Preview

Инфекция и иммунитет

Расширенный поиск
Online First
https://doi.org/10.15789/2220-7619-2019-0

Статьи

4
Аннотация

Резюме: Хроническая воспалительная патология околоносовых пазух является в настоящее время одной из актуальных проблем современного здравоохранения, при этом наиболее часто патологический процесс локализуется в верхнечелюстной пазухе. Последние два десятилетия все большее этиологическое значение в инициации воспаления слизистых оболочек околоносовых пазух придается бактериальной внутриклеточной инфекции – микоплазменной и хламидийной. При этом хламидии, чей жизненный цикл связан с непосредственным нахождением в клетках хозяина, являются патогенными облигатными внутриклеточными грамотрицательными бактериями, в то время как микоплазмы – это мембрано-ассоциированный микроорганизм, способный к саморепликации и длительной персистенции на мембранах клеток макроорганизма. Увеличение роста хронической патологии околоносовых пазух, сопряженной с внутриклеточной инфекцией,  определяется многими обстоятельствами, прежде всего увеличением числа иммунокомпрометированных лиц, ухудшением социальных и экологических условий жизни, бесконтрольным и необоснованным применением современных антимикробных и антисептических, гормональных средств, нарушающих совокупность внеклеточных микробных популяций (микробиоценозов),  населяющих естественный  биотоп слизистых оболочек верхних дыхательных путей. Эти факторы способствует снижению колонизационной резистентности, внедрению и размножению хламидий и микоплазм в виде моно- или микст- инфицирования. При этом смешанные варианты хламидийно-микоплазменной инфекции характеризуются развитием более тяжелых форм синуситов с развитием разнообразных осложнений со стороны нижних дыхательных путей, пищеварительного тракта, мочеполовой и нервной систем. Для определения эпидемиологической характеристики и особенностей системного и мукозального иммунных ответов у больных с обострением хронического верхнечелюстного синусита, сопряженного с внутриклеточной бактериальной инфекцией, было обследовано 189 человек. Наличие внутриклеточной бактериальной инфекции подтверждалось лабораторными тестами: прямым иммунофлуоресцентным анализом и полимеразно-цепной реакцией. Анализ результатов исследования показал у пациентов с обострении хронической воспалительной патологии околоносовых раковин высокую частоту выявления Сhlamydia trachomatis, Chlamydophila pneumoniae, Mycoplasma pneumonia.  При сравнении результатов лабораторных исследований больных с идентифицированной внутриклеточной бактериальной инфекцией и пациентов с отрицательными тестами была выявлена общая направленность патологических изменений со стороны иммунной системы, соответствующая стандартному ответу организма на имеющейся воспалительный инфекционный процесс. Кроме этого были выявлены и особенности  иммунореактивности у больных с верифицированной хламидийной инфекцией, заключающиеся в более выраженном дисбалансе в Т-клеточном звене иммунитета, а также в активации параметров гуморального звена иммунитета у больных с подтвержденным хламидийным и микоплазменном инфицировании.

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

6
Аннотация

Охарактеризована распространенность карбапенемаза-продуцирующих Klebsiella pneumoniae в организациях здравоохранения, определена их чувствительность к антимикробным препаратам, комбинациям антимикробных препаратов, дезинфектантам. В рамках программы микробиологического мониторинга отобрано 58 клинических изолятов K.pneumoniae, нечувствительных к карбапенемам и/или полимиксинам. Гены, кодирующие карбапенемазы групп КРС, ОХА-48, VIM, IMP, NDM, выявлялись методом мультиплексной ПЦР в реальном времени. Чувствительность к антимикробным препаратам определялась автоматизированным методом на микробиологическом анализаторе VITEK-2 Compact (bioMérieux, Франция) и методом последовательных микроразведений в бульоне. Определение чувствительности к 11 двойным комбинациям антимикробных препаратов выполнено модифицированным методом тестирования бактерицидности различных комбинаций. В составе комбинаций тестировали АМП, взятые в пороговых фармакокинетических / фармакодинамических (ФК/ФД) концентрациях: меропенем - 8 мкг/мл, амикацин - 16 мкг/мл, левофлоксацин - 1 мкг/мл, тигециклин - 0,5 мкг/мл, фосфомицин - 32 мкг/мл, колистин - 2 мкг/мл. Чувствительность к 7 комбинированным дезинфицирующим средствам различного состава определена суспензионным методом. Присутствие генов карбапенемаз выявлено у 22 клинических изолятов K.pneumoniae. Из них 19 изолятов содержали ген blaOXA-48, и 3 изолята – ген blaNDM. Продуценты карбапенемаз выявлены в 10 организациях здравоохранения Гомеля и пяти районных центров Гомельской области. Большинство изолятов K.pneumoniae с продукцией карбапенемаз были выделены от пациентов, госпитализированных в отделения реанимации и интенсивной терапии (63,6%) и отделения хирургического профиля (27,3%).

Наибольшую активность в отношении карбапенемаза-продуцирующих K.pneumoniae проявляли тигециклин (100% чувствительных изолятов, МПК50 – 1 мкг/мл, МПК90 – 1 мкг/мл) и колистин (86,4% чувствительных изолятов, МПК50 – 0,5 мкг/мл, МПК90 – 4 мкг/мл), наименьшую - аминопенициллины, цефалоспорины, азтреонам, аминогликозиды, фторхинолоны, хлорамфеникол (чувствительные изоляты отсутствовали). Отмечена бактерицидная активность всех комбинаций антимикробных препаратов с включением колистина (меропенем – колистин, амикацин – колистин, левофлоксацин – колистин, тигециклин – колистин, фосфомицин – колистин) в отношении 86,4-95,5% исследуемых изолятов K.pneumoniae. Для 21 изолята (95,5%) K.pneumoniae выявлено не менее 3 различных комбинаций антимикробных препаратов с бактерицидной активностью. Для одного изолята (продуцента МБЛ NDM с МПК колистина 32 мкг/мл) выявлена только 1 бактерицидная комбинация (меропенем – амикацин). Среди карбапенемаза-продуцирующих K.pneumoniae не обнаружено изолятов, устойчивых к рабочим концентрациям какого-либо из включенных в исследование дезинфектантов. В концентрации 1/4 от рабочей оказывали бактерицидное действие на все изоляты гексадекон, дуацид, оксидез, хлороцид, диайсид. В концентрации 1/16 от рабочей дуацид, оксидез, хлороцид, диайсид оказывали бактерицидное действие на 95,5-100% изолятов. Таким образом, несколько групп дезинфектантов (окислители, хлорсодержащие препараты) обладали бактерицидной активностью в отношении множественно- и экстремально-резистентных изолятов K.pneumoniae даже в концентрациях, в 4-16 раз ниже рекомендованных.

45
Аннотация

Проанализированы фенотипическая чувствительность и генетические детерминанты резистентности к тетрациклину у 399 клинических изолятов Neisseria gonorrhoeae, собранных в различных регионах РФ в 2015-2017 гг. Оценку фенотипической устойчивости проводили методом серийных разведений в агаре и оценивали по критериям МУК 4.2.1890-04, фиксируя значения минимальной подавляющей концентрации (МПК). Для анализа генетических маркеров резистентности использовали гидрогелевый биочип с иммобилизованными олигонуклеотидными зондами, позволяющий одновременно детектировать ряд хромосомных мутаций и наличие плазмидного гена tetM, ассоциированных с резистентностью N. gonorrhoeae к тетрациклину. Детерминанты устойчивости были идентифицированы у 193 изолятов (48,4%). Наиболее часто встречались замены в кодоне 57 гена rpsJ (41,2%), уменьшающие аффинность тетрациклина к 30S субъединице рибосомы, в основном, мутация Val57Met, как в виде одиночной замены, так и в сочетании с другими мутациями. Замены в данном гене приводили к появлению умеренно-резистентных штаммов. Второй по частоте встречаемости (23,1%) оказались мутации в гене porB (нарушение поступления антибиотика в клетку); при этом замена Gly120Lys, как правило, приводила к появлению резистентности к тетрациклину, как в случае единичной мутации, так и в совокупности с другими заменами. Другие мутации в кодоне 120 (Gly на Asp, Asn или Thr), а также замены Ala121 на Asp, Asn и Gly оказывали значительно меньшее влияние на уровень устойчивости. У 11,3% штаммов наблюдалась делеция аденина в -35 положении в промоторной области гена mtrR (увеличение экспрессии помпы эффлюкса MtrC-MtrD-MtrE). Ген tetM был выявлен в 27 изолятах, в том числе, американского типа – в 17 штаммах, голландского типа – в 10, для которых построено филогенетическое дерево с оценкой гомологии с аналогичными генами у микроорганизмов из родов Streptococcus, Enterococcus и Mycoplasma. Мутации в хромосомных генах приводили к увеличению МПК тетрациклина до 2-4 мг/л; максимальную МПК - 4 мг/л наблюдали при одновременном присутствии нескольких мутаций. Изоляты, несущие плазмиду с геном tetM, демонстрировали высокий уровень устойчивости (МПК ≥ 8 мг/л, у двух образцов – 64 мг/л). Долговременный отказ от использования тетрациклина для лечения гонококковой инфекции (с 2003 г.) привел к снижению доли резистентных штаммов, включая умеренно резистентные, с 75% до 42,6%, однако устойчивость к тетрациклину в настоящее время в РФ остаётся на высоком уровне, что определяется сохранением различных детерминант резистентности у половины изолятов в исследованной выборке.

3
Аннотация

В настоящее время наблюдается тенденция увеличения заболеваемости вакциноуправляемыми инфекциями, как в Российской Федерации, так и во многих европейских странах. Этот рост определяется целым рядом причин, в том числе потерей настороженности у медицинских работников в необходимости соблюдения качества иммунопрофилактики. Вакцинация на сегодняшний день является наиболее эффективным профилактическим мероприятием в борьбе с инфекционными болезнями. Однако эффективность вакцинации напрямую зависит от охвата прививками и своевременности проведения вакцинации. Материалы и методы. Нами был проанализирован охват и своевременность проведения прививок против дифтерии, столбняка, кори и вирусного гепатита В населения Российской Федерации, города Москвы, трех детских и трех взрослых поликлиник г. Москвы. Результаты. Детское население привито против этих инфекций лучше, чем взрослое. Однако при охвате против всех инфекций в 95% и выше, имеются недостатки в своевременности проведения прививок. Против дифтерии и столбняка в 2017 году, несмотря на то, что вакцинация должна начинаться в 3 месяца, а заканчиваться в 6 месяцев, в этом возрасте привито всего лишь 46,9% в РФ, 48,7% в Москве, а в отдельных детских поликлиниках – от 21,8% в 2012 г. до 1,7% в 2017 г. Ситуация с проведением ревакцинации еще сложнее. В возрасте 18 месяцев в РФ ревакцинировано 50%, в Москве 54%, в отдельных детских поликлиниках от 49% до 55%. В возрасте 7 и 14 лет в РФ ревакцинировано 97%. Похожая ситуация с вакцинацией против гепатита В, законченный курс вакцинации к 6 месяцам получает всего лишь 49% в РФ и в г. Москве. Более 90% охват достигается только в возрасте 1 года. Охват вакцинацией взрослого населения против гепатита В лучше, чем против дифтерии и столбняка и достигает выше 85%. Охват прививками против кори в РФ во всех возрастах выше 95%. Таким образом, необходимо оптимизировать работу по соблюдению своевременности вакцинации, поскольку снижение качества вакцинации неизбежно приводит к увеличению заболеваемости вакциноуправляемыми инфекциями. Изменить ситуацию со своевременностью проведения прививок и достижения необходимого охвата можно с внедрением автоматизированной системы учета профилактических прививок в Российской Федерации.

Аннотация

Ведущими патогенами в развитии обострения хронических бронхолегочных заболеваний в педиатрической практике являются Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae, при этом серотип возбудителя во многих случаях определяет тяжесть заболевания. Вакцинопрофилактика пневмококковой и гемофильной инфекций оправдана и рекомендована лицам с хронической патологией, однако нет четких рекомендаций по комбинированному применению препаратов Пневмо-23 и Акт-хиб у детей с пороками развития легких и бронхов в сочетании с бронхиальной астмой. Материалы и методы. В исследование включено 92 пациента, возраст 0 - 17 лет с хроническими бронхолегочными заболеваниями; контрольную группу составили 55 здоровых детей, а так же 57 детей с хронической бронхолегочной патологией не вакцинированные. Моно или комбинированная вакцинация препаратами Пневмо-23 и Акт-хиб была проведена в периоде ремиссии основного заболевания. Уровни IgM и IgG к антигенам H.influenzae и   к полисахариду H.influenzae тип b, к полисахаридам S. рneumoniae  входящим в состав вакцины (серотипов 3, 6B, 9N, 23F) и к комплексу полисахаридных антигенов вакцинного препарата проводилось с помощью ИФА, разработанного в ФГБНУ «НИИВС им. И.И. Мечникова». Статистическая обработка данных проводилась методами описательной, параметрической и непараметрической статистики с помощью программы «Statistica.5». Результаты. Введение вакцины Пневмо-23 детям с хронической бронхолегочной патологией сопровождалось синтезом IgG к ПС серотипов 3, 6В, 9N, 23F; через 6 месяцев отмечено нарастание уровня антител к 3 и 23F серотипам; через 18 месяцев сохранялись высокие титры антител к полисахаридам, входящим в вакцину Пневмо-23. Одновременно отмечался достоверный прирост уровня IgM к полисахариду 23F и к полисахаридам, входящих в вакцину через 1 месяц; через 18 месяцев после вакцинации уровни IgM к серотипам 6В, 9N сохранялись, с достоверным увеличением показателей к серотипам 3, 23F. Оценивая эффективность вакцинопрофилактики против гемофильной типа b инфекции показано, что через 1, 6, 18 месяцев после введения препарата Акт-Хиб, отмечалось достоверное увеличение уровней IgM к ПС, входящим в вакцину, а также нарастание уровня IgG к полисахариду H. influenzae типа b через 1 месяц после введения вакцины с сохранением высокого титра через 6 мес и 18 месяцев. Выводы. Вакцинация препаратами Пневмо-23 и Акт-Хиб детей с хроническими бронхолегочными заболеваниями сопровождается активацией адаптивного иммунитета, проявляющейся синтезом IgM и IgG к вакцинным антигенам.

2
Аннотация

Рассеянный склероз – хроническое демиелинизирующее заболевание центральной нервной системы с гетерогенными проявлениями, характеризующееся аутоиммунным воспалением и прогрессированием нейродегенерации. Одной из особенностей аутоиммунного воспаления при рассеянном склерозе является полиспецифический интратекальный гуморальный иммунный ответ против нейротропных вирусов (кори, краснухи и ветряной оспы) – MRZ-реакция. В ее основе лежит поликлональная активация зрелых В-лимфоцитов в центральной нервной системе с интратекальным синтезом антител к анамнестическим антигенам, что не связано с репликацией вирусов в центральной нервной системе и синтезом антител в крови. Иммуноглобулины, продуцируемые против нейротропных вирусов, являются составной частью олигоклонального пула антител в цереброспинальной жидкости. Поскольку иммуноглобулины способны проникать через гематоэнцефалический барьер, для определения их интратекального синтеза рассчитывают индексы, учитывающие не только концентрации антител в сыворотке крови и цереброспинальной жидкости, но и проницаемость гематоэнцефалического барьера для данных антител (К (альбумин), К (IgG)). Цель исследования состояла в оценке информативности определения показателей интратекального синтеза антител против нейротропных вирусов (MRZ-реакции) при рассеянном склерозе. В исследование включены 60 пациентов: первая группа - 35 больных рассеянным склерозом, вторая – 25 пациентов с различными воспалительными и невоспалительными заболеваниями центральной нервной системы. У всех пациентов в парных образцах цереброспинальной жидкости и сыворотки определяли следующие показатели: олигоклональный IgG, свободные легкие цепи иммуноглобулинов каппа и лямбда, индекс IgG и индексы специфических антител с последующей оценкой выраженности MRZ-реакции. Результаты показали, что MRZ-реакция является наиболее специфичным тестом для диагностики рассеянного склероза. У 3 из 35 пациентов группы с рассеянным склерозом с отсутствием олигоклонального IgG был выявлен интратекальный синтез антител к нейротропным вирусам. Кроме того, у больных рассеянным склерозом выявлена взаимосвязь MRZ-реакции со степенью инвалидизации по шкале EDSS: у пациентов с наиболее высокими показателями EDSS присутствует интратекальный синтез антител к трем вирусным агентам, а наиболее низкие показатели EDSS были у MRZ – негативных пациентов. Определение MRZ-реакции представляется целесообразным для подтверждения диагноза рассеянного склероза при отрицательных результатах других лабораторных тестов (олигоклональных иммуноглобулинов  и свободных легких цепей иммуноглобулинов каппа/лямбда в цереброспинальной жидкости) и позволяет повысить точность диагностики и оценки тяжести течения рассеянного склероза.

4
Аннотация

Медицинское сообщество отмечает устойчивую тенденцию к увеличению аллергических заболеваний, как следствие использования синтетических препаратов и экологической катастрофы. В этой связи все  большее внимание приобретают натуральные терапевтические подходы, один из перспективных, которых является гирудотерапия. Исследовали половозрелых нелинейных самок крыс, которым  2 недели до и 2 недели после случки делали приставки медицинской пиявки массой 400 ± 10 мг в подлопаточную область и их приплод на 1, 15, 30, 45, 60 сутки, а самок после вскармливания приплода. Самок выводили из эксперимента на 60 сутки после вскармливания приплода. Сроки проведения эксперимента были выбраны с учетом общепризнанного подразделения возрастных периодов у крыс. Так, 1-5 сутки жизни соответствует периоду новорожденности, 6-21 сутки - подсосному периоду, 22-50 сутки - период становления половой зрелости, и наконец, с 60 суток - период половой зрелости. Всего в эксперименте было использовано 40 самок нелинейных крыс и 200 их приплода.  Всех животных декапитировали под эфирным наркозом после измерения морфометрических показателей тела. После чего делали вскрытие животного и собирали кровь в стерильную центрифужную пробирку с использованием 2% кристаллического гепарина (8:1) «Спофа», исследовали унифицированными методами: морфометрические показатели тела, селезенки и тимуса; общее количество лейкоцитов; лейкоцитарную формулу крови; общее количество эритроцитов; гемоглобин; цветной показатель. Статистическую обработку результатов проводили методом вычисления средней арифметической, ошибки средней арифметической, среднего квадратичного отклонения с помощью компьютерных программ SPSS v. 21,0 и Microsoft Office Excel 2010. Достоверность различий между средними величинами оценивали по критерию Стьюдента. Различия считали достоверными при р≤ 0,05. В результате наших исследований было выявлено иммуностимулирующее воздействие слюны медицинской пиявки в условиях гирудовлияния на морфометрические показатели тела и основные иммуногенные органы крыс (тимус и селезенка). У потомства опытной группы, начиная с первых суток, увеличивалось количество лейкоцитов, количество эритроцитов, повышался гемоглобин. Проведенные исследование убедительно продемонстрировало стимулирующее влияние  слюны на гистогенетические реакции на изученых этапах онтогенеза: у самок крыс и их потомства. Причем у самок данный морфогенетический эффект сохраняется более чем через 70 суток после последней постановки: на второй неделе - после случки с самцами и выведение из эксперимента через 30 суток после родов. Изменения морфологических и гематологических показателей свидетельствуют об  активации морфогенетической функции иммунитета под влиянием биологически активных веществ медицинской пиявки.

Аннотация
Пневмококки (Streptococcus pneumoniae или S. pneumoniae)  значимые возбудители тяжёлых и опасных для жизни острых пневмоний, менингитов, а также отитов и синуситов у детей и лиц пожилого возраста. Цель исследования – изучениеактивности IgA1 – протеиназ и их классового профиля (Na2-ЭДТА и PMSF-ингибируемых) у различных серотипов пневмококков, выделенных от детей, являющихся носоглоточными носителями этих штаммов. Материалы и методы. Обследовано 585 детей, посещающих детские дошкольные учреждения, и проживающих г. Казани (n=331) и в сельской местности (n=254). Применены микробиологические, молекулярно-генетические и иммунохимические и биохимические методы для идентификации, определения серотипового состава и активности протеаз изолятов Streptococcus pneumoniae. Статистическая обработка результатов осуществлена с помощью программного пакета Graph Pad Prism версия 5.0. Результаты. Частота распространенности S. pneumonieсреди детей - носителей в возрастной категории  от 1,5 г до 3 лет составила 35,1 %; в возрасте 3 - 5 лет - 23,4%; среди детей 5-7 лет - 19,6% и среди детей старше 7 лет - 21,9%.

Выявлено доминирование вакцинных серотипов 14, 19F, 23F, входящих в состав современных пневмококковых вакцин ("Превенар", Пневмовакс-23) -55,8%. В 19% случаев выявлена циркуляция среди детской популяции носительства не вакцинных штаммов, не входящих в состав вышеуказанных вакцин. Среди выделенных  изолятов нетипируемых штаммов выявлено 5,8%.

IgA-протеиназная активность была выявлена в клеточных лизатах 45 (86,5%) штаммов S. pneumoniae, выделенных у бактерионосителей. Клеточные лизаты штаммов S. pneumoniae, которые не показали протеолитические свойства, были отнесены к серотипам 12F, Sg18. Таким образом, перспективны исследования по разработке альтернативных вакцин, содержащих иммуногенные протеины, адгезины или другие факторы вирулентности, общие для капсулированных и нетипируемых (инкапсулированных) штаммов пневмококков. Все вышеизложенное диктует необходимость микробиологического мониторинга за бактерионосительством S. pneumoniae и поиска новых диагностических подходов для этиологической  расшифровки S. pneumoniae-ассоциированных заболеваний

МОЛЕКУЛЯРНЫЕ ОСНОВЫ ЭПИДЕМИОЛОГИИ, ДИАГНОСТИКИ, ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ АКТУАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ

2
Аннотация

Менингококковая, пневмококковая, стрептококковая группы А и гемофильная инфекции имеют разнообразные формы проявления – от бактерионосительства до генерализованных, угрожающих жизни форм. Вместе с тем взаимосвязь между носительством возбудителей этих инфекций и развитием заболевания все еще остается не полностью изученной. Для диагностики носительства менингококка, пневмококка, гемофильной палочки и стрептококка группы А с помощью ПЦР были исследованы биоптаты аденоидных вегетаций у 112 детей, которым в плановом порядке была проведена аденотомия. ДНК хотя бы одного из четырех детектируемых видов микроорганизмов обнаружена в 104 образцах (92,86%), из них: ДНК менингококка – в одном образце (0,9%), пневмококка – в 98 (87,5%), гемофильной палочки – в 19 (16,96%), стрептококка группы А – в 42 (37,5%) образцах. Не найдено ни одного из указанных видов микроорганизмов у 8 детей (7,14%). S. pneumoniae, в отсутствие других исследуемых видов бактерий был обнаружен в 54 образцах (48,2%), S. pyogenes – в 5 образцах (4,5%). Одновременно два вида искомых бактерий встречались в следующих сочетаниях: N. meningitidis и S. pneumoniae в 1 образце (0,9%), S. pneumoniae и H. influenzae в 7 образцах (6,3%); H. influenzae и S. pyogenes в 1 образце (0,9%); S. pneumoniae и S. pyogenes в 25 образцах (22,3%). Три вида бактерий S. pneumoniae, H. influenzae и S. pyogenes были одновременно выявлены у 11 пациентов (9,8%). Проведенное серогруппирование менингококка не подтвердило его принадлежности ни к одной из 6 наиболее распространенных в мире серогрупп, ответственных за эпидемические подъемы заболеваемости (А, В, С, W-135, X, Y). Прослеживается явная тенденция преобладания ДНК  S. pyogenes в биоптатах аденоидов у детей с диагнозом «Гипертрофия аденоидов и миндалин», по сравнению с диагнозом «Гипертрофия аденоидов». Обращает на себя внимание высокий удельный вес носительства пневмококка (87,5%), установленный в нашем исследовании. Носители, являющиеся резервуаром вирулентных пневмококков, представляют опасность как для самих себя, так и для окружающих. Таким образом, ПЦР-исследование биоптатов аденоидов является перспективным направлением дальнейших исследований, так как возможность выявления некультивируемых форм микроорганизмов в клинических образцах будет способствовать более точной оценке уровня носительства менингококков, пневмококков, гемофильной палочки и стрептококков группы А.



Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2220-7619 (Print)
ISSN 2313-7398 (Online)