с дефектом их защитно-эффекторной активности, но и с нарушением иммунорегуляторной функции тканевых нейтрофилов. Являясь основным участником и регулятором заживления кожных ран на ранней стадии, стадии воспаления, нейтрофилы не только уничтожают возможных патогенов, но также участвуют в очищении раны от клеточного дебриса и эритроцитов, генерируют цитокины, ферменты и ростовые факторы, влияющие на дальнейшие этапы процесса репарации. У пациентов с нейтропенией или с дефектами миграции и функционирования нейтрофилов, например, при хронической гранулематозной болезни, увеличивается риск инфицирования и ухудшается процесс регенерации. И апоптоз, и нетоз, являясь механизмами гибели нейтрофилов, вносят огромный вклад в процесс заживления ран. Однако дисрегуляция и нарушение баланса как апоптоза, так и нетоза могут приводить к негативным последствиям с формированием хронических длительно незаживающих ран.

59
Аннотация
Актуальность проблемы геогельминтозов, как в мире, так и в Российской Федерации, обусловлена их широким распространением и вызываемыми ими серьезными патологическими изменениями в организме человека.  В последнее время наблюдается заметное снижение информированности практических врачей об этой категории болезней, хотя уровень заболеваемости в стране не снижается, а завоз паразитарных болезней, включая различные гельминтозы, в том числе стронгилоидоз, неуклонно нарастает. Слабая настороженность к этим болезням препятствует своевременной диагностике и лечению. В Российской Федерации стронгилоидоз относится к редким нозологическим формам (уровень заболеваемости не превышает 1,0 на 100 тысяч населения) и его регистрируют в общей строке «другие гельминтозы». Наряду с регионами с тропическим и субтропическим климатом ареалы распространения этого гельминта существуют в районах с умеренным климатом: в западных областях Украины, Белоруссии, Молдове, на Кавказе и в Средней Азии, а также в Восточной Европе и Средиземноморском регионе. В РФ случаи местного заражения чаще регистрируются в Краснодарском крае и Ростовской области. Авторы, имеющие многолетний опыт ведения больных стронгилоидозом, представили анализ собственных наблюдений и краткий обзор современной научной и методической литературы по проблемам клиники, диагностики и лечения гельминтоза. Рассмотрены особенности биологии возбудителя – Strongyloides stercoralis: наличие в жизненном цикле свободноживущих в природе и паразитирующих в организме человека взрослых гельминтов, возможность аутоинвазии, из-за которой болезнь длится годами и не завершается выздоровлением. Обращено внимание на существенные изменения в клинике гельминтоза на современном этапе, в том числе в сторону тяжелых форм, (гиперинвазивный и генерализованный стронгилоидоз), что обусловлено распространением состояния иммунодефицита у людей (ВИЧ/СПИД, широкое применение ГКС и по другим причинам). Трудности клинической диагностики, частые ошибки в первичном диагноз объясняются как полиморфизмом клиники данного гельминтоза, так недостаточной информированностью практических врачей о стронгилоидозе. В диагностике отмечено ведущее значение паразитологических методов, направленных на обнаружение личинок (но не яиц) гельминта. Указано, что средством выбора для лечения является известный антигельминтный препарат Ивермектин, который в РФ не зарегистрирован. В практике для этих целей используется Албендазол, который недостаточно эффективен, поэтому, как правило, возникает необходимость проведения повторных циклов лечения.
54
Аннотация

Возбудитель чумы, Yersinia pestis, особо опасный бактериальный патоген и потенциальный агент биотерроризма. Преобладающими клиническими формами инфекции являются бубонная и легочная чума, отличающиеся по пути инфицирования. При отсутствии лечения смертность при бубонной форме чумы составляет 40-60 %, в то время как легочная чума без лечения всегда летальна. Развитие инфекционного процесса в организме восприимчивого хозяина обеспечивается наличием у чумного микроба комплекса факторов патогенности различной функциональной направленности, экспрессирующихся в зависимости от стадии инфекционного процесса. Нокаутные мутации генов, кодирующих эти факторы, могут не влиять на вирулентность микроба или приводить к его аттенуации. Поиск новых факторов патогенности Y. pestis и разработка на их основе высокоэффективных субъединичных и живых чумных вакцин, индуцирующих развитие выраженных клеточных и гуморальных иммунных реакций, и/или оценка потенциального использования этих факторов в качестве молекулярных мишеней для химиотерапии чумы остаются по-прежнему актуальными, так как обе лицензированные на настоящий день чумные вакцины не соответствуют требованиям ВОЗ, а на Мадагаскаре выделены штаммы чумного микроба, устойчивые ко всем лекарственным препаратам, рекомендованным для антибактериальной терапии чумы. В настоящей статье обобщены сведения относительно вклада известных и вновь открытых факторов патогенности в вирулентность штаммов Y. pestis и протективную активность в отношении чумы. Описано также влияние утраты генов регуляторных белков и мутаций в генах различных транспортных систем Y. pestis на аттенуацию вирулентных штаммов. Проведена оценка перспективности включения охарактеризованных антигенов в состав прототипов субъединичных вакцин и тех или иных полученных мутантов в состав прототипов живых аттенуированных вакцин. Суммированы предварительные результаты попыток лечения чумы с помощью ингибиторов факторов патогенности. Использование антибиотиков постулируется комитетом экспертов Всемирной организации здравоохранения по чуме как "золотой стандарт" лечения чумы. Однако появление устойчивых к антибиотикам штаммов Y. pestis привело к необходимости поиска альтернативных способов терапии чумы. Несколько исследовательских групп работают над поиском альтернатив, таких как лечение ингибиторами факторов патогенности. В обзоре обобщены предварительные результаты попыток лечения чумы ингибиторами фактора патогенности. Препараты, нацеленные на ключевые факторы патогенности, предоставляют новые перспективные возможности в борьбе с устойчивыми к антибиотикам бактериями.

36
Аннотация
Энтеровирусы представляют собой разнообразную группу безоболочечных одноцепочечных положительных РНК-вирусов, принадлежащих к роду энтеровирусов семейства Picornaviridae. Они являются наиболее распространенными вирусами в мире и отличаются высокой устойчивостью к факторам внешней среды. Энтеровирусы вызывают сезонные инфекции, а также являются возбудителями энцефалита, миокардита, полиомиелита, острой сердечной недостаточности и сепсиса. Генетическая пластичность энтеровирусов способствует возникновению эпидемий и спорадических вспышек (например, вспышки инфекции энтеровируса D68 или энтеровируса 71). Вирусы Коксаки типа B, принадлежащие к виду энтеровирус B, вызывают преимущественно легкие заболевания верхних дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта, но инфекция вируса Коксаки B3 также ассоциирована с развитием миокардита, который, в свою очередь, может привести к сердечной недостаточности. Патогенез миокардита, индуцированного вирусом Коксаки B3, хорошо изучен, он опосредован как прямым повреждением под действием протеаз вируса, так и косвенным повреждением вследствие иммунного ответа организма. Несмотря на успех в области вакцинопрофилактики ряда энтеровирусных инфекций, благодаря которому некоторые из них были взяты под контроль, сохраняется потребность в противовирусных препаратах, активных в отношении энтеровирусов. На сегодняшний день отсутствуют зарегистрированные противовирусные препараты прямого действия для терапии большинства энтеровирусных инфекций, в частности, инфекции вируса Коксаки B3. Также не проводятся клинические испытания в области лечения или профилактики инфекции вируса Коксаки B3. Доступные стратегии лечения направлены на стабилизацию состояния пациента и снятию дискомфорта. Вероятно, относительно небольшой рынок препаратов против энтеровирусных инфекций является непривлекательным для фармацевтических компаний. Жизненный цикл вируса Коксаки B3 был тщательно изучен, и известны потенциальные привлекательные мишени для разработки противовирусных препаратов. Целью настоящей работы является обзор текущего состояния области разработки противовирусных препаратов против инфекции вируса Коксаки B3, особое внимание уделено разработке противовирусных препаратов прямого действия. Также упомянуты ингибиторы, нацеленные на клеточные факторы развития инфекции (включая соединения экстрактов лекарственных растений). Подробно рассмотрены следующие категории прямых ингибиторов вируса Коксаки B3: капсид-связывающие агенты (плеконарил и его производные), ингибиторы протеазы 3C (рупинтривир и его аналоги), ингибиторы репликации (как аналоги нуклеозидов, так и ненуклеозидные ингибиторы). Кроме того, в обзор включены результаты исследований перепрофилирования зарегистрированных лекарственных препаратов (амилорида, бензеразида, дибукаина и флуоксетина).
37
Аннотация

Аннотация

Несмотря на длительную историю изучения генетических факторов подверженности туберкулезной инфекции – и на уровне ассоциативных, и на уровне экспрессионных исследований, остается острой проблема выявления и мониторинга групп риска. Поиск дифференциально экспрессирующихся генов в группах, различающихся по статусу заболевания (не инфицированные, латентная туберкулезная инфекция, начальная до-симптоматическая стадия, активный туберкулез, выздоровевшие после туберкулеза, не-туберкулезная инфекция) привел к получению большого количества данных не перекрывающихся при изучении разных групп сравнения, в различных этнических группах, при изучении цельной крови и клеточных моделей. Объединение массивов данных и последующий их ре-анализ помогает верифицировать и дополнять результаты; однако, остается большое количество вопросов, касающихся понимания функционирования организма человека в условиях воздействия M. tuberculosis. В обзоре рассматриваются накопленные к настоящему времени результаты экспрессионных исследований, направленных на изучение подверженности туберкулезу.

Annotation

Despite a long history of research of genetic factors of susceptibility to tuberculosis infection, including associative and expression studies, an identification and monitoring of risk groups remains a challenge. The search of differentially expressed genes in groups with different status of the disease (non-infected, latent tuberculosis infection, pre-symptomatic state, active tuberculosis, recovery from tuberculosis, non-tuberculosis infection) led to identification of a large number of data which is not overlapped in different compared groups, different ethnic groups, in the studies of the whole blood and cellular models. Merging this wealth of data followed by its re-analysis helps verify and update results. However, there still is a large number of questions concerning our understanding of the functioning of the human organism under influence by M. tuberculosis. The review considers up to date results of expression studies of susceptibility to tuberculosis.

163
Аннотация

Применение вакцины от лихорадки Денге (CYD-TDV) в Азии в настоящее время остается достаточно ограниченным и противоречивым из-за вопросов безопасности, пока остающихся не оцененных должным образом. Поэтому, целью нашего обзора было проведение оценки безопасности вакцины CYD-TDV на основее анализа данных по эффективности ее применения в Азии. Поиск релевантных ключевых слов в электронных базах данных обнаружил 309 научных статей, среди которых в обзор вошли лишь четыре публикации. Исходная распространённость серотипов среди участников исследований составляла 50-80%. В отношении безопасности вакцины CYD-TDV показано, что реакция в месте введения (боль, отек, эритема) отмечены с относительным риском (RR) 95% ДИ (0.46-1.76), а системные реакции (лихорадка, головная боль, миалгия) также при RR 95% ДИ (0.89-1.81). Из четырех работ, включенных в обзор, три содержат данные о ряде тяжелых неблагополучных эффектах при RR 95% ДИ (0.92-2.11). В отношении иммуноленности показана что для DENV-2 отмечено высокое среднее геометрическое значение титра в 67.8 (95%ДИ 64.8-70.8), DENV-3 – в 73.1 (95% ДИ 69.9-76.3), а для DENV- 4 – в 65 (95% ДИ 62-67.9), когда при обнаружении даже меньших величин оэто согласуется в другими опубликованными работами по иммуногенности вакцины CYD-TDV в отношении серотипов DENV. В нашем обзоре показано, что вакцина CYD-TDV может рассматриваться для применения в Азии, но с учетом ряда условий и следования настоящим рекомендациям по безопасности.

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

38
Аннотация

Введение. Липополисахариды грамотрицательных бактерий (ЛПС) более известны как бактериальные  эндотоксины. Однако в специальной литературе всё больше данных целом ряде физиологических эффектов ЛПС, наблюдаемых и в норме. В частности показана иммуномодулирующая активность ЛПС некоторых видов бактерий.

Цель исследования - характеристика физиологических эффектов липополисахаридов Ensifer meliloti при индуцированном иммунодефиците у крыс в эксперименте.

Материалы и методы. На 60 беспородных крысах-самцах, у которых индуцировали ммунодефицитное состояние при внутрибрюшинном введении цитостатика – циклофосфамида, исследована биологическая активность фракций ЛПС E. meliloti. Исследуемые фракции ЛПС E. meliloti вводили внутрибрюшинно через 24 часа после инъекции ЦФ в течении 21 дня. На 22-е сутки эксперимента лабораторные животные подвергались эвтаназии и аутопсии с последующим морфометрическим исследованием внутренних органов. В дальнейшем парафиновые срезы паренхиматозных органов окрашивались гематоксилин-эозином и исследовались гистологически посредством световой микроскопии

Результаты. Установлено, что при введении циклофосфамида лабораторным животным по окончании периода наблюдения имело место незначительное снижение массы печени и почек, вес сердца и селезенки оставался неизменным (в сравнении с интактными животными). Однако указанные изменения были статистически не значимы. Статистически достоверно у иммунодефицитных крыс в сравнении с контролем увеличивался лишь вес легких. При внутрибрюшинном введении фракций ЛПС на фоне вторичного иммунодефицита изменяются весовые характеристики наиболее интенсивно кровоснабжаемых органов (печень и почки), что указывает на системный характер их эффектов. Для активации иммунного ответа в селезенке отмечено характерное увеличение количества фолликулов с крупными герминативными центрами, а также вторичных фолликулов стромы органа с образованием лимфоидных муфт. В печени - лимфоидная инфильтрация в портальных трактах и восстановление до нормы сосудистого рисунка. В легких при введении ЛПС и Ликопида - выраженная гиперплазия лимфоидной ткани с крупными герминативными центрами

Заключение. Полученные данные свидетельствуют, что исследованные фракции ЛПС E. meliloti при вторичном иммунодефиците у крыс, вызывают положительные изменения иммунореактивности.

48
Аннотация

Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) является одним из этиологических агентов инфекционного мононуклеоза. Тяжелая форма течения заболевания может приводить к развитию серьезных осложнений, риск возникновения которых зависит, в том числе, от состояния иммунной системы пациента. На сегодняшний день отсутствуют специфические тесты, позволяющие определять риск развития тяжелой формы болезни. Целью работы стало выявление молекулярно-генетических маркеров тяжелой формы течения ВЭБ-инфекционного мононуклеоза (ВЭБ-ИМ) в иммунокомпетентных клетках периферической крови. В лейкоцитах периферической крови пациентов с ВЭБ-ИМ тяжелой и средней степени тяжести, а также практически здоровых доноров определяли экспрессию 483 генов и транскриптов генов, регулирующих апоптоз, пролиферацию и дифференцировку иммунокомпетентных клеток. Использовали ДНК-биочипы оригинального дизайна. Обработку результатов осуществляли с применением разработанной нами программы “MiDA”. Для выявления маркеров тяжелой формы течения патологии проводили сравнение экспрессии каждого гена и транскрипта у пациентов с ВЭБ-ИМ и практически здоровых доноров. Для каждого гена и транскрипта определяли уровень изменения экспрессии и значимость для бинарной классификации. В качестве маркеров тяжелой формы ВЭБ-ИМ отбирали гены и транскрипты, характеризовавшиеся максимальными значениями двух определяемых параметров при сравнении пациентов с тяжелой формой инфекции и здоровых доноров, а также пациентов с тяжелой и средней степенью тяжести ВЭБ-ИМ. Гены и транскрипты, экспрессия которых различалась у пациентов с ВЭБ-ИМ средней степени тяжести и здоровых доноров, из перечня маркеров исключались. Также были исключены маркеры, дифференциально экспрессирующиеся в зависимости от пола и возраста обследуемых.  В перечень маркеров тяжелой формы течения ВЭБ-ИМ вошли регуляторы апоптоза (гены BCL2L11, BIRC3 и транскрипт XIAP.NM_001167), а также факторы сплайсинга (ген CELF6 и транскрипт SF1.NM_201995). По сравнению с донорами и пациентами со средней степенью тяжести заболевания, в крови пациентов с тяжелой формой течения ВЭБ-ИМ выявлено снижение экспрессии генов BCL2L11, BIRC3, транскриптов SF1.NM_201995 и XIAP.NM_001167, а также усиление экспрессии гена CELF6. Функциональная роль установленных молекулярных маркеров позволяет предположить, что тяжелая форма ВЭБ-ИМ характеризуется подавлением митохондриального и активацией TRAF-зависимого путей апоптоза в иммунокомпетентных клетках пациентов. Характер экспрессии выделенных маркеров является специфическим для тяжелой формы течения ВЭБ-ИМ, не зависит от пола и возраста пациентов. Результаты работы могут быть использованы при разработке специфических средств оценки риска развития осложнений ВЭБ-мононуклеоза.

37
Аннотация

MLVA типирование микроба чумы используют как для поиска сходств и различий между отдельными изолятами при проведении эпидемиологических расследований, так и для клональной кластеризации внутривидовых филогенетических групп для решения вопросов микроэволюции и таксономии. Нельзя исключить, что наиболее вариабельные локусы могут являться индикаторами, позволяющими аппроксимировать уникальные свойства штаммов, циркулирующих в определенных природных очагах чумы. Удобной моделью для проверки этой гипотезы может быть Центрально-Кавказский высокогорный природный очаг чумы, отличающийся гетерогенностью циркулирующих в нем штаммов, в том числе по про- и ауксотрофии по пролину. Целью нашей работы было определение сочетающихся с пролинзависимостью частот аллелей VNTR локусов штаммов возбудителя чумы, определяемых при MLVA-25 типировании в Центрально-Кавказском высокогорном природном очаге чумы. Основной задачей являлось выявление наиболее информативных наборов аллелей VNTR локусов, пригодных для прогнозирования про- и ауксотрофии (pro+, pro-) по пролину. Было обнаружено, что локусы ms45, ms56, ms46, ms07, ms69, ms62 являются высоковариабельными по частотам аллелей и/или имеют достоверное различие средних частот аллелей VNTR локусов про- и ауксотрофных штаммов микроба чумы. Анализ частот аллелей локуса ms45, показал, что в случае выявления аллелей, содержащих 6 повторов, с вероятностью 0,944 ожидается pro+ штамм, при 7 повторах локуса ms45, с вероятностью 0,783 pro- штамм, при 9 повторах локуса ms56 с вероятностью 0,933 штамм pro+, свыше 18 тандемных повторов локуса ms46 вероятность pro+ фенотипа равна 0,818. Проведенная диагностика на pro+/pro- свойство штаммов с использованием статистических методов показала ошибку 13,33 % для pro- штамма и 26,67 %. для pro+ штамма. Все штаммы pro+, которые имели комплекс из 6 тандемных повторов ms45, 9 повторов ms56 и 29-30 повторов ms46 безошибочно диагностировались с использованием только этих 3 локусов. Таким образом, возможно прогнозировать некоторые свойства штаммов микроба чумы, исходя из значений частот аллелей локусов. С увеличением числа MLVA типированных штаммов микроба чумы, выделенных в этом очаге, можно ожидать увеличения возможностей для прогнозирования их свойств по значениям тандемных повторов в локусах, имеющих диагностическую ценность.

32
Аннотация

Цель исследования - оценка напряженности иммунитета к вирусу кори работников медицинских организаций разного профиля, лиц молодого возраста и новорожденных. Материалы и методы: Определен иммунный статус к вирусу кори у основных сотрудников СПб ГБУЗ “Родильный дом №10” (386 человек), лиц гражданского персонала медицинских сотрудников до 50 лет клиник Военно-медицинской академии им С.М. Кирова (ВМедА) (1399 человека), курсантов ВМеДА (304 человека) и 34 новорожденных детей методом ИФА (ВектоКорь-IgG). Результаты: Выявлен высокий общий уровень защищенности против вируса кори сотрудников медицинских организаций: иммунитет к вирусу кори серологически подтвердился у 87,5±3,3% сотрудников роддома и 81,6±2,1% сотрудников клиник ВМеДА. Различий в иммунном статусе среди различных категорий медицинского персонала и медицинского персонала отделений различного профиля не выявлено. Более низкий популяционный иммунитет наблюдался в возрастной группе 20-40 лет. Среди сотрудников родильного дома удельный вес серопозитивных к вирусу кори среди персонала 20-40 лет составил 75,9% (95% ДИ 67,2%-82,9%), 40-59 лет –91,5% (95% ДИ 86,7%-94,7%), лица 60 лет и старше были все серопозитивны (95% ДИ 94,6%-100%). Двукратная вакцинация не являлась гарантией наличия эффективного противокоревого иммунитета. Большинство серонегативных лиц имели в анамнезе двукратную вакцинацию, поэтому, даже при наличии двукратной вакцинации против кори в анамнезе необходимо проведение серологического обследования перед приемом на работу в медицинскую организацию. Более 90% сотрудников составляют женщины. Исходя из этого, женщины фертильного возраста, документально привитые двукратно, но иммунологически серонегативные, подвергаются риску заболевания корью и внутриутробного инфицирования плода, а также увеличивается риск заболевания детей до достижения прививочного возраста. Это подтверждается тем, что только 70,6±15,3% новорожденных детей имели иммунитет к вирусу кори. Удельный вес серонегативных новорожденных (29,4±15,3%) сравним с долей серонегативного персонала родильного дома в возрасте 20-40 лет (24,1±8,1%). Среди более молодой возрастной группы (лица в возрасте от 18 до 23 лет) – курсантов военно-медицинской академии, выявлена значительно более существенная доля серонегативных лиц - 48,3±5,6%, что делает высокой вероятность возникновения эпидемической вспышки при заносе кори в данные организованные коллективы. Выводы: В условиях элиминации кори, необходима разработка программы скрининга на наличие антител к вирусу кори среди лиц молодого и среднего возраста.

68
Аннотация

Кишечный микробиом участвует во многих физиологических процессах хозяина, способствует формированию и поддержанию иммунного гомеостаза за счет регулировки иммунных реакций, направленых на защиту от колонизации патогенов. Особую роль, в дифференцировке различных субпопуляций Т-лимфоцитов, играют сегментарные нитевидные бактерии (Segmented filamentous bacteria, SFB), способные индуцировать в кишечно-ассоциированной лимфоидной ткани (КАЛТ) дифференцировку провоспалительных Th17-клеток, а представители рода Clostridium (cluster IV и XIVa) и Bacteroides fragilis (полисахарид A (PSA)), стимулируют образование Т-регуляторных клеток (Treg) и продукцию супрессорного цитокина ИЛ-10. Важными метаболитами B. fragilis являются короткоцепочечные жирные кислоты (КЦЖК), которые способны активировать клетки КАЛТ через рецептор FFAR2. Уменьшение концентрации КЦЖК снижает численность Treg в кишечнике и нарушает баланс Th17/Treg. Эти изменения напрямую ведут к снижению уровня мРНК FFAR2, Foxp3 и повышению экспрессии RORγt в КАЛТ. Поэтому, целью работы было определить уровень ключевых иммунорегуляторных бактерий в пристеночной микрофлоре кишечника крыс и его влияние на транскрипционную активность генов Foxp3 и RORyt в КАЛТ при сальмонелла-индуцированном воспалении и на фоне введения ванкомицина и B. fragilis. Для определения родовой и видовой принадлежности бактерий, а также их количества в микрофлоре крыс, применяли метод полимеразной цепной реакции (ПЦР-РВ) с идентификацией их по генам 16S rDNA. Для изучения транскрипционной активности генов использовали метод полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в режиме реального времени (ОТ-ПЛР). В ходе эксперимента при введении животным ванкомицина и сальмонелл наблюдалось увеличение уровня SFB и уменьшение A.muciniphila, F.prausnitzii. Также, при инфицировании крыс S.enteritidis и S.typhimurium на фоне предобработки ванкомицином, отмечалось возрастание численности SFB на фоне выраженного уменьшения Bacteroides-Prevotela group, A.muciniphila, Clostridium spp. кластеров XIV, IV и F.prausnitzii, что приводило к уменьшению уровня экспрессии мРНК генов Foxp3+ и увеличению Rorγt+соответственно. Однако, введение B.fragilis животным, получавшим S.enteritidis или S.typhimurium на фоне предобработки ванкомицином, обуславливало уменьшение уровня SFB и мРНК Rorγt+, и, наоборот, увеличивало численность Bacteroides-Prevotela group, A.muciniphila, Clostridium spp. кластеров XIV, IV, F.prausnitzii и экспрессию генов Foxp3+, что свидетельствует о восстановлении гомеостаза кишечного микробиома. Полученные результаты показали, что B.fragilis может с успехом применяться при лечении воспалительных заболеваний кишечника или заболеваний с нарушением барьерной функции кишечника.

31
Аннотация

Ключевую роль в инициации иммунных реакций играют дендритные клетки – наиболее активные и высокоспециализированные антигенпрезентирующие клетки. В настоящее время актуальна разработка препаратов, активирующих дендритные клетки для создания противоинфекционных и противоопухолевых вакцин. Перспективными для усиления активности дендритных клеток являются препараты микробного происхождения, поскольку они несут лиганды для Toll-подобных рецепторов системы врожденного иммунитета. К таким препаратам относятся экспериментальные белоксодержащие пневмококковые препараты, которые  получали из инактивированной ацетоном микробной массы депонированного вакцинного штамма Spneumoniae 6В №296 с последующей водной экстракцией и выделением фракции 30-100 kDa. Дендритные клетки получали из клеток костного мозга мышей линии СВА (n=15).  Клетки культивировали в полной ростовой среде RPMI-1640 в присутствии рекомбинантных GM-CSF и IL-4 (Biosource, USA). На шестые сутки в культуру незрелых дендритных клеток вносили экспериментальные белоксодержащие пневмококковые препараты (50 мкл/мл). В качестве классического индуктора созревания использовали коммерческий TNF-α (20 нг/мл, Biosource, USA). Иммунофенотип дендритных клеток определяли методом проточной цитометрии с использованием FITC- и PE- меченых моноклональных антител к клеточным рецепторам: CD34, CD38, CD83, CD86, CD80, CD11c, MHCII, СD14, CD282 (TLR2), CD-284 (TLR4),  (eBioscience,USA). При изучении влияния экспериментальных белоксодержащих пневмококковых препаратов на созревание дендритных клеток установлено, что морфологические характеристики дендритных клеток при использовании в качестве индуктора созревания экспериментальных белоксодержащих препаратов не имеют существенных отличий между собой и с классическим индуктором созревания TNF-a. Клетки характеризовались крупными размерами, имели овальную или неправильную форму с вуалевидной цитоплазмой, эксцентрично расположенным ядром и многочисленными длинными, тонкими отростками. Данные препараты в культуре дендритных клеток вызывали снижение численности CD34+ незрелых клеток и TLR2/TLR4+ DC, повышали количество клеток с маркером адгезии CD38+, активационными MHCII+, костимулирующими CD80/CD86+ молекулами и маркером терминальной дифференцировки CD83+, что может свидетельствовать о процессах дифференцировки дендритных клеток при их созревании. Фракция 30-100 kDa в большей степени увеличивала численность клеток с молекулами адгезии по сравнению с водным экстрактом, который значительнее стимулировал нарастание количества дендритных клеток с экспрессией костимулирующих молекул по сравнению с фракцией 30-100 kDa (p<0,05). Активность исследуемых препаратов в отношении влияния на CD83+ клетки была сопоставимой. Показано, что экспериментальные белоксодержащие антигены вакцинного штамма пневмококка индуцируют созревание дендритных клеток из костномозговых предшественников, индуцируют снижение численности TLR2 и TLR4 -экспрессирующих клеток, что свидетельствует об активирующем влиянии на эффекторы врожденного иммунитета.

25
Аннотация

Аннотация. Бактериальные пневмонии занимают второе место после туберкулеза органов дыхания у пациентов с ВИЧ-инфекцией. В последние годы половой путь передачи ВИЧ сменил инъекционный при потреблении наркотических средств. Представляется актуальным совершенствование оказания помощи больным ВИЧ-инфекцией и бактериальными пневмониями в зависимости от факта потребления психоактивных веществ.

Цель исследования - оценка клинических и иммунологических проявлений бактериальных пневмоний на фоне ВИЧ-инфекции в зависимости от установленного факта потребления инъекционных наркотиков (ПИН) пациентом

Материалы и методы. Ретроспективно проанализированы клинические, иммунологические дынные 224 пациентов с ВИЧ-инфекцией и пневмониями: 1-ю группу составили 70 больных ВИЧ-инфекцией, ПИН, с установленной этиологией бактериальной пневмонии; 2-ю группу – 16 ПИН с ВИЧ-инфекцией и пневмониями с неустановленной этиологией; 3-ю группу – 65 больных с ВИЧ и бактериальными пневмониями установленной этиологии без ПИН, 4-ю группу – 73 больных с ВИЧ-инфекцией и бактериальными пневмониями не установленной этиологии без ПИН.

Полученные данные обработаны с помощью программного средства Statistica 13.3. Использовались методы описательной статистики с вычислением непараметрического критерия — ранговый дисперсионный анализ Краскела–Уоллиса (H-критерий) и рассчитывался χ2.

Результаты. Иммунологические проявления ВИЧ-инфекции и бактериальных пневмоний характеризуются снижением СД4+ - клеток и повышением СД3+ и СД8+ - клеток в большей степени выраженным у лиц, не являющихся потребителями инъекционных наркотиков, к них же зарегистрированы наиболее высокие величины вирусной нагрузки при развитии пневмонии. Бактериальные пневмонии на фоне ВИЧ-инфекции не отличаются по клиническим проявлениям у лиц не потреблявших и потребляющих инъекционные наркотики, в 10% случаев они протекают на фоне нормотермии.

Для пациентов употребляющих наркотические средства часто клиника пневмонии была схожа с симптомами сепсиса в виде боли во всем теле, мышцах, ломота в костях, что не характерно для ВИЧ-инфицированных, заразившихся половым путем. Также, в этой группе пациентов чаще выслушивался систолический шум на верхушке сердца при аускультации.

Заключение. Следует привлекать к обследованию на ВИЧ лиц с риском половой передачи инфекции, считающих себя здоровыми. В приемных отделениях не отказывать в госпитализации и проводить рентгенологическое исследование всем лицам с симптомами со стороны нижних дыхательных путей.

30
Аннотация

Helicobacter pylori - самый массовый патоген человека, достигающей в развитых странах 20–40%, а в развивающихся странах – 80–90% инфицирования взрослого населения.  Многие авторы считают данную инфекцию как основной фактор развития рака желудка. При H. pylori инфекции свободнородикальное окисление усиливается, что повышает в крови содержание продуктов ПОЛ.  Гиперпродукция активных форм кислорода стимулирует свободнорадикальное ПОЛ, сопровождающееся деструкцией мембран, повреждением белков, липидов, ДНК. Таким образом, происходит разрушение внутриклеточных и наружных мембран, что приводит к гибели клеток. При заболеваниях, ассоциированных с H. рylori-инфекцией, выявляется дисрегуляция системы перекисного окисления липидов – антиоксидантной защиты, которая способствует рассогласованности фаз регенерации, что вызывает прогрессирование заболеваний. Целью нашей работы стало: изучение показателей ПОЛ (диеновых коньюгатов, малонового диальдегида) и антиоксидантной защиты (АОЗ) (ферментов супероксиддисмутазы, каталазы) при хроническом гастрите, хроническом атрофическом гастрите, ассоциированными с H. рylori – инфекцией.

У больных ХГ с H. pylori, ХАГ и ХАГ с H. pylori установлено увеличение содержания первичных (↑ДК) и конечных ТБК-активных продуктов перекисного окисления липидов (↑MDA). У больных ХГ с H. pylori, ХАГ и ХАГ с H. pylori происходило снижение активности супероксиддисмутазы, а у больных ХАГ и ХАГ с H. pylori дополнительно наблюдалось снижение активности каталазы  (↓ CAT).  H. pylori лишь запускает механизмы генерации АФК клетками хозяина. Энергия окислительно-восстановительных реакций используется микроорганизмом для осуществления своих физиологических функций и составляет фактор патогенности самого микроорганизма, образующиеся в этих реакциях АФК могут оказывать повреждающее воздействие на структуры СОЖ. Кроме этого изучение генетического кода H. pylori показала, что этот микроорганизм является носителем генов, кодирующих ферменты окислительного метаболизма, таких как СОД, каталаза, нитроредуктаза, флаводоксиноксидоредуктаза. При длительной персистенции H. pylori в СОЖ и нарастании его биомассы, он становится основным источником АФК, которые способны усиливать перекисное окисление липидов и вызывать повреждение мембранных структур и ДНК клеток эпителия желудка.

 

Helicobacter pylori is the most widespread human pathogen, reaching 20–40% in developed countries and 80–90% of adult infection in developing countries. Many authors consider this infection as a major factor in the development of gastric cancer. In case of H. pylori infection, free homogeneous oxidation increases, this increases the blood content of POL products. Hyperproduction of reactive oxygen species stimulates free radical POL, accompanied by membrane destruction, damage to proteins, lipids, and DNA. Thus, the destruction of the intracellular and outer membranes, which leads to cell death. In diseases associated with H. pylori infection, there is disregulation of the lipid peroxidation system - antioxidant protection, which contributes to the misalignment of the regeneration phases, which causes the progression of diseases. The aim of our work was to study indicators of POL (diene conjugates, malonic dialdehyde) and antioxidant protection (AOP) (superoxide dismutase enzymes, catalase) in chronic gastritis, chronic atrophic gastritis associated with H. pylori infection.

In patients with CG with H. pylori, CAG and CAG with H. pylori, an increase in the content of primary (↑ DC) and end TBA-active products of lipid peroxidation (↑ MDA) was found. In patients with CG with H. pylori, CAG and CAG with H. pylori, there was a decrease in superoxide dismutase activity, and in patients with CAG and CAG with H. pylori, there was an additional decrease in catalase activity (↓ CAT). H. pylori only triggers the mechanisms of ROS generation by the host cells. The energy of redox reactions is used by the microorganism to carry out its physiological functions and is a factor in the pathogenicity of the microorganism itself, the ROS formed in these reactions can have a damaging effect on the structure of the coolant. In addition, the study of the genetic code of H. pylori has shown that this microorganism is the carrier of genes encoding oxidative metabolism enzymes, such as SOD, catalase, nitroreductase, flavodoksinoksidoreduktaza. With long-term persistence of H. pylori in the coolant and an increase in its biomass, it becomes the main source of ROS, which can enhance lipid peroxidation and cause damage to the membrane structures and DNA of gastric epithelium cells.

34
Аннотация

Группа стрептококка включает в себя многочисленные виды шаровидных грамположительных факультативно-анаэребных бактерий, в основе классификации которых лежит их способность к гемолизу эритроцитов.

Стрептококки группы viridans являются зеленящими стрептококками и естественными представителями нормальной микрофлоры в полости рта. Однако, при развитии иммунодефицитных состояниях, онкологиях, нейтропениях этот возбудитель может являться причиной заболеваний, таких как бактериемия, сепсис, эндокардиты, а в некоторых случаях и пневмоний.

Заболевания органов дыхания являются частой причиной обращения за медицинской помощью у ВИЧ-инфицированного контингента.

Роль комменсала S.viridans в развитие бактериальных заболеваний у ВИЧ-инфицированных пациентов остается до конца не изученной. Не понятна связь S.viridans с другими бактериальными сообществами, включая патогенные микроорганизмы. Также, было бы очень интересным оценить чувствительность к антибактериальным препаратам S.viridans в регионе с высокой заболеваемостью ВИЧ-инфекцией.

Цель исследования оценить чувствительность к антибактериальным препаратам стрептококков группы viridans в мокроте у ВИЧ-инфицированных пациентов с клиникой пневмонии.

Материалы и методы. В период с 01.01.2012 по 01.01.2019 гг. на базе БУЗОО «Инфекционной клинической больницы № 1 имени Далматова Д.М.» были проанализированы результаты микробиологического исследования мокроты всех ВИЧ-инфицированных пациентов с подозрением на пневмонию (n=684), из которых у 193 пациентов выявлялся S.viridans (28,2%).

Бактериологическое исследование материала проводилось для выделения чистой культуры возбудителей классическими методами. Затем проводилась оценка S.viridans на чувствительность к антибактериальным средствам (n=78), согласно клиническим рекомендациям от2018 г. Первоначально резистентность к антибиотикам определялась диско-диффузным методом, который является рутинным, но наиболее распространенным в клинической лаборатории. Затем проводилась оценка минимальной подавляющей концентрации с помощью прибора AutoScan 4 Microscan (анализатор бактериологический полуавтоматический Beckman Coulter, США) для идентификации и определения антибактериальной чувствительности.

Результаты исследования. При проведении диско-диффузного метода в изучаемых образцах было выявлено наличие резистентности к пенициллину у 28,2%, к ампициллину – у 42,3% и еще больше к цефазолину – в 43,6% изолятах. При оценке минимальной подавляющей концентрации антибактериального средства были получены аналогичные данные. Хорошая чувствительность выявлена на цефотаксим, цефтриаксон, цефепим, фторхинолоны и ванкомицин.

28
Аннотация
Увеличение доли пожилых в структуре современного общества, наряду с другими причинами и факторами риска, сопровождается ростом заболеваемости глаукомой. Cогласно международным исследованиям в мире к 2020г. прогнозируется увеличение больных глаукомой до 80 миллионов. Среди лиц пожилого возраста глаукома является распространенной патологией, развитие которой ассоциируется с местными нарушениями интерлейкиного профиля. Однако особенности последнего у больных с первичной закрытоугольной глаукомой в пожилом возрасте практически не изучены. Исследования локального интерлейкинового статуса проведены в основном у пациентов с подозрением или начальными проявлениями первичной открытоугольной глаукомы. Особенности сдвигов интерлейкинов в слезной жидкости в целенаправленной группе пожилых больных, страдающих первичной закрытоугольной глаукомой II стадии, практически не анализировались. Кроме того, спектр местных интерлейкинов у пациентов с обсуждаемой патологией в ранее выполненных исследованиях являлся ограниченным. Не проводилась также определение информативности интерлейкинов слезной жидкости у пожилых пациентов с глаукомой с учетом объективных методов. Цель настоящей работы – выявление особенностей и информативности показателей локального интерлейкинового профиля у пожилых больных с первичной закрытоугольной глаукомой. Обследованы 58 больных с первичной закрытоугольной глаукомой II стадии в возрасте 60- 74 года (основная группа) и 27 пожилых человек аналогичного возраста без данной патологии. Уровень интерлейкинов в слезной жидкости определялся иммуноферментным анализатором «Multiscan» посредством метода сэндвич-варианта твердофазного иммуноферментного анализа. Содержание интерлейкинов в слезной жидкости определяли иммуноферментным анализатором «Multiscan»(Финляндия) посредством метода сэндвич-варианта твердофазного иммуноферментного анализа с применением тест систем «R&D Diagnostic Inc» (США). Информативность интерлейкинов рассчитывалась по общепринятой формуле. Установлено, что основными особенностями местного интерлейкинового cпектра пожилых пациентов с первичной закрытоугольной глаукомой являются повышение, IL-2, IL-17, IL-8 и снижение IL-10. Перечисленные интерлейкины локального уровня обладают наибольшей информативностью.  Полученные результаты необходимо использовать при диагностике и лечении обсуждаемой патологии. Особенностями местного интерлейкинового профиля больных первичной закрытоугольной глаукомой пожилого возраста являются повышенный уровень в слезной жидкости противовоспалительных IL-2, IL-17, IL-8 и снижение продукции противовоспалительных IL-10  . Указанные локальные интерлейкины обладают наибольшей информативностью, что имеет научно-практическое значение для выделения новых механизмов развития, диагностики и обоснования селективной иммунотропной терапии рассматриваемой патологии.
24
Аннотация

Ротавирусная инфекция имеет убиквитарное распространение и является глобальной проблемой мирового здравоохранения. Вакцинация пятивалентной оральной живой вакциной по данным ряда исследований является эффективной мерой для профилактики тяжелых форм ротавирусного гастроэнтерита у детей до 3-х летнего возраста. Ранее неоднократно проводились рандомизированные плацебо-контролируемые исследования, посвященные данной тематике. Однако, в связи с особенностями эпидемиологии ротавирусной инфекции у детей в России был проведен метаанализ в группе риска – среди детей в возрасте до 3х лет при применении полного курса вакцинации единственной вакцины, зарегистрированной на территории Российской Федерации. Поиск производился двумя независимыми рецензорами за период с 1994 по февраль 2019 гг., без ограничений по языку, и осуществлялся в пяти базах данных медицинских и биологических публикаций: РИНЦ, PubMed, Web of Science, MEDLINE, Scopus, а так же в оглавлениях тематических журналов и библиографических списках. В мета-анализ включались многоцентровые рандомизированные контролируемые исследования, в которых сравнивалась эффективность плацебо и законченного курса вакцинации пентавалентной живой пероральной вакциной против ротавирусной инфекции у детей до 3-х лет.  Первичной конечной точкой исследования была частота возникновения тяжелого острого гастроэнтерита у детей по системе оценки Vesikari. Обработка данных и построение лесных графиков  для оценки обобщенных результатов производилось в свободно распространяемой на сайте Кокрановского сообщества программе RevMan 5.3. Реализация метода «Trim and fill» осуществлялась при помощи Stata 14.2.  В мета-анализ были включены 7 оригинальных публикаций, представлявших собой многоцентровые рандомизированные плацебо-контролируемые исследования с двойным ослеплением. Количество участников опытной группы составило 19 384 человека, контрольной – 19 425. Трехкратная вакцинация значительно снижала шанс заболеть тяжелым ротавирусным гастроэнтеритом в опытной группе, по сравнению с контрольной, отношение шанса составило 0,34 [95% ДИ 0,19-0,60]. В ходе кластерного анализа также был подтвержден протективный эффект от полного курса вакцинации. Групповая оценка эффективности вакцинации против РВИ в странах Африки и Юго-восточной Азии имела статистически значимые результаты, показатель отношения шансов составил 0,60 [95%, ДИ 0,52-0,70]. При оценке эффективности вакцинации против РВИ в Финляндии показатель отношения шансов установлен на уровне статистической значимости и составляет 0,07 [95%, ДИ 0,04-0,11]. Полный курс вакцинации пятивалентной живой оральной вакциной против ротавирусной инфекции снижает шанс заболеть тяжелым ротавирусным гастроэнтеритом у детей раннего возраста.

20
Аннотация

Резюме. Цель исследования – характеристика токсигенных штаммов Corynebacterium diphtheriaе, выделенных на территории России в 2017 - 2019 гг. В исследование включено 12 токсигенных штаммов C.diphtheriae, выделенных в период с января 2017 г. по июнь 2019 г. Изучение штаммов С.diphtheriae проводили по культурально-морфологическим, токсигенным и биохимическим свойствам. Генотипирование штаммов C.diphtheriae осуществляли с помощью MЛСТ и секвенирования гена dtxR с последующим проведением биоинформационного анализа. Результаты. Токсигенные штаммы С.diphtheriae были выделены в Новосибирской, Самарской и Челябинской областях, Ханты-Мансийском автономном округе - Югре и Республике Северная Осетия - Алания. Среди изученных штаммов, 5 штаммов были выделены от больных дифтерией (из которых только в одном случае была средне-тяжелая форма клинического течения и в остальных – легкая форма) и 7 штаммов – от бактерионосителей. У больных дифтерией в двух случаях идентифицированы штаммы C.diphtheriae биовара gravis, принадлежащие к сиквенс-типу ST25, в одном случае – штамм биовара gravis ST8 и в двух случаях – штаммы биовара mitis ST67. У бактерионосителей токсигенных C.diphtheriae в двух случаях идентифицированы штаммы биовара gravis сиквенс-типа ST25 и в 4 случаях – штаммы биовара mitis ST67. В одном случае идентифицировать сиквенс-тип не удалось. Все выявленные сиквенс-типы являются широко распространенными в мире и представлены большим количеством изолятов в базе данных PubMLST, а также характеризуются значительным количеством производных сиквенс-типов. При этом они входят в различные клональные комплексы и значительно отличаются друг от друга, что способствует их надежному различению в МЛСТ. Изучение особенностей структуры гена dtxR показало, что все выявленные аллельные варианты гена являются типичными для представителей этих сиквенс-типов, новых аллельных варианты гена dtxR у изученных штаммов не было обнаружено. Показано, что несинонимичная замена C440T с заменой аминокислоты А147V встречается в пределах только одного аллеля, характерного для представителей сиквенс-типов ST8, ST185, ST195 и ST451, что говорит о поздно произошедшей мутации. Полиморфизм C640A с заменой аминокислоты L214I присутствует не только в данном аллеле, но и в более базальных ветвях дерева, что свидетельствует об изолейцине как о предковом состоянии белка.

27
Аннотация

Целью данной работы является анализ результатов комплексных эпидемиологических и зоолого-энтомологических исследований для определения эколого-эпидемиологических особенностей очагов клещевого вирусного энцефалита (КВЭ) и клещевого боррелиоза (КБ), а также роли антропогенных факторов в их эпидемическом проявлении для совершенствования противоэпидемических мероприятий.

Проанализированы многолетние данные о показателях обилия клещей, собранных на флаг, в разных районах Республики Коми (РК). С помощью иммуноферментного анализа и полимеразной цепной реакции определена инфицированность вирусом клещевого энцефалита и Borrelia burgdorferi клещей, собранных с растительности, людей и домашних животных в разных районах РК. Проанализированы данные о количестве жителей РК, пострадавших от нападения клещей с 1994 по 2017 годы, о заболеваемости КВЭ с 1970 по 2017 годы и КБ с 1997 по 2017 годы, о влиянии трансформации лесов на заболеваемость КВЭ.

Отмечен существенный рост численности клещей в 2006 - 2017 годах в южных районах РК и экспансия этих кровососущих на Север. Также показано, что территория РК, на которой регистрировались случаи нападения клещей на жителей, значительно расширилась. Средние показатели покусанности клещами выросли в 2006 - 2017 годах по сравнению с 1994 - 2005 годами более чем в четыре раза. В районах, где вырубка лесов наиболее выражена, увеличилось количество жителей, пострадавших от присасывания клещей, и был зарегистрирован выраженный подъём заболеваемости КВЭ.

В последние годы выявлено увеличение инфицированности клещей вирусом клещевого энцефалита, как собранных с растительности, так и с пострадавших людей и животных.

Среднегодовые показатели заболеваемости КВЭ в 2006 - 2017 годах по сравнению с 1970 - 1981 годами и 1982 - 1993 годами увеличились в 11 и 36 раз соответственно.

В последние годы стали регистрироваться наиболее тяжёлые очаговые формы болезни. В период с 1996 по 2017 годы летальность при КВЭ составила 2,3%.

Основные черты эпидемиологии КБ сходны с таковыми при КВЭ. Так, доля инфицированности клещей, собранных с травы, Borrelia burgdorferi увеличилась с 9,5% в 2010 году до 34,7% в 2017 году. Отмечен резкий подъём заболеваемости и значительное расширение территорий на Север, где эта инфекция стала регистрироваться лишь в последние годы. КБ и КВЭ имеют выраженный профессиональный характер.

Аргументирована необходимость проведения адресной профилактики клещевых инфекций с учётом местных особенностей. Северные территории РК, на которых в последние годы были зарегистрированы случаи нападения клещей на жителей, следует рассматривать в качестве потенциально эндемичных.

19
Аннотация

Ликвидация заболеваемостью натуральной оспой была достигнута за счет массовой вакцинации населения, которая затем была прекращена в связи с опасностью развития серьезных осложнений. Возрождение исследовательского интереса к осповакцине обусловлено появившейся угрозой применения вируса натуральной оспы в качестве оружия биотерроризма и  возросшей частотой заражения ортопоксвирусными инфекциями на фоне неуклонного снижения популяционного иммунитета. Вирус осповакцины так же используется в качестве вектора для создания рекомбинантных вакцин. Понимание механизмов формирования  иммунного ответа и возможность его прогнозирования позволит избежать возможных осложнений и излишней иммунизации. Целью данной работы являлось выявление связи между уровнем гуморального иммунитета, клиническими показателями вакцинального периода и поло-возрастными характеристиками у лиц,  ревакцинированных вирусом осповакцины. Были исследованы клинические данные вакцинального периода 135 человек, вакцинированных повторно от 2 до 10 раз. Вакцинальный период легкой степени тяжести наблюдался у 95% обследованных, средней тяжести – у 5%. У 127 человек последовательно сформировались вакцинальные элементы (94,1%), у 22,2% были зафиксированы местные и общие осложнения. Для средней степени реакции характерны большие размеры гиперемии (p=0,04), корочки (p=0,01) и длительность отпадения корочки (p=0,001). Возраст обследованных лиц со средней степенью тяжести вакцинального периода статистически значимо меньше, чем с легкой степенью (p=0,03), при средней степени тяжести вакцинального периода выше вероятность развития лимфаденита (p<0,001). У 54 обследованных лиц был определен титр защитных антител (АТ) в реакции нейтрализации на культуре клеток Vero по методу бляшек. Наблюдалась тенденция к формированию более высокого уровня АТ у женщин, по сравнению с мужчинами. Выявлена прямая отрицательная корреляция между титром АТ и размером гиперемии. Подмышечный лимфаденит чаще сопровождает высокий уровень АТ. Корреляция между наличием и размерами вакцинальных элементов, временем отпадения корочки и титрами АТ не установлена. Возраст и число предшествующих вакцинаций не оказывают значимого влияния на уровень гуморального иммунитета. Вариативность клинической картины и иммунного ответа при применении одной вакцины и единой схемы вакцинации может быть объяснена генетическими различиями индивидов, и требует дальнейшего изучения.

25
Аннотация

Резюме

Вирус папилломы человека (ВПЧ) относится к группе чрезвычайно распространенных вирусных инфекций, передающихся преимущественно половым путем. Вирус папилломы человека вызывает рак шейки матки, который является четвертой по распространенности формой рака у женщин. В 2012 году было зафиксировано 266 тыс. смертей и 528 тыс. новых случаев. На сегодняшний день в мире созданы три профилактические вакцины против ВПЧ – двухвалентная “Церварикс”, четырехвалентная “Гардасил” и девятивалентная “Гардасил-9”. В процессе научного исследования этих вакцин выяснилось, что они способны индуцировать выработку антител к типам ВПЧ, антигенные белки которых не содержатся в составе вакцинного препарата. Причины такого перекрёстное взаимодействие антител с антигенами, принадлежащими к разным патогенным типам ВПЧ, не определены.

Данная работа посвящена попытке с помощью биоинформационных методов найти вероятное объяснение перекрестного взаимодействия между антителами одних типов вирусов и антигенами других. Это даст возможность в будущем оптимизировать процесс создания кандидатных вакцин и получать более эффективные поливалентные иммунобиологические препараты против ВПЧ.

В исследование нами использованы аминокислотные последовательности белка L1 оболочки вирусов ВПЧ 4-х наиболее онкогенных типов (16, 18, 31, 45). Последовательности были извлечены из международной базы данных NCBI (National Center for Biotechnology Information) и выровнены в программе “Clustal Omega” и в редакторе “BioEdit”. Поиск и анализ потенциальных антигенных детерминант мы проводили с помощью программ: “BepiPred-2.0: Sequential B-Cell Epitope Predictor”, “DiscoTope 2.0 Server”, “SYFPEITHI”.

Результаты биоинформационного исследования выявили значительный потенциал перекрёстного взаимодействия антител с антигенами, принадлежащими к патогенным типам ВПЧ 16, 18, 31, 45 за счет сходства антигенных детерминант. Были обнаружены общие линейные детерминанты для Т-клеток и В-клеток у всех 4-х типов вирусных белков L1. Также обнаружены сходные трехмерные антигенные детерминанты для В-клеток у ВПЧ16 L1 и ВПЧ18 L1.

Антигенные детерминанты ВПЧ16 L1 и ВПЧ31 L1 более близки друг другу. Сходство наблюдается между ВПЧ18 L1 и ВПЧ45 L1. Поэтому при иммунизации ВПЧ16 L1 стоит ожидать более выраженного перекрёстного взаимодействия антител с антигенами ВПЧ31 L1 и умеренного с ВПЧ18 L1 и ВПЧ45 L1. Напротив, при иммунизации ВПЧ18 L1 возможно активное перекрёстное взаимодействие антител с антигенами ВПЧ45 L1 и менее выраженное с ВПЧ16 L1 и ВПЧ31 L1.

 

35
Аннотация

Изучение генетического разнообразия вируса гепатита С (HCV) имеет большое практическое значение при проведении молекулярно-эпидемиологических исследований, разработке средств специфической профилактики и для определения тактики терапии. Цель исследования: провести анализ генетического разнообразия HCV, циркулирующего среди населения Нанайского района Хабаровского края. Материалы и методы. Проведен серологический и молекулярно-генетический анализ 124 образцов сыворотки/плазмы крови от пациентов с диагнозом хронический гепатит C (ХГС), проживающих на территории Нанайского района Хабаровского края. Результаты. РНК HCV была обнаружена в 84 (67,7±4,2%) образцах плазмы крови. Генотипирование HCV, проведенное с использованием набора «АмплиСенс -1/2/3» (ФБУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва) показало, что на территории района наиболее распространен 3 генотип вируса – 47,6±5,4% (n=40). Генотип 1 HCV обнаружен у 30 пациентов (35,7±5,2%). В 13 случаях (15,5±3,9%) выявлен 2 генотип и у 1 пациента (1,2±1,2%) генотип не определился. Филогенетический анализ нуклеотидных последовательностей области NS5b генома HCV, проведенный для 60 РНК HCV-положительных образцов, показал следующее соотношение субтипов: 1а – 2 (3,3±2,3%), 1в -  23 (38,3±6,3%), 2а – 6 (10±3,9%), 2с – 2 (3,3±2,3%), 3а – 27(45±6,4%). В ходе исследования было выявлено 3 пробы, принадлежащие к рекомбинантной форме вируса RF2k/1b. С целью подтверждения рекомбинации были получены полные нуклеотидные последовательности гена NS2. Результаты исследования свидетельствуют о необходимости проведения дополнительного, комплексного обследования больных хроническими формами гепатита С с применением современных молекулярно-биологических методов для принятия решений об адекватной терапии, учитывая особенности выделенных изолятов. Данные о молекулярно-генетических характеристиках HCV, циркулирующих на отдельных территориях Дальнего Востока, весьма ограничены и проведенное молекулярно-генетическое исследование внесет дополнение в существующие представления о циркуляции геновариантов HCV на территориях Российской Федерации.

14
Аннотация

Проведен анализ состояния интерфероновой системы 38 детей в остром периоде инфекционного мононуклеоза (ИМ), вызванного вирусом Эпштейна-Барр. Исследование интерферонового статуса выполнено по методике Ф.И.Ершова, которая предполагает оценку количества интерферона, находящегося в сыворотке крови или продуцируемого клетками крови, по его биологической активности. Целью работы было получение лабораторного обоснования дляприменения интерферонов илиинтерфероногенов в комплексной терапии ИМ. Для этого было проведено сравнение интерферонового статуса  у детей в остром периоде ИМ не только с показателями контрольной группы здоровых (30 детей 3-6 лет и 20 детей 7-14 лет, которые были обследованы ранее для создания внутрилабораторной нормы), но и с группой детей, больных ангиной или ОРВИ, госпитализированных в то же отделение клиники и сопоставимых с основной группой по тяжести состояния. Другой задачей была оценка изменения показателей IFN-статуса у больных ИМ, не получавших в ходе лечения интерфероновых препаратов, через 1 месяц от начала заболевания.

Проведенное исследование показало, что в остром периоде инфекционного мононуклеоза у больных в состоянии средней тяжести снижение способности лейкоцитов крови к вирус-индуцированной продукции IFNα и митоген-индуцированной продукции IFNγ встречается примерно с той же частотой, что и в контрольной группе детей, госпитализированных с ангиной или ОРВИ, или несколько реже.

У больных ИМ было обнаружено, что в возрастной группе 3-6 лет способность клеток крови к продукции интерферонов на этой стадии заболевания практически не нарушена, а у пациентов 7-14 лет страдает почти исключительно альфа-интерфероногенез. В группе 7-14 лет 1 степень недостаточности продукции IFNα  отмечалась в 38% случаев, а 2 степень – у 6%. Вероятно, именно эта группа больных нуждается в каких-либо вариантах заместительной терапии IFNα. Повторным обследованием после выписки из клиники было охвачено только 12 детей. Исходно частота недостаточности интерфероногенеза и степень недостаточности в этой подгруппе не отличалась от всей выборки пациентов, а через 1 месяц, отмечалось некоторое увеличение потенциальных возможностей организма к продукции как IFNα так и IFNγ даже без терапии препаратами, влияющими на интерфероновую систему.

41
Аннотация

Поиск прогностических маркеров коинфекции ВИЧ и туберкулез (ВИЧ/ТБ), особенно, при множественной лекарственной устойчивости Mycobacterium tuberculosis (МЛУ МБТ),  ассоциированной с низкими показателями излечения ТБ, является актуальным в связи с проблемой выбора адекватных противотуберкулезных мероприятий, способных снизить уровень летальности. Обследованы 113 больных ВИЧ/ТБ в возрасте от 24 до 58 лет –  70 мужчин и 43 женщины, находившиеся на стационарном лечении в Новокузнецком клиническом противотуберкулезном диспансере в период 2017-2019 гг.  МЛУ МБТ   (резистентность одновременно к изониазиду и рифампицину) обнаружена у  50 пациентов (у 12 больных с МЛУ МБТ имелась дополнительная резистентность к фторхинолонам) в возрасте от 24 до 54 лет – 31 мужчина и 19 женщин. В группу контроля включено 49 практически здоровых лиц в возрасте от 27 до 72 лет (26 женщин и 23 мужчины), не имеющих признаков очаговой и системной инфекции с умеренно выраженными возрастными изменениями. В образцах плазмы крови определены концентрации общих (неспецифических) иммуноглобулинов классов Е, М, G, А (в том числе,  секреторного иммуноглобулина А, sIgA) методом твердофазного иммуноферментного анализа.  Для статистической обработки результатов использованы пакеты лицензионных программ InStatII, Microsoft Excel, IBM SPSS Statistics 22. Выявлен большой интервал индивидуальной вариабельности количества CD4-лимфоцитов как среди умерших, так и среди живущих обследованных  пациентов с ВИЧ/ТБ, что является недостатком использования этого показателя для предикции летальности. Установлено, что содержание общих IgЕ, IgМ, IgG, IgА и sIgA  в плазме крови больных ВИЧ/ТБ выше в сравнении с контролем, а у умерших больных концентрация IgЕ и sIgА больше, чем  у живущих.  Установлен коэффициент предикции (КП) исхода заболевания для пациентов с ВИЧ/ТБ и МЛУ МБТ, равный отношению произведения концентраций IgE, IgМ, IgA и секреторного IgA в плазме крови к количеству CD4-лимфоцитов (КП= IgE× IgМ×IgA×sIgA / CD4).  КП более 200 был выявлен у 77% умерших и 6% живущих пациентов. Относительный риск летального исхода при КП >200  оказался очень высоким (OR=56,7 р<0,0001) и был в 8,5 раз выше, чем при CD4 < 200 (OR=6,7 р=0,0237). Выявленная положительная корреляционная связь КП с летальным исходом более значима,  чем у показателя CD4. Представленные  результаты позволяют предложить КП в качестве эффективного прогностического критерия при ВИЧ/ТБ с МЛУ МБТ для клинического использования.    

24
Аннотация

Аргининдеиминаза является одним из трех ферментов, образующих систему аргининдеиминазы у бактерий. Ранее, было  установлено, что аргининдеиминаза, обладает антипролиферативным  действием в отношении ряда первичных и иммортализованных клеток мыши и человека. Предполагается, что ингибирующее действие фермента может быть связано с его способностью приводить к истощению аргинина в микроокружении клеток. Биодоступность аргинина играет важную роль для пролиферации Т-лимфоцитов, экспрессии белков Т-клеточного рецептора и дифференцировки клеток памяти. Целью настоящего исследования стало изучение влияния аргининдеиминазы пиогенного стрептококка на функциональную активность лимфоцитов периферической крови человека. Для достижения поставленной цели было проведено сравнительное исследование влияния супернатанта разрушенных стрептококковых клеток (СРС) исходного штамма S. pyogenes M49-16 и его изогенного мутанта S. pyogenes M49-16delArcA с инактивированным геном аргининдеиминазы (ArcA) на функции иммунных клеток. Влияние супернатантов на жизнеспособность клеток оценивали методом проточной цитометрии, с использованием ДНК–связывающего красителя DAPI. Пролиферацию клеток оценивали с помощью МТТ-теста и цитофлюориметрически с использованием метода, основанного на окрашивании внутриклеточного белка витальным флуоресцентным красителем CFSE (карбоксифлуоресцеинсукцинимидилэфирным красителем). Кроме того, в работе оценивали уровень экспрессии на лимфоцитах тирозинфосфатазы CD45 в различных условиях культивирования. Было показано, что СРС S. pyogenes M49-16 не оказывал влияния на жизнеспособность клеток. СРС исходного штамма практически не влиял на пролиферацию интактных клеток, но значительно подавлял пролиферацию клеток, индуцированную ConA. В то же время СРС мутантного штамма достоверно повышал спонтанную пролиферацию клеток и не оказывал влияния на пролиферацию, индуцированную митогеном. Было показано, что увеличение пролиферации сопровождалось увеличением уровня экспрессии CD45, однако эти изменения не во всех случаях были достоверны. Полученные данные позволяют заключить, что бактериальная аргининдеиминаза может являться одним из факторов патогенности, способных ограничивать пролиферацию лимфоцитов и развитие иммунного ответа с целью улучшения роста и диссеминации бактерий.

40
Аннотация

Резюме

Вирус осповакцины сыграл ключевую роль в глобальной ликвидации натуральной оспы. Однако при массовой иммунизации вакцинами на основе разных штаммов вируса осповакцины выявлялись случаи тяжелых побочных реакций, иногда завершающиеся летальным исходом, особенно у людей с ослабленной иммунной системой. Поэтому после объявления в 1980 году о ликвидации оспы Всемирная организация здравоохранения рекомендовала прекратить противооспенную вакцинацию. За прошедшие 40 лет человеческая популяция практически утратила иммунитет не только против натуральной оспы, но и против зоонозных ортопоксвирусных инфекций, таких как оспа обезьян, оспа коров, оспа буйволов, оспа верблюдов. Поэтому в последние годы на разных континентах стали возникать вспышки ортопоксвирусных инфекций человека, которые имеют опасность перерасти в будущем в распространенные эпидемии. В связи с этим возникла необходимость получения безопасных аттенуированных штаммов вируса осповакцины, направленно инактивируя гены вирулентности этого вируса, и изучения на лабораторных моделях проявления их свойств патогенности и иммуногенности в зависимости от способа введения вирусов в организм животных. Аттенуация вируса осповакцины в настоящее время часто достигается при создании живых рекомбинантных поливалентных вакцин в результате встройки целевых последовательностей ДНК в гены вирулентности векторного вируса, что приводит к их инактивации. Объектами исследования в данной работе явились штамм LIVP вируса осповакцины, используемый в Российской Федерации для противооспенной вакцинации, и полученный на его основе методами генетической инженерии аттенуированный вариант LIVP-GFP, у которого нарушен вирусный ген тимидинкиназы. Данные вирусы вводили мышам-сосункам линии BALB\c интрацеребрально в дозах 101 или 102 БОЕ/животное для оценки нейровирулентности сравниваемых штаммов вируса осповакцины. Взрослых мышей заражали этими вирусами интраназально, подкожно или внутрикожно в дозах 107 или 108 БОЕ/животное и контролировали в течение 14 сут наличие клинических проявлений вирусной инфекции. Через 28 сут от начала эксперимента получали индивидуальные сыворотки крови мышей и методом ИФА определяли в них уровень вирусспецифичных антител. Показано, что рекомбинантный штамм LIVP-GFP обладает значительно сниженной нейровирулентностью и патогенностью для мышей по сравнению с исходным штаммом LIVP. Наиболее безопасным и эффективным способом иммунизации для обоих изученных штаммов вируса осповакцины оказалось внутрикожное введение.

 

Resume

Vaccinia virus had been played a key role in the global smallpox eradication. But in the course of mass vaccination using several vaccinia virus strains were revealed hard side effects with lethal outcomes in some cases, especially in humans with immunodeficiency. Therefore after declaration in 1980 about smallpox eradication World Health Organization recommended to stop smallpox vaccination. After last 40 years the most part of Earth human population does not have immunity not only against smallpox, but also against any other zoonotic orthopoxvirus infections, such as monkeypox, cowpox, buffalopox, and camelpox. All of these represent increasing danger for human health and heighten risk of emergence of highly contagious virus caused by natural evolution of existed zoonotic orthopoxviruses. In order to prevent development of small outbreaks into spreading epidemics and, thus, to decrease a risk of emergence due to natural evolution of highly pathogenic for humans orthopoxviruses, researchers’ efforts should be applied to development of safe live vaccines of new generation based on vaccinia virus with target virulence genes inactivation. These strains should be studied in laboratory animal models using different routes of virus inoculation. Vfccinia virus attenuation now usually is achieved in the course of live recombinant vaccines creation as specific DNA sequences insertion into virus virulence genes and their inactivation. The subjects of this research were vaccinia virus strain LIVP, used in the Russian Federation as smallpox vaccine, and attenuated variant LIVP-GFP created on its basis by genetic engineering methods with inactivation of thymidine kinase gene. These viruses were intracerebrally inoculated into suckling mice in doses 101 or 102 PFU/animal for neurovirulence assessment. Adult mice were infected intranasally, subcutaneously or intradermally in doses 107 or 108 PFU/animal and clinical manifestations were analyzed during 14 days. On 28 day of the experiment samples of blood sera were collected from mice individually and ELISA technique was used for analyses of virus specific antibodies levels. It was shown that recombinant vaccinia virus strain LIVP-GFP caused very low neurovirulence and pathogenicity for mice in comparison with parental LIVP. The most safe and effective route of immunization by studied vaccinia virus strains is intradermal inoculation.

36
Аннотация

Монголия и Россия входят в группу стран с высоким бременем туберкулеза (ТБ). На территориях Восточной Сибири, граничащих с Монголией, распространенность ТБ, в том числе с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ), значимо превышает аналогичные показатели в европейской части России. В отличие от Монголии для территорий Восточной Сибири характерна высокая распространенность ВИЧ-инфекции. Широкое сотрудничество и культурный обмен между странами не исключает возможности трансграничной передачи M. tuberculosis. Если ВИЧ-инфекция не имеет эпидемиологического значения для Монголии в настоящий момент, то ТБ по обе стороны границы имеет схожую распространенность. Цель: оценка трансграничного распространения M. tuberculosis c множественной лекарственной устойчивостью в Монголии  и регионах Восточной Сибири по молекулярно-генетическим данным. Материалы и методы:  Методом MIRU-VNTR по 24 локусам проведено исследование 1045 штаммов M. tuberculosis, выделенных на территории Монголии (291) и трех регионов Восточной Сибири (754). Субтип CC2/W148 идентифицировали по наличию специфической делеции в kdpD гене, субтип СС1 – по SNP в гене pks17 в позиции 1887060. Филогенетический анализ полученных MIRU-VNTR паттернов проведен путем построения древ UPGMA и максимального правдоподобия. Результаты исследования. Генотип Beijing  присутствовал в 75,3% (219/291) коллекции из Монголии и 69,0% (520/754) – из Восточносибирских регионов России. Общими минорными являются генотипы LAM (11,0% и 15,1%), T (10,3%  и 4,5% ) Haarlem (1,4% и 2,4% ) соответственно в Монголии и Восточной Сибири. Только в российской выборке обнаружены генотипы S (1,3% )  и Ural (5,0 %). Основные эпидемические субтипы Beijing  каждой из стран относились к разным клональным комплексам (СС):  монгольские штаммы Beijing в превалирующем количестве имели профили   342-32, 3819-32, 1773-32 MLVA типов и относились к СС4 субтипу; российские штаммы Beijing в основном принадлежали СС1 (43,7% - 227/520) и СС2/W148 (34,8% - 181/520) субтипам. Уровень и модели распространения МЛУ штаммов значительно отличались в Монголии и Восточной Сибири. Моделирование диссеминации эпидемических вариантов возбудителя свидетельствует о крайне незначительном вкладе явления трансграничной передачи M. tuberculosis между Монголией и Россией. Филогенетическая реконструкция эволюции субтипа CC4 генотипа Beijing в Монголии позволяет предположить, что его распространение связано в первую очередь с Китаем и другими странами Западно-Тихоокеанского региона. Прослеживаются три основных филогенетических ветви субтипа CC4, вероятно получивших распространение на территории Монголии в 11-12  веках. Можно предполагать, что распространение эпидемического субтипа CC4 генотипа Beijing происходило в две стадии: ранняя – возникновение предковых вариантов СС4 в Монголии или занос их из Китая (они гомологичны сохранившимся в китайской популяции  штаммам);  поздняя – распространения  за счет активного обмена M. tuberculosis со странами Юго-Восточной Азии, но не России. Заключение.  Используя генотипирование MIRU-VNTR 24 и классификацию по специфическим однонуклеотидным полиморфизмам, характерным для отдельных субтипов генотипа Beijing, были описаны обособленные друг от друга закономерности распространения эпидемических вариантов возбудителя в Монголии и России.  Было продемонстрировано, что возникновение и распространение ТБ с МЛУ в Монголии носит исключительно ятрогенный характер, в то время как на исследуемых территориях России значительный вклад в распространения МЛУ туберкулеза вносят эпидемические субтипы генотипа Beijing (субтипы СС1 и СС2/W148).

41
Аннотация
Целью исследования явилось получение и характеристика рекомбинантной вакцины, предназначенной для иммунопрофилактики инфекций, вызываемых Pseudomonas aeruginosa. При создании вакцины использован комплекс двух высокоиммуногенных рекомбинантных белков P. aeruginosa. Первый компонент вакцины представлял собой рекомбинантную форму белка F наружной мембраны (OprF), а второй – рекомбинантную атоксическую форму (анатоксин) экзотоксина А. Эти антигены позволили разработать вакцину способную стимулировать иммунные реакции против поверхностных структур бактерии и способствовать синтезу нейтрализующих антител против экзотоксина А, одного из наиболее опасных факторов патогенности P. aeruginosa. Рекомбинантные белки синтезировали в клетках Escherichia coli и выделяли в результате двухэтапной очистки. В случае рекомбинантного белка OprF на первом этапе получали осадок, содержащий гидрофобную фракцию белков продуцента, а в случае рекомбинантного анатоксина – тельца-включения. На втором этапе проводили аффинную хроматографию в колонках с никель-сефарозой. Очищенные рекомбинантные белки диализовали против буферного раствора, содержащего 50 mМ Tris-HCl (pH 9,0) и 0,01 % Tween 20, а затем стерилизовали фильтрацией. Для исследования были получены три серии рекомбинантной вакцины синегнойной (РВС), в которой рекомбинантные антигены находились в сорбированном с гидроокисью алюминия состоянии. В этой вакцине рекомбинантный белок OprF использовали в дозе 25 мкг, а рекомбинантный анатоксин – в дозе 50 мкг. Определение полноты сорбции рекомбинантных антигенов в составе вакцины оценивали методом электрофореза в полиакриламидном геле, используя для нанесения препараты РВС, сконцентрированные ультрафильтрацией в спин колонках. С целью оценки подлинности рекомбинантной вакцины разработали оригинальный метод. Для этого проводили десорбцию антигенов с последующей концентрацией препарата с помощью спин колонок. Полученные сконцентрированные десорбированные вакцинные препараты анализировали методом электрофореза в полиакриламидном геле и иммуноблоттингом. В результате чего, подтверждено наличие специфических рекомбинантных антигенов в составе вакцины. Экспериментальные серии РВС проявляли специфическую активность (защитные свойства) в эксперименте на животных (мышах). При этом использована схема двукратного, с двухнедельным интервалом внутрибрюшинной иммунизации, а затем через две недели мышей заражали токсигенной культурой P. aeruginosa штамма PA-103. Индексы эффективности защитных свойств (ИЭ) экспериментальных серий вакцины составляли не менее трех (ИЭ: 3,0 – 3,3), что превышало в полтора раза эффективность использования компонентов вакцины по отдельности (ИЭ: 2,0 – 2,3). Таким образом, подтвержден аддитивный эффект использования комплексного препарата для защиты от инфицирования токигенными штаммами синегнойной палочки.
19
Аннотация

Цель исследования: изучить активность моноцитов у больных описторхозом в зависимости от выраженности фиброза печени. Материалы и методы. Всего было обследовано 74 больных хроническим описторхозом (39 мужчин и 35 женщин, средний возраст 42,3 лет) и 32 практически здоровых пациентов (17 мужчин и 15 женщин, средний возраст 41,5 лет) в возрасте от 24 до 60 лет. Основными методами лабораторной диагностики описторхоза являлись паразитологические исследования с определением яиц или тел взрослых паразитов в дуоденальном содержимом и/или в кале, которые применялись у всех 74 пациентов. Фиброз печени определялся методом эластометрии по шкале METAVIR у всех 74 больных описторхозом. Исследование функциональной активности моноцитов в крови было проведено всем 74 больным описторхозом и 32 здоровым лицам из группы контроля методом хемилюминесцентного анализа с измерением интенсивности выработки активных форм кислорода в спонтанной и зимозан-индуцированной реакции в люцигенин- и люминол-зависимых процессах. Результаты. Фиброз печени F2 по METAVIR был зарегистрирован у 20,3% обследованных лиц, фиброз печени F3-F4 по METAVIR определялся у 17,6% больных с описторхозом. При определении всего пула активных форм кислорода в люминол-зависимом процессе у больных описторхозом регистрировалось значительное снижение функциональной активности моноцитов в сравнении со здоровыми лицами, о чем свидетельствовало значительное снижение максимальной интенсивности выработки активных форм кислорода и площади под кривой хемилюминесценции как в спонтанной реакции, так и в индуцированной зимозаном реакции. Эти показатели у пациентов с фиброзом печени F3-F4 по METAVIR в зимозан-индуцированной реакции были ниже, чем у лиц с фиброзом печени F0-F1 по METAVIR. Показатели функциональной активности моноцитов в спонтанной реакции люминол-зависимого процесса не имели достоверных отличий в зависимости от степени фиброза печени у пациентов с описторхозом. Индекс активации фагоцитоза у больных описторхозом с фиброзом печени F3-F4 по METAVIR был ниже, чем у лиц с фиброзом печени F0-F1 и F2 по METAVIR. Аналогичные изменения наблюдались в люцигенин-зависимом процессе. Заключение. Полученные результаты безусловно перспективны для объяснения механизмов развития фиброза печени у больных описторхозом и создают новые возможности для развития диагностических и лечебно-профилактических технологий. Проект «Иммуно-биохимическая модель прогнозирования выраженности предраковых изменений в печени у больных хроническим описторхозом» проведен при поддержке Красноярского краевого фонда науки (код заявки: 2019051404996).

18
Аннотация

В. Стоилькович1, M. Бичурина2, И. Лаврентьева2, С. Филипович-Вигньевич1,  M. Банчевич1, Н. Железнова2, A. Антипова2

1   Institute of Virology, Vaccine and Sera “Torlak” Belgrade, Serbia

2  Saint Petersburg Pasteur Institute, Saint Petersburg, Russia

Резюме

В 2017 году в Европейском регионе ВОЗ было зарегистрировано 23927 случаев кори в 44 из 53 стран, а в 2018 г. заболеваемость корью возросла до 82599 случаев, которые регистрировались в 48 странах региона. Впервые  в 2018 году имело место большое количество летальных случаев, обусловленных корью. Всего было зарегистрировано 72 случая смерти от кори в десяти странах Европейского региона, включая Сербию (15 случаев).

Цель исследования: характеристика эпидемиологического подъема заболеваемости корью в Республике Сербия (РС) и на территориях Северо-Западного федерального округа России (СЗФО) в 2017 – 2018 гг.

Материалы и методы. Из Северо-Западного федерального округа в 2017-2018 годах были исследованы 944 образца сыворотки крови от пациентов с корью, краснухой и экзантемными заболеваниями, доставленные в вирусологическую лабораторию Санкт-Петербургского Регионального Центра (РЦ). Из Республики Сербия в 2017-2018 годах были исследованы 2946 образцов сывороток крови. Тестирование образцов сывороток крови проводили методом ИФА, с применением  тест-систем IgM-корь фирмы «Вектор-Бест» (Россия) или Сименс (Германия). Образцы мочи и носоглоточных смывов исследовались методом RT-PCR и использовались для выделения и генотипирования вирусов кори.

Результаты

В Республике Сербия  в 2017 – 2018 годах было зарегистрировано 5798  случаев кори. Лабораторно диагноз подтвержден (серологически  и/ или ПЦР) у 2946 пациентов.  Болели в основном невакцинированные лица и лица с неизвестным вакцинным статусом. Большинство заболевших были дети моложе пяти лет и взрослые в возрасте 30 лет и старше.  В течение этого периода было зарегистрировано 15 летальных случаев. В 2017-2018 годах в Республике Сербия циркулировали несколько генотипов вируса кори:   В3 Dublin, D8 Gir Somnath и D8 Herborn.

В Северо-Западном федеральном округе России в 2018 году было зарегистрировано 109 случаев кори, пять из которых были импортированы из других стран. Среди заболевших лиц 64,2% были взрослые. В 74,3% случаев болели невакцинированные или лица с неизвестным вакцинным статусом. Повышение заболеваемости корью в СЗФО была связана с многократным импортом различных генотипов вируса кори: В3 Kabul, B3 Dublin, D8 Frankfurt, D8 Cambridge and D8 Gir Somnath.

27
Аннотация

В рамках реализации глобальной программы элиминации кори и краснухи   проанализирована заболеваемость корью в Российской Федерации за период 2010-2016 гг., характеризующийся разной эпидемической ситуацией по кори. Материалом исследования служили сыворотки крови 5539 лиц в возрасте < 1 – 60 лет с клинически и лабораторно подтвержденной коревой инфекцией. Для лабораторного изучения и анализа полученных результатов использовали рекомендованные ВОЗ лабораторные стандарты по диагностике коревой инфекции. Для всех больных корью в указанный период определен тип иммунного ответа: первичный или вторичный. В исследование были включены: дети в возрасте <1-14 лет (2381), подростки 15-17 лет (189) и взрослые 18-60 лет (2969). Дети были представлены возрастными группами <1года, 1-2 года, 3-6 лет и 7-14 лет. Возрастные группы взрослых составляли 18-30лет, 31-40лет, 41-50 лет и 51-60 лет. При анализе результатов лабораторных исследований сывороток крови повозрастная оценка проводилась независимо от вакцинного статуса больных. Тестирование сывороток на IgM проводилось с помощью тест-систем «ВектоКорь IgМ» (Россия); определение концентрации и степени авидности специфических IgG - «Anti-Measles Viruses ELISA/IgG» и «Avidity: Anti-Measles Viruses ELISA/IgG» фирмы (EUROIMMUN, Германия). В основу интерпретации первичного иммунного ответа было положено наличие в сыворотке специфических IgМ и низкоавидных IgG. Вторичный иммунный ответ характеризовался положительным результатом IgМ и высокоавидными IgG в концентрации ≥5,0 МЕ/мл. Результаты исследования показали, что заболеваемость корью в 2010-2016гг., в основном, поддерживалась детьми 1-2 лет – 39,9% от общего числа заболевших корью детей <1 – 14 лет и взрослыми 18-40 лет - 80,1% от общего числа больных 15-60 лет. При определении IgG в сыворотках крови 5539 больных в 15,0% случаях специфические IgG были выявлены в концентрации ≥5,0 МЕ/мл (вторичный иммунный ответ). При дополнительном разведении показатели IgG были в диапазоне 8,5 – 45,0 МЕ/мл (21,4±0,36) и имели высокую степень авидности от 80 до 100% (92,5±0,2). В остальных 85,0% случаев IgG в сыворотках больных были низкоавидными  (<30%) с концентрацией 0,2 – 3,46 МЕ/мл (1,73 ±0,03) (первичный иммунный ответ). Повозрастной анализ больных корью показал, что у всех заболевших детей в возрасте до 14 лет формировался первичный иммунный ответ. Отсутствие больных с вторичным иммунным ответом среди детей свидетельствует о том, что привитые дети не вовлекались в эпидемический процесс.  Больных корью в возрасте 15 - 60 лет с первичным иммунным ответом, заболевание у которых можно было предотвратить своевременной вакцинацией, было 73,7%; лиц с «вакцинными неудачами» – 26,3%, среди которых подростки 15-17 лет составили 3,3%, взрослые в возрасте 51-60 лет – 1,9% и взрослые 18-50 лет – 94,8%.  Процент больных с «вакцинными неудачами», который составил 35,3%, 18,2% и 9,9% (р<0,001) соответственно, был выше в годы относительного эпидемического благополучия – 2010 г. (0,09 на 100тыс. населения) и 2016 г. (0,12 на 100 тыс. населения) по сравнению с периодом высокой заболеваемости в 2014 г. (3,24 на 100 тыс. населения). Полученные результаты свидетельствуют о циркуляции вируса кори среди лиц с «вакцинными неудачами», что может являться потенциалом распространения и заражения не защищенных групп населения и причиной возникновения вспышек кори в период эпидемического благополучия

37
Аннотация
В 2018 - 2019 гг. в различных регионах Казахстана от больных людей с диагнозами ОРВИ, ОРЗ, бронхит и пневмония в поликлиниках и лечебных учреждениях получено 2794 биопробы (2530 носоглоточных смывов и 264 сыворотки крови). При молекулярно-генетическом исследовании в полимеразной цепной реакции в режиме реального времени 2530 клинических образцов, генетический материал вируса гриппа А был обнаружен в 20,19% случаев, вируса гриппа  B – в 0,11%. При субтипировании РНК вируса гриппа A подтип А/H1 идентифицирован в 11,42%, A/H3 – в 8,26%. В 0,39% проб подтип вируса не установлен.  При лабораторной диагностике 2019 носоглоточных смывов, генетический материал возбудителей ОРВИ обнаружен в 22,83% случаев: аденовирус выявлен в 1,33% проб, риновирус – в 4,16%, коронавирус -  в 0,89%, вирус парагриппа I/III типов - в 0,94%, метапневмовирус – в 1,04%, бокавирус – в 0,09%. Наибольшее количество положительных образцов выявлено к респираторно-синцитиальному вирусу – 14,36%. Результаты, полученные при скрининге носоглоточных смывов в полимеразной цепной реакции в режиме реального времени указывают на циркуляцию в исследованных областях РК вирусов гриппа А/H1N1pdm, А/H3N2 и В и ОРВИ смешанной этиологии. Исследование сывороток крови в реакции торможения гемагглютинации и иммуноферментном анализе показало наличие у населения различных регионов Казахстана антител к вирусам гриппа A/Hsw1N1, A/H3N2 и В, что указывает на социркуляцию этих вирусов. При вирусологическом исследовании носоглоточных смывов, полученных от людей, на куриных эмбрионах выделено 42 изолята, из которых 28 отнесены к вирусу гриппа А/H1N1pdm,  13 - к A/H3N2. Лишь один изолят, выделенный в Алматинской области (южный Казахстан), идентифицирован как вирус гриппа В. Результаты первичного скрининга в в полимеразной цепной реакции в режиме реального времени клинических образцов, собранных в различных регионах Казахстана в эпидемический сезон 2018 – 2019 гг., по спектру возбудителей гриппа и ОРВИ, коррелируют с результатами эпидсезона 2017-2018 гг. Наблюдается продолжение социркуляции вирусов гриппа А и В с доминированием вируса А/H1N1pdm, а также тех же вариантов ОРВИ с преимущественным преобладанием возбудителя респираторно-синцитиальной инфекции, доля которой составляла 14,36% от общего числа проб. Дифференциальная диагностика гриппа и ОРВИ у людей позволяет своевременно выявлять возбудителей инфекции и более эффективно проводить санитарно-профилактические мероприятия.
11
Аннотация

Резюме. Цель работы - изучение механизмов антибиотикорезистентности основных возбудителей гнойно-воспалительных осложнений у онкологических больных.

Материалы и методы. В 2012-2015 гг. проспективно обследовано 184 онкологических больных: 67 больных хирургического отделения №1 и 117 больных отделения анестезиологии-реанимации «Красноярского краевого клинического онкологического диспансера им. А.И. Крыжановского». Материал от больных - бронхоальвеолярный лаваж, раневое отделяемое исследовали бактериологическим методом, а также MALDI-TOF. Антибиотикочувствительность изучали методами: диско-диффузионный; «двойных дисков»; инактивации карбапенемов; скрининга; ПЦР; Е-теста; серийных разведений в бульоне Мюллера-Хинтона. Генотипирование и определение механизмов резистентности: ПЦР, М-ПЦР, секвенирование. Программа WHONET, уровень значимости p<0,05.

Результаты. Установлено превалирование ассоциаций мульти- и экстремально резистентных возбудителей. В микрофлоре нижних отделов дыхательных путей, раневом отделяемом у онкологических больных превалировали неферментирующие грамотрицательные бактерии - 44,5% и 48% соответственно, а также пор. Enterobacterales - 24% и 34,9% соответственно; грамположительные - 24% и 17,1% соответственно. У штаммов P. aeruginosa и A. baumannii, K. pneumoniae, устойчивых к имипенему и/или меропенему проверяли продукцию МБЛ фенотипически, а также гены наиболее распространенных VIM, IMP-типов, а у A. baumannii также гены OXA-23, OXA-40, OXA-58; у K. pneumoniae OXA-48. Штаммы A. baumannii не образуют МБЛ, но 56,3% изолятов (9 штаммов из 16) продуценты карбапенемаз OXA-23 и OXA-40. Штаммы P. aeruginosa 15,0% (3 из 20) обладали VIM. 16,7% (1 из 6) изолятов K. pneumoniae продуцент OXA-48. Удельный вес метициллинрезистентных штаммов р. Staphylococcus составил 48,9%, 4 штамма относились к MRSA. Штаммы MRSA PVL-, относятся к клонам ST239/spa3(t037)/SCCmecIIIA/tst,sek,seq+ (75%) и ST8/spa1(t008)/SCCmecIVc/sea+ (25%). MRSA ST239 резистентны к аминогликозидам (aacA-aphD, aadD), линкозамидам/макролидам (ermА), фторхинолонам (мутации GyrA - Ser84Leu; в GrlA- Ser80Phe), рифампицину (мутации rpoB - His481Asn, Ile527Met), сульфаметоксазолу, тетрациклину (tetM) и резистентны к хлорамфениколу (у 66,7% изолятов cat); чувствительны к ванкомицину (МПК 1,0 мкг/мл), линезолиду в 100% случаев. MRSA ST8 устойчивы к аминогликозидам (aacA-aphD, aadD), линкозамидам/макролидам (ermC), тетрациклинам (tetK), хлорамфениколу (cat); 100% чувствительны к фторхинолонам, рифампицину, сульфаметаксазолу, ванкомицину (МПК 1,0 мкг/мл), даптомицину, линезолиду.

Выводы. Установлено, что пор. Enterobacterales, А. baumannii, P. aeruginosa, MRSA сохраняет высокую антибиотикорезистентность, что необходимо учитывать в подборе адекватной антибиотикохимиотерапии, а также в контроле за распространением нозокомиальных инфекционных заболеваний.

27
Аннотация
Грипп является социально-значимой инфекцией, ежегодно наносящей значительный ущерб здоровью населения и экономике страны. Вакцинопрофилактика является наиболее эффективным способом борьбы с гриппом и его осложнениями. Существуют разнообразные вакцины против гриппа, однако, их общим недостатком является узкая специфичность, необходимость ежегодного обновления штаммового состава, не всегда удовлетворительная иммуногенность, а, следовательно, и эффективность. В этой связи пристальное внимание уделяется проблеме разработки универсальных гриппозных вакцин, направленных на индукцию перекрестно-реагирующих факторов иммунного ответа к наиболее консервативным участкам вирусных белков. Антитела против нейраминидазы (NA) способны обеспечивать гетеросубтипическую защиту, что важно ввиду потенциальной угрозы со стороны вирусов гриппа, с отличающимся гемагглютинином и нейраминидазой по сравнению с вирусами, которые циркулируют в настоящее время. Настоящее исследование посвящено поиску новых и анализу ранее предсказанных линейных B-клеточных эпитопов NA, консервативных среди всех подтипов вируса гриппа А. Было обнаружено 8 консервативных линейных В-клеточных эпитопов, расположенных вокруг активного центра нейраминидазы, три из которых (MNPNQKIITIGS, ILRTQESEC и DNWKGSNRP) были синтезированы de novo, конъюгированы c бычьим сывороточным альбумином и далее использовались для иммунизации мышей. В сыворотках иммунизированных мышей выявлялись IgG антитела, специфически связывающиеся в иммуноферментном анализе с различными вирусами гриппа А, содержащими NA подтипов N1, N2, N3 и N9. Иммунизация NA пептидами не защитила мышей от существенной потери веса после инфицирования летальным вирусом гриппа H1N1. Тем не менее, все иммунизированные мыши выжили в течение периода наблюдения, тогда как в контрольной группе выживаемость составила только 28,6%. Анализ вирусной нагрузки в легких мышей, зараженных вирусом H1N1, не выявил различий в титрах ни на 4, ни на 8 сутки после заражения. В то же время, защитный эффект отсутствовал при заражении мышей летальным вирусом гриппа H7N9: уровень летальности, потеря веса и титры вируса в легких были сопоставимы у иммунизированных и контрольных мышей. Полученные в настоящем исследовании данные показали наличие кросс-реактивности у анти-NA антител, индуцируемых при иммунизации NA пептидами, а также защитной эффективности в отношении инфекции, вызванной вирусом H1N1, но не вирусом H7N9. Эти результаты указывают на перспективность использования линейных B-клеточных эпитопов NA для дизайна эпитоп-направленных гриппозных вакцин, но при этом требуется более глубокое и полное исследование специфичности консервативных эпитопов NA, а также оптимизация схем иммунизации для достижения более высоких показателей защитной эффективности.

КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ

26
Аннотация

В последние десятилетия отмечается повсеместный рост заболеваемости аллергической патологией. Влияние окружающей среды на её развитие очень велико. Естественная природная окружающая среда через эпигенетические механизмы оказывает благоприятное влияние и предотвращает развитие аллергических заболеваний.

Исследование распространенности аллергических заболеваний и атопической сенсибилизации на двух смежных территориях России и Финляндии проводится много лет. Аллергические заболевания и атопическая сенсибилизация больше распространены в Финляндии. При многолетнем наблюдении данные тенденции сохраняются. В настоящем исследовании выполнена оценка атопической сенсибилизации в двух выборках, проживающих на идентичных климато-географических территориях. Оценена  распространенность лиц с повышенным уровнем общего иммуноглобулина Е, общего пищевого и общего ингаляционного иммуноглобулина Е, исследован спектр атопической сенсибилизации к 8 ингаляционным аллергенам: тимофеевка, береза, полынь, Кладоспория травяная, лошадь, кошка, собака и клещ домашней пыли- Dermatophagoides pteronyssinus и 6 пищевым аллергенам: коровье молоко, куриное яйцо, тресковая рыба, соя, пшеница и арахис. Измерение выполнено с помощью радиоаллергосорбентного теста Phadiatop® для ингаляционных и пищевых аллергенов (UniCAP 1000 v.2; Pharmacia Upjohn, Uppsala, Sweden). Пороговые значения: общий IgE 110 kUA/l и sIgE  ≥ 2, 5 kUa/l и 0,35 kUA/l.

Исследование включило 2 этапа- 2003 г и 2010/2012г-Финляндия/ Россия. В 2003 г случайным образом включены дети 7-15 лет из Финляндии (n = 344) и из республики Карелия (n = 427). Во 2 этап включены участники, которым оценивали уровень  IgE в 2003 г, всего180: финны, n = 98  (38 мальчиков и 60 девочек), россияне, n = 82 (39 мальчиков и 43 девочки). Протокол исследования одобрен этическим комитетом Центральной Больницы Хельсинского Университета, Петрозаводским Государственным Университетом, у всех участников получено письменное информированное согласие. Результаты. В Финляндии распространенность повышенного  IgE в 2003 и 2010/2012г выше. В динамике - незначительное снижение распространенности общего IgE в двух когортах. Распространенность повышенного ингаляционного sIgE в 2003 и 2010/2012г статистически достоверно выше встречается  у финнов, р=0,019 и р=0,027. В динамике -рост данной атопической сенсибилизации в двух исследуемых когортах. Повышенный пищевой sIgE в 2003г у финнов встречается чаще, чем у россиян (27,6 % и 18,3%),  р=0,142. В 2010/2012г распространенность пищевой сенсибилизации снижается у финнов в 2 раза, у россиян в 3 раза. В России в 2003 г наиболее высокий уровень сенсибилизации выявлен к клещу домашней пыли и кошке, дальше следуют- тимофеевка, береза и собака. На 2 этапе отмечен рост сенсибилизации. Наиболее сильно это прослеживается в отношении тимофеевки - увеличение практически в 2 раза до 12,2 % (5,0; 19,4), р=0,176, полыни в 2 раза - до 7,3% (1,6; 13,1), р=0,312, лошади в 2 раза - до 2,4 % (0,0; 5,8), р=0,563, собаки в 1,5 раза - до 7,3% (1,6; 13,1), р=0,521 клеща домашней пыли в 1,5 раза - до 22 % (12,8; 31,1), р=0,220. В Финляндии в 2003 г преобладает сенсибилизация к собаке-26,5%, тимофеевке- 24,5%, березе-20,4% и кошке- 20,4%. В 2010 г отмечен рост сенсибилизации к ингаляционным аллергенам, преимущественно в отношении клеща домашней пыли- она увеличивается практически в 2 раза с 8,2% до 19,4% (р=0,023), и лошади-  увеличивается более, чем в 2 раза, с 5,1% до 13,3% (р=0,047). При рассмотрении пищевого sIgЕ, различия между исследуемыми группами также выявлены. В России в 2003 г преобладает атопия к яичному белку, коровьему молоку и пшенице, в динамике наблюдения  имеется тенденция к её снижению. В Финляндии наибольшая сенсибилизация выявлена к коровьему молоку, орехам, пшенице и яичному белку, в динамике наблюдения тоже снижается. Интересно, что на обоих этапах исследования не выявлена сенсибилизация к рыбе среди россиян и финнов. Статистически достоверное различие в сенсибилизации между группами достигнуто только в отношении арахиса и коровьего молока в 2003 г. На 2 этапе исследования имеет место снижение сенсибилизации к пищевым аллергенам, преимущественно на финской стороне.

Таким образом, различия в атопической сенсибилизации, развившиеся в детском возрасте, сохранялись между обследованными популяциями Финской и Российской Карелии через 7-9 лет.  

24
Аннотация

Высокоактивная антиретровирусная терапия (АРВТ) позволяет не только контролировать инфекционный процесс у конкретного пациента, но и снижать риск распространения ВИЧ-инфекции в целом, поэтому одной из целей международного сообщества в рамках борьбы с распространением ВИЧ является максимально широкий охват инфицированных лиц АРВТ. Антиретровирусная терапия при ВИЧ-инфекции назначается пожизненно, в связи с этим эффективность лечения может снижаться за счет появления резистентных к терапии форм ВИЧ-1. В настоящее время во всем мире продолжается процесс разработки новых антиретровирусных препаратов, поэтому для оценки противовирусной эффективности перспективных лекарственных средств востребованными являются стандартные модели ВИЧ-1.

Для достоверной оценки эффективности препаратов в отношении российских вариантов ВИЧ-1 в качестве модели вируса должны быть использованы геноварианты ВИЧ-1, широко распространенные на территории России. Недавно возникшая рекомбинантная форма CRF63_02A6 ВИЧ-1 за последние годы распространилась на территориях России и в настоящее время является доминирующим вариантом, выявляемом среди ВИЧ-инфицированных лиц на значительной части Сибирского федерального округа: в Новосибирской, Томской, Омской, Кемеровской области, Красноярском и Алтайском крае. Нами получены инфекционные изоляты CRF63_02A6 ВИЧ-1, один из которых содержит мутации, снижающие чувствительность к применяемым ингибиторам обратной транскриптазы вируса, и инфекционные молекулярные клоны на основе вариантов CRF63_02A6 ВИЧ-1, имеющих сродство к корецепторам CCR5 и CXCR4. Инфекционные изоляты и молекулярные клоны CRF63_02A6 протестированы в качестве моделей для оценки эффективности антиретровирусных препаратов на примере препарата эфавиренз. Значение пятидесятипроцентной ингибирующей концентрации, определенной на моделях  инфекционных молекулярных клонов ВИЧ-1 и изолята 18RU7056 ВИЧ-1 варьировало от  0,00027 мкг/мл до 0,00046 мкг/мл, что соответствует данным зарубежных авторов. Для резистентного к ненуклеозидным ингибиторам обратной транскриптазы 12RU6987 ВИЧ-1 подавления репликации для исследованных концентраций эфавиренза не отмечалось, что подтверждает снижение чувствительности 12RU6987 ВИЧ-1 к эфавирензу не менее, чем в 10 000 раз. Результаты проведенных исследований показывают, что изолированные штаммы CRF63_02A6 ВИЧ-1 и созданные на основе CRF63_02A6 ВИЧ-1 инфекционные молекулярные клоны являются релевантными и взаимодополняющими инструментами для оценки эффективности разрабатываемых препаратов, направленных на подавление ВИЧ-1, в том числе, вирусов, резистентных к ненуклеозидным ингибиторам обратной транскриптазы.

28
Аннотация

Целью исследования было выявление взаимосвязи между полиморфизмами, ассоциированными с развитием ишемической болезни сердца, и патогенетическими особенностями описторхозной инвазии. Проведено сопоставление лабораторных показателей функционирования иммунной системы организма у больных хроническим описторхозом (вызванным Opisthorchis felineus) с различными генотипами – наличием и отсутствием мутаций в локусах, ассоциированных с предрасположенностью к развитию ишемической болезни сердца. Обнаружено, что при обусловленных мутациями нарушениях функций аденозинмонофосфат-дезаминазы 1, фактора индуцируемого гипоксией 1 альфа, аполипопротеина Е по сравнению с пациентами без минорных аллелей, воздействие описторхозной инвазии приводит к изменению иммунного реагирования. При этом у пациентов, имеющих мутацию гена аденозинмонофосфат-дезаминазы 1, обнаружена меньшая выраженность адаптивного клеточного (сниженное количество CD8+-лимфоцитов), адаптивного гуморального иммунитета (сниженное количество Ig A). У больных описторхозом, имеющих редкий аллель гена HIF1A, выявлена активация адаптивного иммунитета и снижение активации врожденного иммунитета. Наличие мутации rs42935 гена APOE приводит к снижению активности адаптивного клеточного иммунного ответа, что усугубляет течение описторхозной инвазии. Наличие минорного аллеля полиморфизма rs1333049 гена CDKN 2A/2B (ингибиторы циклин-зависимой киназы), не приводит к значительным изменениям иммунного реагирования.

Таким образом, при обусловленных мутациями нарушениях функций определенных белков воздействие описторхозной инвазии приводит к разнонаправленным изменения показателей иммунного ответа, при этом приближение показателей разных звеньев иммунной системы к «нормальному» уровню при наличии хронической паразитарной инвазии не всегда можно интерпретировать как «протективный» эффект того или иного полиморфизма. Наибольшие изменения в иммунном реагировании у пациентов с хроническим описторхозом выявлены при наличии полиморфизма в гене фактора индуцируемого гипоксией-1 альфа.

Полученные результаты позволяют предполагать участие исследованных генетических полиморфизмов, в предрасположенности к проявлению определенных клинических форм заболевания при заражении возбудителем описторхоза.

19
Аннотация

Резюме

Инфекция мочевой системы (ИМС) является актуальной проблемой современной педиатрии, педиатрической нефрологии и урологии. Клиническая картина ИМС у детей полиморфна, может быть достаточно стертой и меняться с возрастом. Классические симптомы инфекции мочевой системы у новорожденных и детей раннего возраста нередко протекают субклинически. Среди многочисленных факторов в развитии ИМС приоритетное значение имеют биологические свойства микроорганизмов, колонизирующих почечную ткань. В последние годы увеличилось этиологическое значение Enterococcus faecalis в развитии данной патологии. Цель исследования: определить клинические признаки инфекции мочевой системы ИМС, ассоциированной с E. faecalis у детей и выявить его биологические особенности для оценки их клинической значимости. Материалы и методы: проведен анализ этиологической структуры ИМС у детей в многопрофильной детской клинической больнице за 9 лет, представлены результаты клинико-лабораторного обследования 181 ребенка с ИМС от 3 дней до 17 лет, из мочи которых был выделен E.faecalis, результаты микробиологического исследования 60 штаммов E.faecalis, выделенных из мочи исследуемых детей. Результаты. Представлена клинико-лабораторная характеристика ИМС, ассоциированной с E.faecalis, возрастная вариабельность симптомов. Преобладающими в клинической картине являются интоксикационный синдром и лихорадка. Ключевым признаком ИМС является дисфункция желудочно-кишечного тракта (у новорожденных и детей первого года жизни) и боль в поясничной области (у детей старшего возраста). Выявленные клинические симптомы могут быть связаны с поражением верхних отделов мочевыводящих путей, наличием сопутствующих заболеваний и с патогенными свойствами E. faecalis. Другие симптомы встречались реже, соответствовали возрасту пациентов, хотя абдоминалгия одинаково часто встречалась у детей всех возрастных групп.

Результаты лабораторного обследования также зависели от возраста пациентов. Отмечено, что лейкоцитоз, тромбоцитоз более выражены у новорожденных детей; лейкоцитурии и протеинурии - у детей старше года, хотя в этой группе клинические симптомы менее выражены.

Указаны особенности и клиническая значимость биологических свойств E.faecalis, их неоднородность с учетом возраста пациентов, от которых они выделены. Выявлена связь патогенных свойств между собой и определенными клиническими симптомами. Заключение: доминирующие клинические симптомы (интоксикация, гипертермия), свидетельствующие о поражении верхних отделов мочевыделительной системы, связаны, в том числе, с комплексом биологических свойств E.faecalis, обладающих гистоповреждающим и цитолитическим действием.

 

Abstract

Urinary tract infection (UTI) is a topical problem in modern pediatry, pediatric nephrology and urology. The clinical presentation of UTI in children is polymorphic, it can effaced and change with age. The classic symptoms of urinary tract infections often occur subclinically in infants and young children.

Among the many factors in the development of UTI, the biological properties of microorganisms colonizing kidney tissue are of priority importance. The etiological significance of Enterococcus faecalis in development of this pathology has increased in recent years. Purpose of the study was to determine the clinical signs of urinary system infections associated with E. faecalis in children and to reveal its biological characteristics for assessing clinical significance of enterococci. Materials and methods: an analysis of the etiological structure of UTI in children in a multidisciplinary pediatric clinical hospital for 9 years was carried out. Results of a clinical and laboratory examination of 181 children with UTI in age from 3 days to 17 years and of microbiological study of strains 60 E. faecalis, isolated from those patients urine, were submitted.

Results: The clinical and laboratory characteristics of the UTI associated with E. faecalis and the age variability of the symptoms were presented. An intoxication syndrome and fever were prevailing in the clinical picture. A key sign of UTI were gastrointestinal dysfunction (in newborns and children of the first year of life) and pain in the lumbar region (in older children). The identified clinical symptoms may be associated with the upper urinary tract damage, presence of concomitant diseases, and the pathogenic properties of E. faecalis. Other symptoms were less common, consistent with the age of the patients, although abdominalgia was equally common in children of all age groups.

Laboratory examination results also depended on the age of the patients. It was noted that leukocytosis, thrombocytosis were more pronounced in newborns; leukocyturia and proteinuria - in children older than a year, although in this group the clinical symptoms were less pronounced.

Specific features and clinical significance of the biological properties of E.faecalis, their heterogeneity, taking into account the age of the patients from which they were isolated, were indicated. The relationship of pathogenic properties to each other and to certain clinical symptoms were revealed. Conclusion: the dominant clinical symptoms (intoxication, hyperthermia), indicative of the lesion of the upper parts of the urinary system, are related, among other things, to the complex of biological properties of E. faecalis, which have histo-damaging and cytolytic effects.

20
Аннотация

Целью настоящего исследования явилось изучение  локального и сывороточного уровней  цитокинов, участвующих в регуляции воспаления, у пациенток с хроническим эндометритом в сочетании с гиперпластическими процессами эндометрия.Всем пациенткам при поступлении в стационар была выполнена гистероскопия с раздельным диагностическим выскабливанием и последующим гистологическим исследованием соскобов слизистой полости матки и цервикального канала. Показаниями к их выполнению являлись аномальные маточные кровотечения, а также подозрение на патологию эндометрия по данным ультразвукового сканирования.На основании данных гистологического исследования ткани эндометрия, все пациентки были разделены на две группы: I группу составили 45 женщин с ХЭ в сочетании с ПГЭ без атипии; II группу – 38 пациенток с морфологически верифицированным ХЭ в сочетании с КГЭ без атипии.Определение концентрации IL-1β, IL-2, IL-6, γ-INF, TNF-α в биологических жидкостях (аспират из полости матки; сыворотка крови) осуществлялось методом твердофазного иммуноферментного анализа. В ходе настоящего исследования установлено, что в подавляющем большинстве случаев причиной госпитализации пациенток обеих групп (91,1% и 89,6% соответственно) явились аномальные маточные кровотечения. В структуре нарушений менструального цикла обследуемых больных  доминировала олигоменорея, чередующаяся с межменструальными кровотечениями (66,7% и 71,2% соответственно), в то время как  у 11 (24,4%) пациенток I группы и у 7 (18,4%) больных  II группы отмечались обильные менструальные кровотечения.В целом, анализ полученных нами данных о концентрации цитокинов как в аспирате из полости матки, так и в сыворотке крови, свидетельствует о продолжающемся воспалительном процессе на момент обследования. При этом процесс носит не только локальный характер, но и имеет признаки системной воспалительной реакции.Данные об уровне цитокинов в аспирате из полости матки пациенток с ХЭ в сочетании с ПГЭ или КГЭ без атипии свидетельствуют о наличии локального воспалительного процесса, который характеризуется статистически значимым повышением концентрации IL-1β, IL-2, IL-6, TNF-α и γ-IFN. При этом более высокий уровень IL-1β и γ-IFNу пациенток II группы, вероятно, свидетельствует о влиянии степени морфологических изменений в эндометрии на уровень локальной продукции цитокинов. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что иммунные изменения при хроническом эндометрите в сочетании с неатипическими гиперпластическими процессами эндометрия происходят преимущественно на локальном уровне. В связи с этим, определение концентрации цитокинов в аспирате из полости матки является прогностически значимым для диагностики и контроля эффективности проводимой терапии у данной когорты пациенток. 



Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2220-7619 (Print)
ISSN 2313-7398 (Online)