Preview

Инфекция и иммунитет

Расширенный поиск
Online First
https://doi.org/10.15789/2220-7619-2019-0

ОБЗОРЫ

336
Аннотация

Обзор посвящен оценке эффективности применения препаратов интерферона и индукторов его биосинтеза для лечения лейкоза кошек, а также – разработке методических подходов для повышения эффективности методов интерферонотерапии. Лейкоз кошачьих - это системное злокачественное заболевание крови вирусной природы, заканчивающееся летальным исходом в сроки примерно до 3 лет после инфицирования. Этиологический агентом, вызывающий это заболевание, является одноцепочечным  РНК-содержащим ретровирусом Feline leukemia virus (FeLV). FelV широко распространен в популяциях домашних кошек всех стран, а также нередко выявляется и в крови диких кошек, в том числе - представителей редких и исчезающих видов семейства кошачьих.  В некоторых регионах распространенность FeLV может быть значительной не только среди домашних кошек, но и среди диких. В настоящее время существует несколько коммерчески доступных вакцинных препаратов для защиты кошек от FeLV-инфекции (например, инактивированные цельновирионные вакцины типа Nobivac feline 2-FeLV с адъювантом, двух-адъвантная субъединичая вакцина на основе белковых антигенов возбудителя и безадъювантная векторная ДНК вакцина. Однако ни одна из существующих вакцин не обеспечивает надежную защиту от этого вируса. Кроме того, вакцинация кошек против FeLV нередко сопряжена с развитием разнообразных осложнений воспалительного, аллергического характера, шоковых реакций и даже таких крайне серьезных побочных эффектов как развитие вакцин-ассоциированной саркомы в месте инъекции, что некоторые авторы связывают с применением адъювантов типа солей алюминия и др.

В данном обзоре дается краткая характеристика вируса FeLV, элементы патогенеза ассоциированных с FeLV-инфекцией патологических состояний, а также - современных технологий профилактики и лечения лейкоза кошек. Дается оценка истории и современного состояния интерферонотерапии FeLV-инфекции и связанных с ней неопластических процессов у домашних кошек и некоторых диких видов семейства кошачьих. Рассматриваются возможные мероприятия, направленные на повышение эффективности интерфероно-терапии лейкоза кошек на основе применения новых препаратов рекомбинантного интерферона различных типов и подтипов, а также – индукторов интерферона. В заключении отмечается, что еще одним интересным и потенциально очень перспективным выбором при определении стратегии биотерапии, связанной с модуляцией системы IFN  в организме животных, пораженных FeLV-инфекцией, является применение индукторов образования эндогенного IFN.

219
Аннотация

Резюме. Псориаз – системное иммуноассоциированное заболевание полифакториальной природы. Предполагается, что одним из факторов, способствующих его развитию, является дисбиоз толстого кишечника. В обзоре приведены сведения о роли дисбиоза толстого кишечника в индукции и прогрессировании псориатического воспаления на примере трёх бактериальных видов-акторов: Akkermansia muciniphila, Faecalibacterium prausnitzii и Escherichia coli. Указанные бактериальные виды, с одной стороны, являются индикаторами состояния бактериального сообщества при дисбиозе толстого кишечника. С другой стороны, они функционально связаны с запуском цепочки событий, заключающейся в индукции дефекта кишечного барьера, переходящего в хроническое воспаление слизистой оболочки кишечника и системное воспаление. Этот сценарий приводит к изменению реактивности клеток врождённого и адаптивного иммунитета на системном уровне, дефекту функции клеток регуляторного звена иммунитета, что на фоне феномена молекулярной мимикрии бактерий – персистенции Streptococcus pyogenes с антигенами, гомологичными кожным, ведёт к расширению популяции аутореактивных к коже Т-клеток, индукции и прогрессированию псориатического воспаления. Псориатический процесс рассматривается с точки зрения коморбидности с воспалительными заболеваниями кишечника. Поскольку дисбиотические изменения при псориазе и воспалительных заболеваниях кишечника, таких как болезнь Крона, имеют схожие моменты, есть вероятность, что при этих заболеваниях реализуется аналогичная патогенетическая цепь, ведущая от дисбиотических изменений микробиоты толстого кишечника к дефекту кишечного барьера, хроническому системному воспалению и дефекту противовоспалительного звена иммунитета. Поэтому данные о патогенетических путях заболеваний, коморбидных с псориазом, способны раскрыть неизвестные элементы патогенетической цепи последнего. Псориаз, как генетически опосредованное заболевание, на данный момент, ассоциировано с однонуклеотидными полиморфизмами более чем четырёхсот генов. Рассмотрено участие однонуклеотидных полиморфизмов кандидатных генов, включённых в патогенетическую цепь псориаза на уровне процессинга и презентации антигена, миграции иммунных клеток, рецепции и производства провоспалительных цитокинов. C болезнью Крона ассоциированы однонуклеотидные полиморфизмы генов, кодирующих белки кишечного барьера и формирующих его функциональную неполноценность. В контексте коморбидности и сходства микробиота-ассоциированной патогенетической цепи псориаза и воспалительных заболеваний кишечника допустимо предположить, что данные полиморфизмы, определяющие генетический дефект кишечного барьера, реализуются дисбиотическими изменениями бактериального сообщества толстого кишечника и способствуют прогрессированию не только воспалительных заболеваний кишечника, но и псориаза.

829
Аннотация

     

Респираторно-синцитиальный вирус (РСВ) инфицирует детей, пожилых людей и больных с иммунодефицитами. В 2016 году РСВ был переименован в Orthopneumovirus в связи с латинизацией таксономии вирусов, а также был включен в семейство Pneumoviridae. Однако в данном обзоре мы будем применять старое, более известное название вируса - РСВ. РСВ-инфекция не индуцирует развитие пожизненного стерилизующего иммунитета. Разные типы клеток иммунной системы, такие как дендритные клетки, макрофаги, Т-клетки, B-клетки и эозинофилы принимают участие в противовирусном ответе при РСВ-инфекции. Некоторые из них играют важную роль в элиминации вируса, тогда как другие могут провоцировать повреждение тканей. Взаимодействие между этими клетками происходит посредством индукции различных цитокинов и хемокинов часть из которых индуцируются на ранних стадиях заболевания, тогда как другие на более поздних. Кроме того, они могут оказывать влияние на течение как первичной, так и повторной РСВ-инфекции. Пролонгированная или персистирующая РСВ-инфекция наблюдается у детей с Т-клеточными иммунодефицитами, что свидетельствует от том, что Т-клетки являются необходимым компонентом для разрешения острой фазы инфекции и для формирования вирус-специфической иммунологической памяти.  РСВ-специфичные антитела присутствуют практически у всех взрослых и детей, однако их наличие не защищает от повторного заражения вирусом.  Некоторые исследования указывают на то, что именно уровень РСВ-специфичных мукозальных, а не сывороточных антител коррелирует с более эффективной защитой от РСВ-инфекции. В отношении РСВ разрабатываются следующие виды вакцин: живые аттенуированные, субъединичные, вакцины на основе инактивированного вируса, вакцины на основе вирусных частиц, вакцины на основе нуклеиновых кислот, а также моноклональные антитела. При разработке вакцин следует принимать во внимание особенности иммунного ответа при РСВ-инфекции, а также учитывать возраст вакцинируемых. Так, для детей, во избежание вакцин-ассоциированного усиления инфекции, оправдано применение живых аттенуированных вакцин, тогда как для лиц среднего возраста и пожилых людей возможно применение субъединичных вакцин. Однако в настоящее время все еще нет лицензированных вакцин в отношении РСВ-инфекции.

В рамках данного обзора мы подробно рассмотрим особенности взаимодействия вируса с разными звеньями иммунной системы, современное представление о вакцинопрофилактике РСВ-инфекции.

                                                                                                                                                         

                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                        

                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                         

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

535
Аннотация

После выхода из костного мозга (КМ) в кровообращение зрелые нейтрофильные гранулоциты в отсутствие воспаления претерпевают ряд фенотипических и физиологических изменений, в комплексе названных «старением», в процессе которого они конститутивно получают праймирующие сигналы от комменсальной микробиоты и приобретают бόльшую функциональную готовность в случае активации при травматизации тканей или инвазии патогенов. Физиологическое старение нейтрофилов в крови и последующее их возвращение в КМ генерирует сигналы, модулирующие размер и функции гемопоэтической ниши у мышей и, возможно, у человека. Циркадная физиологическая инфильтрация КМ нейтрофилами содействует поддержанию базового уровня внекостномозговых гемопоэтических клеток-предшественников, обладающих функциями регенерации и иммунного наблюдения. Помимо КМ, нейтрофилы активно проникают и в другие здоровые ткани в количестве и с динамикой, специфичной для каждой ткани, вероятно, оказывая действие на их базальную физиологию. На примере легочной ткани мышей показано, что нейтрофилы могут «управлять» работой ряда генов, регулирующих клеточный рост, миграцию, пролиферацию, дифференцировку клеток, а также канцерогенез. Внутрисосудистые нейтрофилы легких являются «стратегическим запасом», который может при необходимости высвобождаться в кровообращение, либо реагировать на повреждения, легочную или генерализованную инфекции. Нейтрофильные гранулоциты принимают участие в деструкции эндометриальных тканей во время фазы десквамации, в последующей их репарации и физиологическом ангиогенезе в пролиферативной фазе менструального цикла; участвуют в процессе разрыва стенки преовуляторного фолликула яичников и выхода ооцита; способствуют деградации и рассасыванию желтого тела в случае ненаступления беременности; играют важную физиологическую роль в ремоделировании сосудов беременной матки и формировании материнской иммунной толерантности по отношению к полуаллогенному плоду. При инфекции и/или повреждении слизистой оболочки кишечника активно мигрирующие на поверхность кишечного эпителия нейтрофилы усиливают пролиферацию эпителиоцитов; ставят на них «гипоксическую подпись», запуская транскрипцию когорты генов, кодирующих синтез муцинов, муцин-модифицирующих пептидов, антимикробных белков, β-дефензинов, что в конечном итоге стимулирует реституцию эпителия и восстановление его барьерной функции. Рекрутированные в ротовую полость нейтрофилы регулируют количественный и качественный состав микробных сообществ оральных биоплёнок человека, отвечают за обеспечение здоровья пародонтальных структур. На примере патогенеза пародонтита при дефиците адгезии лейкоцитов (LAD-1) показано, что развитие заболеваний пародонта при ряде врождённых нарушений количества и функций нейтрофильных гранулоцитов может быть связано не только с дефектом их защитно-эффекторной активности, но и с нарушением иммунорегуляторной функции тканевых нейтрофилов. Являясь основным участником и регулятором заживления кожных ран на ранней стадии, стадии воспаления, нейтрофилы не только уничтожают возможных патогенов, но также участвуют в очищении раны от клеточного дебриса и эритроцитов, генерируют цитокины, ферменты и ростовые факторы, влияющие на дальнейшие этапы процесса репарации. У пациентов с нейтропенией или с дефектами миграции и функционирования нейтрофилов, например, при хронической гранулематозной болезни, увеличивается риск инфицирования и ухудшается процесс регенерации. И апоптоз, и нетоз, являясь механизмами гибели нейтрофилов, вносят огромный вклад в процесс заживления ран. Однако дисрегуляция и нарушение баланса как апоптоза, так и нетоза могут приводить к негативным последствиям с формированием хронических длительно незаживающих ран.

197
Аннотация

Возбудитель чумы, Yersinia pestis, особо опасный бактериальный патоген и потенциальный агент биотерроризма. Преобладающими клиническими формами инфекции являются бубонная и легочная чума, отличающиеся по пути инфицирования. При отсутствии лечения смертность при бубонной форме чумы составляет 40-60 %, в то время как легочная чума без лечения всегда летальна. Развитие инфекционного процесса в организме восприимчивого хозяина обеспечивается наличием у чумного микроба комплекса факторов патогенности различной функциональной направленности, экспрессирующихся в зависимости от стадии инфекционного процесса. Нокаутные мутации генов, кодирующих эти факторы, могут не влиять на вирулентность микроба или приводить к его аттенуации. Поиск новых факторов патогенности Y. pestis и разработка на их основе высокоэффективных субъединичных и живых чумных вакцин, индуцирующих развитие выраженных клеточных и гуморальных иммунных реакций, и/или оценка потенциального использования этих факторов в качестве молекулярных мишеней для химиотерапии чумы остаются по-прежнему актуальными, так как обе лицензированные на настоящий день чумные вакцины не соответствуют требованиям ВОЗ, а на Мадагаскаре выделены штаммы чумного микроба, устойчивые ко всем лекарственным препаратам, рекомендованным для антибактериальной терапии чумы. В настоящей статье обобщены сведения относительно вклада известных и вновь открытых факторов патогенности в вирулентность штаммов Y. pestis и протективную активность в отношении чумы. Описано также влияние утраты генов регуляторных белков и мутаций в генах различных транспортных систем Y. pestis на аттенуацию вирулентных штаммов. Проведена оценка перспективности включения охарактеризованных антигенов в состав прототипов субъединичных вакцин и тех или иных полученных мутантов в состав прототипов живых аттенуированных вакцин. Суммированы предварительные результаты попыток лечения чумы с помощью ингибиторов факторов патогенности. Использование антибиотиков постулируется комитетом экспертов Всемирной организации здравоохранения по чуме как "золотой стандарт" лечения чумы. Однако появление устойчивых к антибиотикам штаммов Y. pestis привело к необходимости поиска альтернативных способов терапии чумы. Несколько исследовательских групп работают над поиском альтернатив, таких как лечение ингибиторами факторов патогенности. В обзоре обобщены предварительные результаты попыток лечения чумы ингибиторами фактора патогенности. Препараты, нацеленные на ключевые факторы патогенности, предоставляют новые перспективные возможности в борьбе с устойчивыми к антибиотикам бактериями.

198
Аннотация
Энтеровирусы представляют собой разнообразную группу безоболочечных одноцепочечных положительных РНК-вирусов, принадлежащих к роду энтеровирусов семейства Picornaviridae. Они являются наиболее распространенными вирусами в мире и отличаются высокой устойчивостью к факторам внешней среды. Энтеровирусы вызывают сезонные инфекции, а также являются возбудителями энцефалита, миокардита, полиомиелита, острой сердечной недостаточности и сепсиса. Генетическая пластичность энтеровирусов способствует возникновению эпидемий и спорадических вспышек (например, вспышки инфекции энтеровируса D68 или энтеровируса 71). Вирусы Коксаки типа B, принадлежащие к виду энтеровирус B, вызывают преимущественно легкие заболевания верхних дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта, но инфекция вируса Коксаки B3 также ассоциирована с развитием миокардита, который, в свою очередь, может привести к сердечной недостаточности. Патогенез миокардита, индуцированного вирусом Коксаки B3, хорошо изучен, он опосредован как прямым повреждением под действием протеаз вируса, так и косвенным повреждением вследствие иммунного ответа организма. Несмотря на успех в области вакцинопрофилактики ряда энтеровирусных инфекций, благодаря которому некоторые из них были взяты под контроль, сохраняется потребность в противовирусных препаратах, активных в отношении энтеровирусов. На сегодняшний день отсутствуют зарегистрированные противовирусные препараты прямого действия для терапии большинства энтеровирусных инфекций, в частности, инфекции вируса Коксаки B3. Также не проводятся клинические испытания в области лечения или профилактики инфекции вируса Коксаки B3. Доступные стратегии лечения направлены на стабилизацию состояния пациента и снятию дискомфорта. Вероятно, относительно небольшой рынок препаратов против энтеровирусных инфекций является непривлекательным для фармацевтических компаний. Жизненный цикл вируса Коксаки B3 был тщательно изучен, и известны потенциальные привлекательные мишени для разработки противовирусных препаратов. Целью настоящей работы является обзор текущего состояния области разработки противовирусных препаратов против инфекции вируса Коксаки B3, особое внимание уделено разработке противовирусных препаратов прямого действия. Также упомянуты ингибиторы, нацеленные на клеточные факторы развития инфекции (включая соединения экстрактов лекарственных растений). Подробно рассмотрены следующие категории прямых ингибиторов вируса Коксаки B3: капсид-связывающие агенты (плеконарил и его производные), ингибиторы протеазы 3C (рупинтривир и его аналоги), ингибиторы репликации (как аналоги нуклеозидов, так и ненуклеозидные ингибиторы). Кроме того, в обзор включены результаты исследований перепрофилирования зарегистрированных лекарственных препаратов (амилорида, бензеразида, дибукаина и флуоксетина).
154
Аннотация

Аннотация

Несмотря на длительную историю изучения генетических факторов подверженности туберкулезной инфекции – и на уровне ассоциативных, и на уровне экспрессионных исследований, остается острой проблема выявления и мониторинга групп риска. Поиск дифференциально экспрессирующихся генов в группах, различающихся по статусу заболевания (не инфицированные, латентная туберкулезная инфекция, начальная до-симптоматическая стадия, активный туберкулез, выздоровевшие после туберкулеза, не-туберкулезная инфекция) привел к получению большого количества данных не перекрывающихся при изучении разных групп сравнения, в различных этнических группах, при изучении цельной крови и клеточных моделей. Объединение массивов данных и последующий их ре-анализ помогает верифицировать и дополнять результаты; однако, остается большое количество вопросов, касающихся понимания функционирования организма человека в условиях воздействия M. tuberculosis. В обзоре рассматриваются накопленные к настоящему времени результаты экспрессионных исследований, направленных на изучение подверженности туберкулезу.

Annotation

Despite a long history of research of genetic factors of susceptibility to tuberculosis infection, including associative and expression studies, an identification and monitoring of risk groups remains a challenge. The search of differentially expressed genes in groups with different status of the disease (non-infected, latent tuberculosis infection, pre-symptomatic state, active tuberculosis, recovery from tuberculosis, non-tuberculosis infection) led to identification of a large number of data which is not overlapped in different compared groups, different ethnic groups, in the studies of the whole blood and cellular models. Merging this wealth of data followed by its re-analysis helps verify and update results. However, there still is a large number of questions concerning our understanding of the functioning of the human organism under influence by M. tuberculosis. The review considers up to date results of expression studies of susceptibility to tuberculosis.

319
Аннотация

Применение вакцины от лихорадки Денге (CYD-TDV) в Азии в настоящее время остается достаточно ограниченным и противоречивым из-за вопросов безопасности, пока остающихся не оцененных должным образом. Поэтому, целью нашего обзора было проведение оценки безопасности вакцины CYD-TDV на основее анализа данных по эффективности ее применения в Азии. Поиск релевантных ключевых слов в электронных базах данных обнаружил 309 научных статей, среди которых в обзор вошли лишь четыре публикации. Исходная распространённость серотипов среди участников исследований составляла 50-80%. В отношении безопасности вакцины CYD-TDV показано, что реакция в месте введения (боль, отек, эритема) отмечены с относительным риском (RR) 95% ДИ (0.46-1.76), а системные реакции (лихорадка, головная боль, миалгия) также при RR 95% ДИ (0.89-1.81). Из четырех работ, включенных в обзор, три содержат данные о ряде тяжелых неблагополучных эффектах при RR 95% ДИ (0.92-2.11). В отношении иммуноленности показана что для DENV-2 отмечено высокое среднее геометрическое значение титра в 67.8 (95%ДИ 64.8-70.8), DENV-3 – в 73.1 (95% ДИ 69.9-76.3), а для DENV- 4 – в 65 (95% ДИ 62-67.9), когда при обнаружении даже меньших величин оэто согласуется в другими опубликованными работами по иммуногенности вакцины CYD-TDV в отношении серотипов DENV. В нашем обзоре показано, что вакцина CYD-TDV может рассматриваться для применения в Азии, но с учетом ряда условий и следования настоящим рекомендациям по безопасности.

295
Аннотация
В обзоре представлены данные о распространении в мире туляремии – природноочаговой, особо опасной инфекции человека и животных, которая вызывается бактерией Francisella tularensis. Штаммы наиболее вирулентного для человека и животных подвида F. tularensis subsp. tularensis циркулируют только в Северной Америке. Гораздо шире распространены в мире штаммы менее вирулентного для человека и животных  подвида F. tularensis subsp. holarctica – в Европе, Азии, Японии, Северной Америке, в Австралии и Тасмании. Изоляты данного подвида выделяются на территориях различных климатических зон – от субарктических до субтропических, биоценозы природных очагов самые разные – от водных до пустынных, со своими хозяевами и переносчиками. Широкое распространение в мире штаммов подвида F. tularensis subsp. holarctica, в сравнении с другими подвидами возбудителя туляремии, связано со способностью существовать в водной среде, что значительно расширяет ареалы  распространения подвида и показывает его более высокую экологическую пластичность и стабильность. Заражение человека возбудителем инфекции происходит в результате укусов инфицированными кровососущими членистоногими (комарами, слепнями, клещами), употребления инфицированной грызунами пищи и воды, при вдыхании воздушно-пылевого аэрозоля, контаминированного возбудителем туляремии от больных грызунов, а также после прямого контакта с инфицированными животными (охота, уход за домашними животными, разделка туш). Представлены отличия путей передачи возбудителя в разных странах. Наибольшее количество случаев заболевания людей туляремией наблюдается в Северной Америке –  в США, в Европе – в  Швеции и   Финляндии, а в Азии – в Турции. На территории Российской Федерации и Казахстана произошло значительное снижение заболеваемости в результате проводимой с середины прошлого века иммунопрофилактики населения, проживающего на энзоотичных по туляремии территориях, а также лиц, подвергающихся риску заражения этой инфекцией. В последнее время в 31 стране Европы, а также в Турции и  Японии проводится обязательная регистрация случаев заболевания туляремией в связи с возможностью использования возбудителя в качестве агента биотерроризма. Показано географическое распределение основных филогенетических популяций и субпопуляций штаммов туляремийного микроба. Самый высокий уровень разнообразия штаммов F. tularensis subsp. holarctica в одной стране зарегистрирован на территории Китая. Отмечены главные особенности экологии и эпидемиологии возбудителя туляремии.
141
Аннотация

Первые сообщения о ВИЧ (вирусе иммунодефицита человека) появились в 1980-х годах. К 2017 году более 37 миллионов человек жили с ВИЧ. Вирус папилломы человека (ВПЧ) распространен повсеместно и по некоторым оценкам, около 1% сексуально активного населения имеет генитальные бородавки. Инфекция, вызванная вирусом папилломы человека, часто сопровождает клиническое течение ВИЧ и может проявляться в полном спектре клинико-патологических форм, от обычных бородавок до злокачественных неоплазий. В связи с широким применением антиретровирусной терапии число пациентов с сочетанной инфекцией (ВИЧ + ВПЧ) неуклонно растет. Здесь мы рассмотрим текущие клинические варианты лечения проявлений ВПЧ. Антиретровирусная терапия в высоких дозах не препятствует лечению ВПЧ, а в некоторых случаях даже может повысить ее эффективность. Местное введение имихимода, модификатора иммунного ответа, является эффективным консервативным лечением у пациентов с ВИЧ, инфицированных ВПЧ. Иммуномодулирующая терапия имихимодом может служить эффективной альтернативой агрессивным химическим и механическим терапевтическим процедурам. Максимальная эффективность с самыми низкими показателями замещения может ожидаться от комбинированного использования методов механической абляции с последующей последующим местным применением имихимода в виде крема на зону абляции после заживления раны. Наилучший терапевтический результат ожидается у ВИЧ-позитивных пациентов, получающих антиретровирусное лечение в высоких дозах. Обсуждаются преимущества Вартоцида, модифицированного российского эквивалента дженерика имихимода.

165
Аннотация

Молекулярная филогенетика, и, в частности, статистическая филогенетика широко применяется для решения фундаментальных и прикладных задач вирусологии. Байесовские, или статистические, филогенетические методы, вошедшие в практику 10-15 лет назад, значительно расширили круг вопросов, на которые можно получить ответы, исходя из анализа нуклеотидных и аминокислотных последовательностей. Возможность использования разных моделей эволюции позволяет восстанавливать хронологию, географию и динамику распространения инфекции. Например, при анализе последовательностей ВИЧ глобально распространённой группы M Байесовскими методами филогеографического анализа было показано, что последний общий предок этих вирусов с вероятностью 99% возник в окрестностях города Киншаса (Демократическая Республика Конго) в начале 1920-х годов. В другой работе показали, что серотип вируса гриппа H9N2 скорее всего перешел к человеку от диких уток в Гонконге в конце 60-х годов ХХ века. Кроме того, при помощи Байесовского анализа можно оценить эффект определенных событий или принимаемых мер на развитие эпидемического процесса. Так, например, ретроспективно было показано, что число заражений вирусом гепатита С в Египте увеличилось на несколько порядков в середине ХХ века. Резкий рост новых случаев связывают с началом лечения шистосомоза. Лекарство вводили при помощи уколов, нестерильные шприцы применяли многократно. Набор методов Байесовского анализа был использован в десятках тысяч публикаций, описывающих разные аспекты возникновения и распространения инфекционных заболеваний человека и животных. Сложность Байесовских филогенетических методов определяет строгие требования к анализируемым данным. Корректность результатов филогенетического анализа зависит от ряда факторов. Например, необходим выбор эволюционной модели, наиболее адекватно описывающей исследуемые объекты. Обязательным этапом при формулировании результатов является обоснование выбранной модели. Для вирусов характерно заимствование генетических элементов из других организмов, поэтому геномы даже близкородственных вирусов могут иметь негомологичные участки, непригодные для филогенетического анализа. Другим аспектом является создание репрезентативной выборки исследуемых объектов. Зачастую в публикациях не указываются все этапы выполнения анализа, из-за чего полученные результаты могут трактоваться неоднозначно. Корректное использование методов статистической филогенетики в вирусологии возможно только при понимании принципов их работы, способов подготовки данных для анализа, критериев выбора эволюционных моделей для исследования.

92
Аннотация

Во второй части обзора приведены новые сведения о факторах патогенеза судорожного синдрома у детей, в том числе о значительной роли вирусной инфекции в развитии судорог и эпилепсии (ЭПЛ) у детей, о чем свидетельствуют данные клинических и экспериментальных исследований. Различные формы судорожного синдрома, ассоциированного с вирусной инфекцией, включают фебрильные судороги и фебрильный эпилептический статус, острые симптоматические судороги при энцефалитах и постэнцефалитическую эпилепсию. Причинным фактором фебрильных судорог и фебрильного эпилептического статуса чаще всего служит герпес вирус человека 6-го типа, который выделен и при височной эпилепсии. Фебрильные судороги и, особенно, фебрильный эпилептический статус ассоциированы с развитием в дальнейшем эпилепсии. Особого внимания заслуживает эпилептический синдром, связанный с фебрильными инфекциями, (FIRES), поражающий чаще детей школьного возраста и отличающийся крайне тяжелым течением и неблагоприятным исходом. Судорожный синдром ассоциирован с системным воспалением и гиперпродукцией провоспалительных цитокинов, повышающих проницаемость гематоэнцефалического барьера и функциональную активность резидентных клеток мозга, которые участвуют в генерации судорог и поддерживают эпилептогенез. С учетом ключевой роли воспаления в генезе судорожного синдрома цитокины и хемокины в последние десятилетия широко изучаются в качестве возможных прогностических критериев эпилептогенеза. Нейроспецифические белки исследуются как маркеры поражения клеток мозга при разных воспалительных заболеваниях центральной нервной системы. В первой части обзора были изложены современные сведения о системном и локальном ответе цитокинов/хемокинов при вирусных энцефалитах. Здесь представлены клинические исследования в основном за последние 5-7 лет с определением цитокинов/хемокинов и нейроспецифических белков у детей с разными формами судорожного синдрома, в том числе эпилепсией. Обсуждаются ассоциации уровня биомаркеров с клиническими параметрами болезни и возможность их использования в диагностике и прогнозе ее дальнейшего течения.

1
Аннотация

Рассмотрены вопросы точности (чувствительности и специфичности) ПЦР-анализа в зависимости от особенностей выполнения преаналитического и аналитического этапов лабораторной диагностики COVID-19, а также сравнение результатов ПЦР и компьютерной томографии легких.

В настоящее время в основе диагностики новой коронавирусной инфекции COVID-19 молекулярно-генетический тест – полимеразная цепная реакция (ПЦР). На 1 ноября 2020 г. методом ПЦР в мире проведено более 750 млн. исследований. Накопленный к настоящему времени опыт позволяет оценить диагностическую чувствительность метода как 82-91%, специфичность – 99-100%. Имеются данные о повышении чувствительности ПЦР при повторном исследовании образцов из верхних дыхательных путей, которая составила - 82,2 % при первичном анализе и 90,6 % после двух последовательных тестов.

На точность анализа оказывает влияние целый ряд факторов. Причинами ложноотрицательных результатов молекулярных тестов могут быть недостаточное количество генетического материала вируса в пробе, сроки и погрешности при отборе биологических образцов.

Установлено, что РНК вируса SARS-CoV-2 с максимальной диагностической чувствительностью выявляется в верхних дыхательных путях за 1–3 дня до появления симптомов и далее в течение 5-6 дней после начала болезни. В этот период наблюдается наивысший риск передачи возбудителя инфекции. На второй неделе болезни отмечается увеличение частоты детекции вирусной РНК в бронхо-легочном материале. Продолжительность детекции маркеров вируса (в том числе при отсутствии жизнеспособных форм) коррелирует с тяжестью заболевания и может достигать 1-2 мес.

 Другая реальная проблема ПЦР-анализа – возможность ложноположительных ответов. Ее решение требует высокого уровня организации лабораторных исследований, особенно при их значительных объемах. При этом важно, что положительные ответы ПЦР означают присутствие в образце только фрагментов его РНК, а не жизнеспособного вируса.

Отмечено, что ПЦР-анализ имеет большую специфичность по сравнению с КТ, которая не дает возможности отличить пневмонию, вызванную SARS-CoV-2 от пневмоний другой этиологии (до 25% ложноположительных ответов). Но диагностическая чувствительность КТ составляет 97,2%, что превышает значение этого показателя для ПЦР на 10-15%. Сделано заключение, что только комплексный подход с использованием ПЦР и КТ, с учетом особенностей этих методов и факторов, влияющих на точность получаемых данных, позволяет правильно интерпретировать результаты диагностики.

1
Аннотация

В самом начале развития пандемии COVID-19, когда социальная уязвимость перед лицом глобальной инфекционной угрозы стала очевидна, нами была предпринята попытка провести первое целевое информирование по ключевому цивилизационному вопросу, затрагивающему роль этики в условиях чрезвычайных ситуаций эпидемического характера. Было осуществлено детальное изучение гуманитарного наследия управления пандемиями прошлого и сделан обзор действующих международных документов, посвященных вопросам нравственной составляющей поддержания общественного здравоохранения в период пандемий. В ходе сопоставления алгоритма нормативных и этических характеристик был проведен анализ соответствия правового регламента Российской Федерации мировому этическому стандарту. В настоящий период, более полу - года спустя от начала распространения глобальной эпидемической волны COVID-19, настало время практически оценить действенность идеологии этической приверженности управления и контроля эпидемическими катастрофами и объективно осмыслить возникшие медицинские и социальные конфликты, и, прежде всего, оценить их уровень, причины, последствия и возможность преодоления. Отдельно необходимо подчеркнуть, что данная работа не претендует стать так называемым «извлеченным моральным уроком COVID-19», а в действительности представляет собой реальную картину того, каким образом был учтен/или не учтен многовековой, исторический опыт работы медицинских, социальных и государственных служб в период пандемий различных инфекционных заболеваний и как была усвоена и применена уникальная истина этического наполнения управленческих решений и действий. Особое значение также имеет факт возможности публикации данной работы, как продолжения нашей исследовательской темы по биоэтике пандемий, на страницах столь авторитетного, профильного журнала, что в полной мере позволяет сохранить целостность представлений о гуманитарной сущности противоэпидемических мероприятий, начиная от момента ведения конкретного пациента с инфекционной патологией и вплоть до масштабных мероприятий по ликвидации управляемых инфекций. Комплексный и динамичный взгляд на необходимость поиска путей и характер преодоления этических конфликтов в ходе продолжающейся пандемии новой короновирусной инфекции призван определить этический подход долгосрочных рекомендаций в сфере защиты общественного здоровья и обеспечить стабильность социального доверия в будущем.

 

SECOND ETHICAL COMMENTS TOWARDS COVID-19 (more then, half a year latet the beginning of development COVID-19, when social vulnerability in the face of the global infectious threat became obvious, we presented target information on a key civilizational issue - the role of ethics in epidemic emergencies. The compliance of RF legislation and the world ethical standards analyzed on based on the study of the humanitarian heritage of pandemic management and a review of existing international documents. Today, more than half a year later, it is time to practically evaluate the effectiveness of the ideology of ethical commitment and objectively comprehend the conflicts that have arisen, their causes and consequences. It should be emphasized that this work is not a so-called “moral lesson learned from COVID-19,” but represents a real picture how the centuries-old experience of former epidemics and pandemics was taken into account and the unique truth of the ethical content of management decisions and actions was accepted. It is particular important to have the possibility for presentation this article as a continuation of our research topic on the bioethics of pandemics, on the pages of such an authoritative, specialized journal, which fully allows us to preserve the integrity of ideas about the humanitarian essence of anti-epidemic measures. This humanitarian parallel starts from the moment of managing a particular patient with infectious pathology until large-scale measures for eradication vaccine-preventable diseases. A comprehensive and dynamic look at the need to find ways and the nature of overcoming ethical conflicts during the ongoing pandemic of the new coronavirus infection could determine the ethical approach of long-term recommendations in the field of public health protection and ensure the stability of social trust in the future.

 

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

161
Аннотация

Введение. Липополисахариды грамотрицательных бактерий (ЛПС) более известны как бактериальные  эндотоксины. Однако в специальной литературе всё больше данных целом ряде физиологических эффектов ЛПС, наблюдаемых и в норме. В частности показана иммуномодулирующая активность ЛПС некоторых видов бактерий.

Цель исследования - характеристика физиологических эффектов липополисахаридов Ensifer meliloti при индуцированном иммунодефиците у крыс в эксперименте.

Материалы и методы. На 60 беспородных крысах-самцах, у которых индуцировали ммунодефицитное состояние при внутрибрюшинном введении цитостатика – циклофосфамида, исследована биологическая активность фракций ЛПС E. meliloti. Исследуемые фракции ЛПС E. meliloti вводили внутрибрюшинно через 24 часа после инъекции ЦФ в течении 21 дня. На 22-е сутки эксперимента лабораторные животные подвергались эвтаназии и аутопсии с последующим морфометрическим исследованием внутренних органов. В дальнейшем парафиновые срезы паренхиматозных органов окрашивались гематоксилин-эозином и исследовались гистологически посредством световой микроскопии

Результаты. Установлено, что при введении циклофосфамида лабораторным животным по окончании периода наблюдения имело место незначительное снижение массы печени и почек, вес сердца и селезенки оставался неизменным (в сравнении с интактными животными). Однако указанные изменения были статистически не значимы. Статистически достоверно у иммунодефицитных крыс в сравнении с контролем увеличивался лишь вес легких. При внутрибрюшинном введении фракций ЛПС на фоне вторичного иммунодефицита изменяются весовые характеристики наиболее интенсивно кровоснабжаемых органов (печень и почки), что указывает на системный характер их эффектов. Для активации иммунного ответа в селезенке отмечено характерное увеличение количества фолликулов с крупными герминативными центрами, а также вторичных фолликулов стромы органа с образованием лимфоидных муфт. В печени - лимфоидная инфильтрация в портальных трактах и восстановление до нормы сосудистого рисунка. В легких при введении ЛПС и Ликопида - выраженная гиперплазия лимфоидной ткани с крупными герминативными центрами

Заключение. Полученные данные свидетельствуют, что исследованные фракции ЛПС E. meliloti при вторичном иммунодефиците у крыс, вызывают положительные изменения иммунореактивности.

141
Аннотация

Цель исследования - оценка напряженности иммунитета к вирусу кори работников медицинских организаций разного профиля, лиц молодого возраста и новорожденных. Материалы и методы: Определен иммунный статус к вирусу кори у основных сотрудников СПб ГБУЗ “Родильный дом №10” (386 человек), лиц гражданского персонала медицинских сотрудников до 50 лет клиник Военно-медицинской академии им С.М. Кирова (ВМедА) (1399 человека), курсантов ВМеДА (304 человека) и 34 новорожденных детей методом ИФА (ВектоКорь-IgG). Результаты: Выявлен высокий общий уровень защищенности против вируса кори сотрудников медицинских организаций: иммунитет к вирусу кори серологически подтвердился у 87,5±3,3% сотрудников роддома и 81,6±2,1% сотрудников клиник ВМеДА. Различий в иммунном статусе среди различных категорий медицинского персонала и медицинского персонала отделений различного профиля не выявлено. Более низкий популяционный иммунитет наблюдался в возрастной группе 20-40 лет. Среди сотрудников родильного дома удельный вес серопозитивных к вирусу кори среди персонала 20-40 лет составил 75,9% (95% ДИ 67,2%-82,9%), 40-59 лет –91,5% (95% ДИ 86,7%-94,7%), лица 60 лет и старше были все серопозитивны (95% ДИ 94,6%-100%). Двукратная вакцинация не являлась гарантией наличия эффективного противокоревого иммунитета. Большинство серонегативных лиц имели в анамнезе двукратную вакцинацию, поэтому, даже при наличии двукратной вакцинации против кори в анамнезе необходимо проведение серологического обследования перед приемом на работу в медицинскую организацию. Более 90% сотрудников составляют женщины. Исходя из этого, женщины фертильного возраста, документально привитые двукратно, но иммунологически серонегативные, подвергаются риску заболевания корью и внутриутробного инфицирования плода, а также увеличивается риск заболевания детей до достижения прививочного возраста. Это подтверждается тем, что только 70,6±15,3% новорожденных детей имели иммунитет к вирусу кори. Удельный вес серонегативных новорожденных (29,4±15,3%) сравним с долей серонегативного персонала родильного дома в возрасте 20-40 лет (24,1±8,1%). Среди более молодой возрастной группы (лица в возрасте от 18 до 23 лет) – курсантов военно-медицинской академии, выявлена значительно более существенная доля серонегативных лиц - 48,3±5,6%, что делает высокой вероятность возникновения эпидемической вспышки при заносе кори в данные организованные коллективы. Выводы: В условиях элиминации кори, необходима разработка программы скрининга на наличие антител к вирусу кори среди лиц молодого и среднего возраста.

134
Аннотация

Ключевую роль в инициации иммунных реакций играют дендритные клетки – наиболее активные и высокоспециализированные антигенпрезентирующие клетки. В настоящее время актуальна разработка препаратов, активирующих дендритные клетки для создания противоинфекционных и противоопухолевых вакцин. Перспективными для усиления активности дендритных клеток являются препараты микробного происхождения, поскольку они несут лиганды для Toll-подобных рецепторов системы врожденного иммунитета. К таким препаратам относятся экспериментальные белоксодержащие пневмококковые препараты, которые  получали из инактивированной ацетоном микробной массы депонированного вакцинного штамма Spneumoniae 6В №296 с последующей водной экстракцией и выделением фракции 30-100 kDa. Дендритные клетки получали из клеток костного мозга мышей линии СВА (n=15).  Клетки культивировали в полной ростовой среде RPMI-1640 в присутствии рекомбинантных GM-CSF и IL-4 (Biosource, USA). На шестые сутки в культуру незрелых дендритных клеток вносили экспериментальные белоксодержащие пневмококковые препараты (50 мкл/мл). В качестве классического индуктора созревания использовали коммерческий TNF-α (20 нг/мл, Biosource, USA). Иммунофенотип дендритных клеток определяли методом проточной цитометрии с использованием FITC- и PE- меченых моноклональных антител к клеточным рецепторам: CD34, CD38, CD83, CD86, CD80, CD11c, MHCII, СD14, CD282 (TLR2), CD-284 (TLR4),  (eBioscience,USA). При изучении влияния экспериментальных белоксодержащих пневмококковых препаратов на созревание дендритных клеток установлено, что морфологические характеристики дендритных клеток при использовании в качестве индуктора созревания экспериментальных белоксодержащих препаратов не имеют существенных отличий между собой и с классическим индуктором созревания TNF-a. Клетки характеризовались крупными размерами, имели овальную или неправильную форму с вуалевидной цитоплазмой, эксцентрично расположенным ядром и многочисленными длинными, тонкими отростками. Данные препараты в культуре дендритных клеток вызывали снижение численности CD34+ незрелых клеток и TLR2/TLR4+ DC, повышали количество клеток с маркером адгезии CD38+, активационными MHCII+, костимулирующими CD80/CD86+ молекулами и маркером терминальной дифференцировки CD83+, что может свидетельствовать о процессах дифференцировки дендритных клеток при их созревании. Фракция 30-100 kDa в большей степени увеличивала численность клеток с молекулами адгезии по сравнению с водным экстрактом, который значительнее стимулировал нарастание количества дендритных клеток с экспрессией костимулирующих молекул по сравнению с фракцией 30-100 kDa (p<0,05). Активность исследуемых препаратов в отношении влияния на CD83+ клетки была сопоставимой. Показано, что экспериментальные белоксодержащие антигены вакцинного штамма пневмококка индуцируют созревание дендритных клеток из костномозговых предшественников, индуцируют снижение численности TLR2 и TLR4 -экспрессирующих клеток, что свидетельствует об активирующем влиянии на эффекторы врожденного иммунитета.

1293
Аннотация

Группа стрептококка включает в себя многочисленные виды шаровидных грамположительных факультативно-анаэребных бактерий, в основе классификации которых лежит их способность к гемолизу эритроцитов.

Стрептококки группы viridans являются зеленящими стрептококками и естественными представителями нормальной микрофлоры в полости рта. Однако, при развитии иммунодефицитных состояниях, онкологиях, нейтропениях этот возбудитель может являться причиной заболеваний, таких как бактериемия, сепсис, эндокардиты, а в некоторых случаях и пневмоний.

Заболевания органов дыхания являются частой причиной обращения за медицинской помощью у ВИЧ-инфицированного контингента.

Роль комменсала S.viridans в развитие бактериальных заболеваний у ВИЧ-инфицированных пациентов остается до конца не изученной. Не понятна связь S.viridans с другими бактериальными сообществами, включая патогенные микроорганизмы. Также, было бы очень интересным оценить чувствительность к антибактериальным препаратам S.viridans в регионе с высокой заболеваемостью ВИЧ-инфекцией.

Цель исследования оценить чувствительность к антибактериальным препаратам стрептококков группы viridans в мокроте у ВИЧ-инфицированных пациентов с клиникой пневмонии.

Материалы и методы. В период с 01.01.2012 по 01.01.2019 гг. на базе БУЗОО «Инфекционной клинической больницы № 1 имени Далматова Д.М.» были проанализированы результаты микробиологического исследования мокроты всех ВИЧ-инфицированных пациентов с подозрением на пневмонию (n=684), из которых у 193 пациентов выявлялся S.viridans (28,2%).

Бактериологическое исследование материала проводилось для выделения чистой культуры возбудителей классическими методами. Затем проводилась оценка S.viridans на чувствительность к антибактериальным средствам (n=78), согласно клиническим рекомендациям от2018 г. Первоначально резистентность к антибиотикам определялась диско-диффузным методом, который является рутинным, но наиболее распространенным в клинической лаборатории. Затем проводилась оценка минимальной подавляющей концентрации с помощью прибора AutoScan 4 Microscan (анализатор бактериологический полуавтоматический Beckman Coulter, США) для идентификации и определения антибактериальной чувствительности.

Результаты исследования. При проведении диско-диффузного метода в изучаемых образцах было выявлено наличие резистентности к пенициллину у 28,2%, к ампициллину – у 42,3% и еще больше к цефазолину – в 43,6% изолятах. При оценке минимальной подавляющей концентрации антибактериального средства были получены аналогичные данные. Хорошая чувствительность выявлена на цефотаксим, цефтриаксон, цефепим, фторхинолоны и ванкомицин.

161
Аннотация

Резюме. Цель исследования – характеристика токсигенных штаммов Corynebacterium diphtheriaе, выделенных на территории России в 2017 - 2019 гг. В исследование включено 12 токсигенных штаммов C.diphtheriae, выделенных в период с января 2017 г. по июнь 2019 г. Изучение штаммов С.diphtheriae проводили по культурально-морфологическим, токсигенным и биохимическим свойствам. Генотипирование штаммов C.diphtheriae осуществляли с помощью MЛСТ и секвенирования гена dtxR с последующим проведением биоинформационного анализа. Результаты. Токсигенные штаммы С.diphtheriae были выделены в Новосибирской, Самарской и Челябинской областях, Ханты-Мансийском автономном округе - Югре и Республике Северная Осетия - Алания. Среди изученных штаммов, 5 штаммов были выделены от больных дифтерией (из которых только в одном случае была средне-тяжелая форма клинического течения и в остальных – легкая форма) и 7 штаммов – от бактерионосителей. У больных дифтерией в двух случаях идентифицированы штаммы C.diphtheriae биовара gravis, принадлежащие к сиквенс-типу ST25, в одном случае – штамм биовара gravis ST8 и в двух случаях – штаммы биовара mitis ST67. У бактерионосителей токсигенных C.diphtheriae в двух случаях идентифицированы штаммы биовара gravis сиквенс-типа ST25 и в 4 случаях – штаммы биовара mitis ST67. В одном случае идентифицировать сиквенс-тип не удалось. Все выявленные сиквенс-типы являются широко распространенными в мире и представлены большим количеством изолятов в базе данных PubMLST, а также характеризуются значительным количеством производных сиквенс-типов. При этом они входят в различные клональные комплексы и значительно отличаются друг от друга, что способствует их надежному различению в МЛСТ. Изучение особенностей структуры гена dtxR показало, что все выявленные аллельные варианты гена являются типичными для представителей этих сиквенс-типов, новых аллельных варианты гена dtxR у изученных штаммов не было обнаружено. Показано, что несинонимичная замена C440T с заменой аминокислоты А147V встречается в пределах только одного аллеля, характерного для представителей сиквенс-типов ST8, ST185, ST195 и ST451, что говорит о поздно произошедшей мутации. Полиморфизм C640A с заменой аминокислоты L214I присутствует не только в данном аллеле, но и в более базальных ветвях дерева, что свидетельствует об изолейцине как о предковом состоянии белка.

162
Аннотация

Целью данной работы является анализ результатов комплексных эпидемиологических и зоолого-энтомологических исследований для определения эколого-эпидемиологических особенностей очагов клещевого вирусного энцефалита (КВЭ) и клещевого боррелиоза (КБ), а также роли антропогенных факторов в их эпидемическом проявлении для совершенствования противоэпидемических мероприятий.

Проанализированы многолетние данные о показателях обилия клещей, собранных на флаг, в разных районах Республики Коми (РК). С помощью иммуноферментного анализа и полимеразной цепной реакции определена инфицированность вирусом клещевого энцефалита и Borrelia burgdorferi клещей, собранных с растительности, людей и домашних животных в разных районах РК. Проанализированы данные о количестве жителей РК, пострадавших от нападения клещей с 1994 по 2017 годы, о заболеваемости КВЭ с 1970 по 2017 годы и КБ с 1997 по 2017 годы, о влиянии трансформации лесов на заболеваемость КВЭ.

Отмечен существенный рост численности клещей в 2006 - 2017 годах в южных районах РК и экспансия этих кровососущих на Север. Также показано, что территория РК, на которой регистрировались случаи нападения клещей на жителей, значительно расширилась. Средние показатели покусанности клещами выросли в 2006 - 2017 годах по сравнению с 1994 - 2005 годами более чем в четыре раза. В районах, где вырубка лесов наиболее выражена, увеличилось количество жителей, пострадавших от присасывания клещей, и был зарегистрирован выраженный подъём заболеваемости КВЭ.

В последние годы выявлено увеличение инфицированности клещей вирусом клещевого энцефалита, как собранных с растительности, так и с пострадавших людей и животных.

Среднегодовые показатели заболеваемости КВЭ в 2006 - 2017 годах по сравнению с 1970 - 1981 годами и 1982 - 1993 годами увеличились в 11 и 36 раз соответственно.

В последние годы стали регистрироваться наиболее тяжёлые очаговые формы болезни. В период с 1996 по 2017 годы летальность при КВЭ составила 2,3%.

Основные черты эпидемиологии КБ сходны с таковыми при КВЭ. Так, доля инфицированности клещей, собранных с травы, Borrelia burgdorferi увеличилась с 9,5% в 2010 году до 34,7% в 2017 году. Отмечен резкий подъём заболеваемости и значительное расширение территорий на Север, где эта инфекция стала регистрироваться лишь в последние годы. КБ и КВЭ имеют выраженный профессиональный характер.

Аргументирована необходимость проведения адресной профилактики клещевых инфекций с учётом местных особенностей. Северные территории РК, на которых в последние годы были зарегистрированы случаи нападения клещей на жителей, следует рассматривать в качестве потенциально эндемичных.

127
Аннотация

Ликвидация заболеваемостью натуральной оспой была достигнута за счет массовой вакцинации населения, которая затем была прекращена в связи с опасностью развития серьезных осложнений. Возрождение исследовательского интереса к осповакцине обусловлено появившейся угрозой применения вируса натуральной оспы в качестве оружия биотерроризма и  возросшей частотой заражения ортопоксвирусными инфекциями на фоне неуклонного снижения популяционного иммунитета. Вирус осповакцины так же используется в качестве вектора для создания рекомбинантных вакцин. Понимание механизмов формирования  иммунного ответа и возможность его прогнозирования позволит избежать возможных осложнений и излишней иммунизации. Целью данной работы являлось выявление связи между уровнем гуморального иммунитета, клиническими показателями вакцинального периода и поло-возрастными характеристиками у лиц,  ревакцинированных вирусом осповакцины. Были исследованы клинические данные вакцинального периода 135 человек, вакцинированных повторно от 2 до 10 раз. Вакцинальный период легкой степени тяжести наблюдался у 95% обследованных, средней тяжести – у 5%. У 127 человек последовательно сформировались вакцинальные элементы (94,1%), у 22,2% были зафиксированы местные и общие осложнения. Для средней степени реакции характерны большие размеры гиперемии (p=0,04), корочки (p=0,01) и длительность отпадения корочки (p=0,001). Возраст обследованных лиц со средней степенью тяжести вакцинального периода статистически значимо меньше, чем с легкой степенью (p=0,03), при средней степени тяжести вакцинального периода выше вероятность развития лимфаденита (p<0,001). У 54 обследованных лиц был определен титр защитных антител (АТ) в реакции нейтрализации на культуре клеток Vero по методу бляшек. Наблюдалась тенденция к формированию более высокого уровня АТ у женщин, по сравнению с мужчинами. Выявлена прямая отрицательная корреляция между титром АТ и размером гиперемии. Подмышечный лимфаденит чаще сопровождает высокий уровень АТ. Корреляция между наличием и размерами вакцинальных элементов, временем отпадения корочки и титрами АТ не установлена. Возраст и число предшествующих вакцинаций не оказывают значимого влияния на уровень гуморального иммунитета. Вариативность клинической картины и иммунного ответа при применении одной вакцины и единой схемы вакцинации может быть объяснена генетическими различиями индивидов, и требует дальнейшего изучения.

145
Аннотация

Изучение генетического разнообразия вируса гепатита С (HCV) имеет большое практическое значение при проведении молекулярно-эпидемиологических исследований, разработке средств специфической профилактики и для определения тактики терапии. Цель исследования: провести анализ генетического разнообразия HCV, циркулирующего среди населения Нанайского района Хабаровского края. Материалы и методы. Проведен серологический и молекулярно-генетический анализ 124 образцов сыворотки/плазмы крови от пациентов с диагнозом хронический гепатит C (ХГС), проживающих на территории Нанайского района Хабаровского края. Результаты. РНК HCV была обнаружена в 84 (67,7±4,2%) образцах плазмы крови. Генотипирование HCV, проведенное с использованием набора «АмплиСенс -1/2/3» (ФБУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва) показало, что на территории района наиболее распространен 3 генотип вируса – 47,6±5,4% (n=40). Генотип 1 HCV обнаружен у 30 пациентов (35,7±5,2%). В 13 случаях (15,5±3,9%) выявлен 2 генотип и у 1 пациента (1,2±1,2%) генотип не определился. Филогенетический анализ нуклеотидных последовательностей области NS5b генома HCV, проведенный для 60 РНК HCV-положительных образцов, показал следующее соотношение субтипов: 1а – 2 (3,3±2,3%), 1в -  23 (38,3±6,3%), 2а – 6 (10±3,9%), 2с – 2 (3,3±2,3%), 3а – 27(45±6,4%). В ходе исследования было выявлено 3 пробы, принадлежащие к рекомбинантной форме вируса RF2k/1b. С целью подтверждения рекомбинации были получены полные нуклеотидные последовательности гена NS2. Результаты исследования свидетельствуют о необходимости проведения дополнительного, комплексного обследования больных хроническими формами гепатита С с применением современных молекулярно-биологических методов для принятия решений об адекватной терапии, учитывая особенности выделенных изолятов. Данные о молекулярно-генетических характеристиках HCV, циркулирующих на отдельных территориях Дальнего Востока, весьма ограничены и проведенное молекулярно-генетическое исследование внесет дополнение в существующие представления о циркуляции геновариантов HCV на территориях Российской Федерации.

93
Аннотация

Проведен анализ состояния интерфероновой системы 38 детей в остром периоде инфекционного мононуклеоза (ИМ), вызванного вирусом Эпштейна-Барр. Исследование интерферонового статуса выполнено по методике Ф.И.Ершова, которая предполагает оценку количества интерферона, находящегося в сыворотке крови или продуцируемого клетками крови, по его биологической активности. Целью работы было получение лабораторного обоснования дляприменения интерферонов илиинтерфероногенов в комплексной терапии ИМ. Для этого было проведено сравнение интерферонового статуса  у детей в остром периоде ИМ не только с показателями контрольной группы здоровых (30 детей 3-6 лет и 20 детей 7-14 лет, которые были обследованы ранее для создания внутрилабораторной нормы), но и с группой детей, больных ангиной или ОРВИ, госпитализированных в то же отделение клиники и сопоставимых с основной группой по тяжести состояния. Другой задачей была оценка изменения показателей IFN-статуса у больных ИМ, не получавших в ходе лечения интерфероновых препаратов, через 1 месяц от начала заболевания.

Проведенное исследование показало, что в остром периоде инфекционного мононуклеоза у больных в состоянии средней тяжести снижение способности лейкоцитов крови к вирус-индуцированной продукции IFNα и митоген-индуцированной продукции IFNγ встречается примерно с той же частотой, что и в контрольной группе детей, госпитализированных с ангиной или ОРВИ, или несколько реже.

У больных ИМ было обнаружено, что в возрастной группе 3-6 лет способность клеток крови к продукции интерферонов на этой стадии заболевания практически не нарушена, а у пациентов 7-14 лет страдает почти исключительно альфа-интерфероногенез. В группе 7-14 лет 1 степень недостаточности продукции IFNα  отмечалась в 38% случаев, а 2 степень – у 6%. Вероятно, именно эта группа больных нуждается в каких-либо вариантах заместительной терапии IFNα. Повторным обследованием после выписки из клиники было охвачено только 12 детей. Исходно частота недостаточности интерфероногенеза и степень недостаточности в этой подгруппе не отличалась от всей выборки пациентов, а через 1 месяц, отмечалось некоторое увеличение потенциальных возможностей организма к продукции как IFNα так и IFNγ даже без терапии препаратами, влияющими на интерфероновую систему.

223
Аннотация

Поиск прогностических маркеров коинфекции ВИЧ и туберкулез (ВИЧ/ТБ), особенно, при множественной лекарственной устойчивости Mycobacterium tuberculosis (МЛУ МБТ),  ассоциированной с низкими показателями излечения ТБ, является актуальным в связи с проблемой выбора адекватных противотуберкулезных мероприятий, способных снизить уровень летальности. Обследованы 113 больных ВИЧ/ТБ в возрасте от 24 до 58 лет –  70 мужчин и 43 женщины, находившиеся на стационарном лечении в Новокузнецком клиническом противотуберкулезном диспансере в период 2017-2019 гг.  МЛУ МБТ   (резистентность одновременно к изониазиду и рифампицину) обнаружена у  50 пациентов (у 12 больных с МЛУ МБТ имелась дополнительная резистентность к фторхинолонам) в возрасте от 24 до 54 лет – 31 мужчина и 19 женщин. В группу контроля включено 49 практически здоровых лиц в возрасте от 27 до 72 лет (26 женщин и 23 мужчины), не имеющих признаков очаговой и системной инфекции с умеренно выраженными возрастными изменениями. В образцах плазмы крови определены концентрации общих (неспецифических) иммуноглобулинов классов Е, М, G, А (в том числе,  секреторного иммуноглобулина А, sIgA) методом твердофазного иммуноферментного анализа.  Для статистической обработки результатов использованы пакеты лицензионных программ InStatII, Microsoft Excel, IBM SPSS Statistics 22. Выявлен большой интервал индивидуальной вариабельности количества CD4-лимфоцитов как среди умерших, так и среди живущих обследованных  пациентов с ВИЧ/ТБ, что является недостатком использования этого показателя для предикции летальности. Установлено, что содержание общих IgЕ, IgМ, IgG, IgА и sIgA  в плазме крови больных ВИЧ/ТБ выше в сравнении с контролем, а у умерших больных концентрация IgЕ и sIgА больше, чем  у живущих.  Установлен коэффициент предикции (КП) исхода заболевания для пациентов с ВИЧ/ТБ и МЛУ МБТ, равный отношению произведения концентраций IgE, IgМ, IgA и секреторного IgA в плазме крови к количеству CD4-лимфоцитов (КП= IgE× IgМ×IgA×sIgA / CD4).  КП более 200 был выявлен у 77% умерших и 6% живущих пациентов. Относительный риск летального исхода при КП >200  оказался очень высоким (OR=56,7 р<0,0001) и был в 8,5 раз выше, чем при CD4 < 200 (OR=6,7 р=0,0237). Выявленная положительная корреляционная связь КП с летальным исходом более значима,  чем у показателя CD4. Представленные  результаты позволяют предложить КП в качестве эффективного прогностического критерия при ВИЧ/ТБ с МЛУ МБТ для клинического использования.    

130
Аннотация

Аргининдеиминаза является одним из трех ферментов, образующих систему аргининдеиминазы у бактерий. Ранее, было  установлено, что аргининдеиминаза, обладает антипролиферативным  действием в отношении ряда первичных и иммортализованных клеток мыши и человека. Предполагается, что ингибирующее действие фермента может быть связано с его способностью приводить к истощению аргинина в микроокружении клеток. Биодоступность аргинина играет важную роль для пролиферации Т-лимфоцитов, экспрессии белков Т-клеточного рецептора и дифференцировки клеток памяти. Целью настоящего исследования стало изучение влияния аргининдеиминазы пиогенного стрептококка на функциональную активность лимфоцитов периферической крови человека. Для достижения поставленной цели было проведено сравнительное исследование влияния супернатанта разрушенных стрептококковых клеток (СРС) исходного штамма S. pyogenes M49-16 и его изогенного мутанта S. pyogenes M49-16delArcA с инактивированным геном аргининдеиминазы (ArcA) на функции иммунных клеток. Влияние супернатантов на жизнеспособность клеток оценивали методом проточной цитометрии, с использованием ДНК–связывающего красителя DAPI. Пролиферацию клеток оценивали с помощью МТТ-теста и цитофлюориметрически с использованием метода, основанного на окрашивании внутриклеточного белка витальным флуоресцентным красителем CFSE (карбоксифлуоресцеинсукцинимидилэфирным красителем). Кроме того, в работе оценивали уровень экспрессии на лимфоцитах тирозинфосфатазы CD45 в различных условиях культивирования. Было показано, что СРС S. pyogenes M49-16 не оказывал влияния на жизнеспособность клеток. СРС исходного штамма практически не влиял на пролиферацию интактных клеток, но значительно подавлял пролиферацию клеток, индуцированную ConA. В то же время СРС мутантного штамма достоверно повышал спонтанную пролиферацию клеток и не оказывал влияния на пролиферацию, индуцированную митогеном. Было показано, что увеличение пролиферации сопровождалось увеличением уровня экспрессии CD45, однако эти изменения не во всех случаях были достоверны. Полученные данные позволяют заключить, что бактериальная аргининдеиминаза может являться одним из факторов патогенности, способных ограничивать пролиферацию лимфоцитов и развитие иммунного ответа с целью улучшения роста и диссеминации бактерий.

165
Аннотация

Резюме

Вирус осповакцины сыграл ключевую роль в глобальной ликвидации натуральной оспы. Однако при массовой иммунизации вакцинами на основе разных штаммов вируса осповакцины выявлялись случаи тяжелых побочных реакций, иногда завершающиеся летальным исходом, особенно у людей с ослабленной иммунной системой. Поэтому после объявления в 1980 году о ликвидации оспы Всемирная организация здравоохранения рекомендовала прекратить противооспенную вакцинацию. За прошедшие 40 лет человеческая популяция практически утратила иммунитет не только против натуральной оспы, но и против зоонозных ортопоксвирусных инфекций, таких как оспа обезьян, оспа коров, оспа буйволов, оспа верблюдов. Поэтому в последние годы на разных континентах стали возникать вспышки ортопоксвирусных инфекций человека, которые имеют опасность перерасти в будущем в распространенные эпидемии. В связи с этим возникла необходимость получения безопасных аттенуированных штаммов вируса осповакцины, направленно инактивируя гены вирулентности этого вируса, и изучения на лабораторных моделях проявления их свойств патогенности и иммуногенности в зависимости от способа введения вирусов в организм животных. Аттенуация вируса осповакцины в настоящее время часто достигается при создании живых рекомбинантных поливалентных вакцин в результате встройки целевых последовательностей ДНК в гены вирулентности векторного вируса, что приводит к их инактивации. Объектами исследования в данной работе явились штамм LIVP вируса осповакцины, используемый в Российской Федерации для противооспенной вакцинации, и полученный на его основе методами генетической инженерии аттенуированный вариант LIVP-GFP, у которого нарушен вирусный ген тимидинкиназы. Данные вирусы вводили мышам-сосункам линии BALB\c интрацеребрально в дозах 101 или 102 БОЕ/животное для оценки нейровирулентности сравниваемых штаммов вируса осповакцины. Взрослых мышей заражали этими вирусами интраназально, подкожно или внутрикожно в дозах 107 или 108 БОЕ/животное и контролировали в течение 14 сут наличие клинических проявлений вирусной инфекции. Через 28 сут от начала эксперимента получали индивидуальные сыворотки крови мышей и методом ИФА определяли в них уровень вирусспецифичных антител. Показано, что рекомбинантный штамм LIVP-GFP обладает значительно сниженной нейровирулентностью и патогенностью для мышей по сравнению с исходным штаммом LIVP. Наиболее безопасным и эффективным способом иммунизации для обоих изученных штаммов вируса осповакцины оказалось внутрикожное введение.

 

Resume

Vaccinia virus had been played a key role in the global smallpox eradication. But in the course of mass vaccination using several vaccinia virus strains were revealed hard side effects with lethal outcomes in some cases, especially in humans with immunodeficiency. Therefore after declaration in 1980 about smallpox eradication World Health Organization recommended to stop smallpox vaccination. After last 40 years the most part of Earth human population does not have immunity not only against smallpox, but also against any other zoonotic orthopoxvirus infections, such as monkeypox, cowpox, buffalopox, and camelpox. All of these represent increasing danger for human health and heighten risk of emergence of highly contagious virus caused by natural evolution of existed zoonotic orthopoxviruses. In order to prevent development of small outbreaks into spreading epidemics and, thus, to decrease a risk of emergence due to natural evolution of highly pathogenic for humans orthopoxviruses, researchers’ efforts should be applied to development of safe live vaccines of new generation based on vaccinia virus with target virulence genes inactivation. These strains should be studied in laboratory animal models using different routes of virus inoculation. Vfccinia virus attenuation now usually is achieved in the course of live recombinant vaccines creation as specific DNA sequences insertion into virus virulence genes and their inactivation. The subjects of this research were vaccinia virus strain LIVP, used in the Russian Federation as smallpox vaccine, and attenuated variant LIVP-GFP created on its basis by genetic engineering methods with inactivation of thymidine kinase gene. These viruses were intracerebrally inoculated into suckling mice in doses 101 or 102 PFU/animal for neurovirulence assessment. Adult mice were infected intranasally, subcutaneously or intradermally in doses 107 or 108 PFU/animal and clinical manifestations were analyzed during 14 days. On 28 day of the experiment samples of blood sera were collected from mice individually and ELISA technique was used for analyses of virus specific antibodies levels. It was shown that recombinant vaccinia virus strain LIVP-GFP caused very low neurovirulence and pathogenicity for mice in comparison with parental LIVP. The most safe and effective route of immunization by studied vaccinia virus strains is intradermal inoculation.

162
Аннотация

Монголия и Россия входят в группу стран с высоким бременем туберкулеза (ТБ). На территориях Восточной Сибири, граничащих с Монголией, распространенность ТБ, в том числе с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ), значимо превышает аналогичные показатели в европейской части России. В отличие от Монголии для территорий Восточной Сибири характерна высокая распространенность ВИЧ-инфекции. Широкое сотрудничество и культурный обмен между странами не исключает возможности трансграничной передачи M. tuberculosis. Если ВИЧ-инфекция не имеет эпидемиологического значения для Монголии в настоящий момент, то ТБ по обе стороны границы имеет схожую распространенность. Цель: оценка трансграничного распространения M. tuberculosis c множественной лекарственной устойчивостью в Монголии  и регионах Восточной Сибири по молекулярно-генетическим данным. Материалы и методы:  Методом MIRU-VNTR по 24 локусам проведено исследование 1045 штаммов M. tuberculosis, выделенных на территории Монголии (291) и трех регионов Восточной Сибири (754). Субтип CC2/W148 идентифицировали по наличию специфической делеции в kdpD гене, субтип СС1 – по SNP в гене pks17 в позиции 1887060. Филогенетический анализ полученных MIRU-VNTR паттернов проведен путем построения древ UPGMA и максимального правдоподобия. Результаты исследования. Генотип Beijing  присутствовал в 75,3% (219/291) коллекции из Монголии и 69,0% (520/754) – из Восточносибирских регионов России. Общими минорными являются генотипы LAM (11,0% и 15,1%), T (10,3%  и 4,5% ) Haarlem (1,4% и 2,4% ) соответственно в Монголии и Восточной Сибири. Только в российской выборке обнаружены генотипы S (1,3% )  и Ural (5,0 %). Основные эпидемические субтипы Beijing  каждой из стран относились к разным клональным комплексам (СС):  монгольские штаммы Beijing в превалирующем количестве имели профили   342-32, 3819-32, 1773-32 MLVA типов и относились к СС4 субтипу; российские штаммы Beijing в основном принадлежали СС1 (43,7% - 227/520) и СС2/W148 (34,8% - 181/520) субтипам. Уровень и модели распространения МЛУ штаммов значительно отличались в Монголии и Восточной Сибири. Моделирование диссеминации эпидемических вариантов возбудителя свидетельствует о крайне незначительном вкладе явления трансграничной передачи M. tuberculosis между Монголией и Россией. Филогенетическая реконструкция эволюции субтипа CC4 генотипа Beijing в Монголии позволяет предположить, что его распространение связано в первую очередь с Китаем и другими странами Западно-Тихоокеанского региона. Прослеживаются три основных филогенетических ветви субтипа CC4, вероятно получивших распространение на территории Монголии в 11-12  веках. Можно предполагать, что распространение эпидемического субтипа CC4 генотипа Beijing происходило в две стадии: ранняя – возникновение предковых вариантов СС4 в Монголии или занос их из Китая (они гомологичны сохранившимся в китайской популяции  штаммам);  поздняя – распространения  за счет активного обмена M. tuberculosis со странами Юго-Восточной Азии, но не России. Заключение.  Используя генотипирование MIRU-VNTR 24 и классификацию по специфическим однонуклеотидным полиморфизмам, характерным для отдельных субтипов генотипа Beijing, были описаны обособленные друг от друга закономерности распространения эпидемических вариантов возбудителя в Монголии и России.  Было продемонстрировано, что возникновение и распространение ТБ с МЛУ в Монголии носит исключительно ятрогенный характер, в то время как на исследуемых территориях России значительный вклад в распространения МЛУ туберкулеза вносят эпидемические субтипы генотипа Beijing (субтипы СС1 и СС2/W148).

224
Аннотация
Целью исследования явилось получение и характеристика рекомбинантной вакцины, предназначенной для иммунопрофилактики инфекций, вызываемых Pseudomonas aeruginosa. При создании вакцины использован комплекс двух высокоиммуногенных рекомбинантных белков P. aeruginosa. Первый компонент вакцины представлял собой рекомбинантную форму белка F наружной мембраны (OprF), а второй – рекомбинантную атоксическую форму (анатоксин) экзотоксина А. Эти антигены позволили разработать вакцину способную стимулировать иммунные реакции против поверхностных структур бактерии и способствовать синтезу нейтрализующих антител против экзотоксина А, одного из наиболее опасных факторов патогенности P. aeruginosa. Рекомбинантные белки синтезировали в клетках Escherichia coli и выделяли в результате двухэтапной очистки. В случае рекомбинантного белка OprF на первом этапе получали осадок, содержащий гидрофобную фракцию белков продуцента, а в случае рекомбинантного анатоксина – тельца-включения. На втором этапе проводили аффинную хроматографию в колонках с никель-сефарозой. Очищенные рекомбинантные белки диализовали против буферного раствора, содержащего 50 mМ Tris-HCl (pH 9,0) и 0,01 % Tween 20, а затем стерилизовали фильтрацией. Для исследования были получены три серии рекомбинантной вакцины синегнойной (РВС), в которой рекомбинантные антигены находились в сорбированном с гидроокисью алюминия состоянии. В этой вакцине рекомбинантный белок OprF использовали в дозе 25 мкг, а рекомбинантный анатоксин – в дозе 50 мкг. Определение полноты сорбции рекомбинантных антигенов в составе вакцины оценивали методом электрофореза в полиакриламидном геле, используя для нанесения препараты РВС, сконцентрированные ультрафильтрацией в спин колонках. С целью оценки подлинности рекомбинантной вакцины разработали оригинальный метод. Для этого проводили десорбцию антигенов с последующей концентрацией препарата с помощью спин колонок. Полученные сконцентрированные десорбированные вакцинные препараты анализировали методом электрофореза в полиакриламидном геле и иммуноблоттингом. В результате чего, подтверждено наличие специфических рекомбинантных антигенов в составе вакцины. Экспериментальные серии РВС проявляли специфическую активность (защитные свойства) в эксперименте на животных (мышах). При этом использована схема двукратного, с двухнедельным интервалом внутрибрюшинной иммунизации, а затем через две недели мышей заражали токсигенной культурой P. aeruginosa штамма PA-103. Индексы эффективности защитных свойств (ИЭ) экспериментальных серий вакцины составляли не менее трех (ИЭ: 3,0 – 3,3), что превышало в полтора раза эффективность использования компонентов вакцины по отдельности (ИЭ: 2,0 – 2,3). Таким образом, подтвержден аддитивный эффект использования комплексного препарата для защиты от инфицирования токигенными штаммами синегнойной палочки.
116
Аннотация

Цель исследования: изучить активность моноцитов у больных описторхозом в зависимости от выраженности фиброза печени. Материалы и методы. Всего было обследовано 74 больных хроническим описторхозом (39 мужчин и 35 женщин, средний возраст 42,3 лет) и 32 практически здоровых пациентов (17 мужчин и 15 женщин, средний возраст 41,5 лет) в возрасте от 24 до 60 лет. Основными методами лабораторной диагностики описторхоза являлись паразитологические исследования с определением яиц или тел взрослых паразитов в дуоденальном содержимом и/или в кале, которые применялись у всех 74 пациентов. Фиброз печени определялся методом эластометрии по шкале METAVIR у всех 74 больных описторхозом. Исследование функциональной активности моноцитов в крови было проведено всем 74 больным описторхозом и 32 здоровым лицам из группы контроля методом хемилюминесцентного анализа с измерением интенсивности выработки активных форм кислорода в спонтанной и зимозан-индуцированной реакции в люцигенин- и люминол-зависимых процессах. Результаты. Фиброз печени F2 по METAVIR был зарегистрирован у 20,3% обследованных лиц, фиброз печени F3-F4 по METAVIR определялся у 17,6% больных с описторхозом. При определении всего пула активных форм кислорода в люминол-зависимом процессе у больных описторхозом регистрировалось значительное снижение функциональной активности моноцитов в сравнении со здоровыми лицами, о чем свидетельствовало значительное снижение максимальной интенсивности выработки активных форм кислорода и площади под кривой хемилюминесценции как в спонтанной реакции, так и в индуцированной зимозаном реакции. Эти показатели у пациентов с фиброзом печени F3-F4 по METAVIR в зимозан-индуцированной реакции были ниже, чем у лиц с фиброзом печени F0-F1 по METAVIR. Показатели функциональной активности моноцитов в спонтанной реакции люминол-зависимого процесса не имели достоверных отличий в зависимости от степени фиброза печени у пациентов с описторхозом. Индекс активации фагоцитоза у больных описторхозом с фиброзом печени F3-F4 по METAVIR был ниже, чем у лиц с фиброзом печени F0-F1 и F2 по METAVIR. Аналогичные изменения наблюдались в люцигенин-зависимом процессе. Заключение. Полученные результаты безусловно перспективны для объяснения механизмов развития фиброза печени у больных описторхозом и создают новые возможности для развития диагностических и лечебно-профилактических технологий. Проект «Иммуно-биохимическая модель прогнозирования выраженности предраковых изменений в печени у больных хроническим описторхозом» проведен при поддержке Красноярского краевого фонда науки (код заявки: 2019051404996).

247
Аннотация
В 2018 - 2019 гг. в различных регионах Казахстана от больных людей с диагнозами ОРВИ, ОРЗ, бронхит и пневмония в поликлиниках и лечебных учреждениях получено 2794 биопробы (2530 носоглоточных смывов и 264 сыворотки крови). При молекулярно-генетическом исследовании в полимеразной цепной реакции в режиме реального времени 2530 клинических образцов, генетический материал вируса гриппа А был обнаружен в 20,19% случаев, вируса гриппа  B – в 0,11%. При субтипировании РНК вируса гриппа A подтип А/H1 идентифицирован в 11,42%, A/H3 – в 8,26%. В 0,39% проб подтип вируса не установлен.  При лабораторной диагностике 2019 носоглоточных смывов, генетический материал возбудителей ОРВИ обнаружен в 22,83% случаев: аденовирус выявлен в 1,33% проб, риновирус – в 4,16%, коронавирус -  в 0,89%, вирус парагриппа I/III типов - в 0,94%, метапневмовирус – в 1,04%, бокавирус – в 0,09%. Наибольшее количество положительных образцов выявлено к респираторно-синцитиальному вирусу – 14,36%. Результаты, полученные при скрининге носоглоточных смывов в полимеразной цепной реакции в режиме реального времени указывают на циркуляцию в исследованных областях РК вирусов гриппа А/H1N1pdm, А/H3N2 и В и ОРВИ смешанной этиологии. Исследование сывороток крови в реакции торможения гемагглютинации и иммуноферментном анализе показало наличие у населения различных регионов Казахстана антител к вирусам гриппа A/Hsw1N1, A/H3N2 и В, что указывает на социркуляцию этих вирусов. При вирусологическом исследовании носоглоточных смывов, полученных от людей, на куриных эмбрионах выделено 42 изолята, из которых 28 отнесены к вирусу гриппа А/H1N1pdm,  13 - к A/H3N2. Лишь один изолят, выделенный в Алматинской области (южный Казахстан), идентифицирован как вирус гриппа В. Результаты первичного скрининга в в полимеразной цепной реакции в режиме реального времени клинических образцов, собранных в различных регионах Казахстана в эпидемический сезон 2018 – 2019 гг., по спектру возбудителей гриппа и ОРВИ, коррелируют с результатами эпидсезона 2017-2018 гг. Наблюдается продолжение социркуляции вирусов гриппа А и В с доминированием вируса А/H1N1pdm, а также тех же вариантов ОРВИ с преимущественным преобладанием возбудителя респираторно-синцитиальной инфекции, доля которой составляла 14,36% от общего числа проб. Дифференциальная диагностика гриппа и ОРВИ у людей позволяет своевременно выявлять возбудителей инфекции и более эффективно проводить санитарно-профилактические мероприятия.
116
Аннотация

Резюме. Цель работы - изучение механизмов антибиотикорезистентности основных возбудителей гнойно-воспалительных осложнений у онкологических больных.

Материалы и методы. В 2012-2015 гг. проспективно обследовано 184 онкологических больных: 67 больных хирургического отделения №1 и 117 больных отделения анестезиологии-реанимации «Красноярского краевого клинического онкологического диспансера им. А.И. Крыжановского». Материал от больных - бронхоальвеолярный лаваж, раневое отделяемое исследовали бактериологическим методом, а также MALDI-TOF. Антибиотикочувствительность изучали методами: диско-диффузионный; «двойных дисков»; инактивации карбапенемов; скрининга; ПЦР; Е-теста; серийных разведений в бульоне Мюллера-Хинтона. Генотипирование и определение механизмов резистентности: ПЦР, М-ПЦР, секвенирование. Программа WHONET, уровень значимости p<0,05.

Результаты. Установлено превалирование ассоциаций мульти- и экстремально резистентных возбудителей. В микрофлоре нижних отделов дыхательных путей, раневом отделяемом у онкологических больных превалировали неферментирующие грамотрицательные бактерии - 44,5% и 48% соответственно, а также пор. Enterobacterales - 24% и 34,9% соответственно; грамположительные - 24% и 17,1% соответственно. У штаммов P. aeruginosa и A. baumannii, K. pneumoniae, устойчивых к имипенему и/или меропенему проверяли продукцию МБЛ фенотипически, а также гены наиболее распространенных VIM, IMP-типов, а у A. baumannii также гены OXA-23, OXA-40, OXA-58; у K. pneumoniae OXA-48. Штаммы A. baumannii не образуют МБЛ, но 56,3% изолятов (9 штаммов из 16) продуценты карбапенемаз OXA-23 и OXA-40. Штаммы P. aeruginosa 15,0% (3 из 20) обладали VIM. 16,7% (1 из 6) изолятов K. pneumoniae продуцент OXA-48. Удельный вес метициллинрезистентных штаммов р. Staphylococcus составил 48,9%, 4 штамма относились к MRSA. Штаммы MRSA PVL-, относятся к клонам ST239/spa3(t037)/SCCmecIIIA/tst,sek,seq+ (75%) и ST8/spa1(t008)/SCCmecIVc/sea+ (25%). MRSA ST239 резистентны к аминогликозидам (aacA-aphD, aadD), линкозамидам/макролидам (ermА), фторхинолонам (мутации GyrA - Ser84Leu; в GrlA- Ser80Phe), рифампицину (мутации rpoB - His481Asn, Ile527Met), сульфаметоксазолу, тетрациклину (tetM) и резистентны к хлорамфениколу (у 66,7% изолятов cat); чувствительны к ванкомицину (МПК 1,0 мкг/мл), линезолиду в 100% случаев. MRSA ST8 устойчивы к аминогликозидам (aacA-aphD, aadD), линкозамидам/макролидам (ermC), тетрациклинам (tetK), хлорамфениколу (cat); 100% чувствительны к фторхинолонам, рифампицину, сульфаметаксазолу, ванкомицину (МПК 1,0 мкг/мл), даптомицину, линезолиду.

Выводы. Установлено, что пор. Enterobacterales, А. baumannii, P. aeruginosa, MRSA сохраняет высокую антибиотикорезистентность, что необходимо учитывать в подборе адекватной антибиотикохимиотерапии, а также в контроле за распространением нозокомиальных инфекционных заболеваний.

258
Аннотация
Грипп является социально-значимой инфекцией, ежегодно наносящей значительный ущерб здоровью населения и экономике страны. Вакцинопрофилактика является наиболее эффективным способом борьбы с гриппом и его осложнениями. Существуют разнообразные вакцины против гриппа, однако, их общим недостатком является узкая специфичность, необходимость ежегодного обновления штаммового состава, не всегда удовлетворительная иммуногенность, а, следовательно, и эффективность. В этой связи пристальное внимание уделяется проблеме разработки универсальных гриппозных вакцин, направленных на индукцию перекрестно-реагирующих факторов иммунного ответа к наиболее консервативным участкам вирусных белков. Антитела против нейраминидазы (NA) способны обеспечивать гетеросубтипическую защиту, что важно ввиду потенциальной угрозы со стороны вирусов гриппа, с отличающимся гемагглютинином и нейраминидазой по сравнению с вирусами, которые циркулируют в настоящее время. Настоящее исследование посвящено поиску новых и анализу ранее предсказанных линейных B-клеточных эпитопов NA, консервативных среди всех подтипов вируса гриппа А. Было обнаружено 8 консервативных линейных В-клеточных эпитопов, расположенных вокруг активного центра нейраминидазы, три из которых (MNPNQKIITIGS, ILRTQESEC и DNWKGSNRP) были синтезированы de novo, конъюгированы c бычьим сывороточным альбумином и далее использовались для иммунизации мышей. В сыворотках иммунизированных мышей выявлялись IgG антитела, специфически связывающиеся в иммуноферментном анализе с различными вирусами гриппа А, содержащими NA подтипов N1, N2, N3 и N9. Иммунизация NA пептидами не защитила мышей от существенной потери веса после инфицирования летальным вирусом гриппа H1N1. Тем не менее, все иммунизированные мыши выжили в течение периода наблюдения, тогда как в контрольной группе выживаемость составила только 28,6%. Анализ вирусной нагрузки в легких мышей, зараженных вирусом H1N1, не выявил различий в титрах ни на 4, ни на 8 сутки после заражения. В то же время, защитный эффект отсутствовал при заражении мышей летальным вирусом гриппа H7N9: уровень летальности, потеря веса и титры вируса в легких были сопоставимы у иммунизированных и контрольных мышей. Полученные в настоящем исследовании данные показали наличие кросс-реактивности у анти-NA антител, индуцируемых при иммунизации NA пептидами, а также защитной эффективности в отношении инфекции, вызванной вирусом H1N1, но не вирусом H7N9. Эти результаты указывают на перспективность использования линейных B-клеточных эпитопов NA для дизайна эпитоп-направленных гриппозных вакцин, но при этом требуется более глубокое и полное исследование специфичности консервативных эпитопов NA, а также оптимизация схем иммунизации для достижения более высоких показателей защитной эффективности.
148
Аннотация

Несмотря на высокий охват вакцинацией коклюш остается серьезной проблемой. Случаи заболевания регистрируется у детей, подростков и взрослых. Младенцы первых трёх месяцев жизни – группа высокого риска тяжёлого течения коклюша. Антитела, полученные трансплацентарно, обеспечивают защиту от инфекции. Но имеющиеся данные об уровне антител к коклюшу у беременных женщин в России носят фрагментарный характер. C целью оценки гуморального иммунитета к Bordetella pertussis у беременных женщин и факторов, ассоциированных с серонегативным статусом проведено поперечное исследование с включением 388 участниц. Набор реагентов «SeroPertussis IgG» (Израиль) для иммуноферментного анализа использовался для количественного определения уровня антител к коклюшному токсину/гемагглютинину. Логистический регрессионный анализ для бинарной переменной отклика проводился для выявления факторов (возраст, количество беременностей, срок беременности, отсутствие вакцинации), ассоциированных с серонегативным статусом. Возраст участниц исследования варьировал от 18 до 45 лет, медиана составила 30 лет. Срок беременности был от 5 до 41 недели и в среднем составил 30 недель. Более половины обследованных женщин (51,3%) не предоставили документально подтверждённой информации о вакцинации против коклюша. Большинство привитых женщин было вакцинировано против коклюша более 20 лет назад. Положительный (защитный) титр антител к коклюшу (10-50 СвЕд/мл) был обнаружен в венозной крови 46,9% беременных женщин. У 25,8% серопозитивных женщин специфические антитела определялись в высоком титре (> 50 СвЕд/мл). Это может косвенно свидетельствовать о недавно перенесённом коклюше. Более половины обследованных женщин (53,1%) не имели защитного титра антител и были восприимчивы к инфекции. Их дети не получили трансплацентарного иммунитета к инфекции. Cрок гестации оказался фактором, ассоциированным с серонегативным статусом. В сравнении с женщинами, обследованными в первом триместре, участницы, обследованные в третьем триместре беременности чаще были серонегативными к коклюшу. Шансы быть восприимчивой к инфекции увеличивались с увеличением срока беременности, p для линейного тренда <0,01. Возраст, количество беременностей, и вакцинальный статус не влияли на концентрацию серологический статус женщины. Введение возрастных ревакцинаций против коклюша для детей дошкольного возраста, подростков, и медицинского персонала, работающего с беременными женщинами и новорожденными детьми, проведение кокон-иммунизации и вакцинации беременных женщин, необходимы для защиты младенцев от коклюша.

114
Аннотация

Резюме

Введение. Анализ современных литературных данных указывает на недостаточную изученность субпопуляционного состава лимфоцитов крови и цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) при нейроинфекциях у детей. Установлено, что клетки основных популяций лимфоцитов делятся на множество малых (минорных) субпопуляций. Цель данного исследования – изучить относительное содержание основных и малых субпопуляций лимфоцитов крови и ЦСЖ детей, переносящих вирусный (серозный) (СМ) или бактериальный гнойный менингит (ГМ). Материалы и методы. Методом проточной цитометрии проведено фенотипирование лимфоцитов крови и ЦСЖ детей в возрасте от 4 месяцев до 17 лет с диагнозом СМ (n=86) и ГМ (n=39). В качестве сравнения исследованы образцы крови и ЦСЖ детей, переносящих ОРВИ с синдромом менингизма (n=27). Исследовано относительное содержание основных субпопуляций: (CD3+ Т-лимфоциты, Т-хелперы - CD3+CD4+ Th, цитотоксические Т-лимфоциты - CD3+CD8+ CTL, натуральные киллеры - СD3-CD16+CD56+ NK, В-клетки - CD3-CD19+); малых субпопуляций лимфоцитов: (двойные позитивные /DP/ (CD3+CD4+CD8+), двойные негативные /DN/ (CD3+CD4-CD8-) Т-клеток, NKT (СD3+CD16+CD56+), CD3-CD8+ NK, CD3+CD8dim и CD3+CD8bright). Результаты. В остром периоде ГМ и СМ в крови и ЦСЖ выявлены достоверные отличия от группы сравнения в содержании основных и малых субпопуляций лимфоцитов. Характерным для субпопуляционного состава лимфоцитов крови при СМ явилось преобладание Т-клеток, Th, CTL, NK, NKT, DN, CD3-CD8+ NK, CD3+CD8bright и CD3+CD8dim при существенном более низком содержании B-клеток по сравнению с ГМ. В ЦСЖ детей с СМ превалировали Т-клетки и Th, тогда как количество B-клеток и CD3-CD8+ NK было ниже по сравнению с показателями при ГМ. В динамике заболевания также выявлены различия субпопуляционного состава ЦСЖ и крови в зависимости от нозологической формы при сохранении отличий от группы сравнения некоторых основных и малых субпопуляций лимфоцитов. Расчёт соотношения ликвор/кровь для основных и малых субпопуляций лимфоцитов выявил в группе сравнения превалирование в ЦСЖ большинства субпопуляций (коэффициенты варьировали от 1,2 до 16,4), за исключением B-клеток, NK и CD3-CD8+NK, количество которых в ЦСЖ было сниженным по сравнению с кровью (коэффициенты варьировали от 0,07 до 0,31). При СМ и ГМ происходили различные изменения соотношения ЦСЖ/кровь для большинства исследованных субпопуляций в остром периоде и периоде реконвалесценции с характерными особенностями для каждой нозологической формы. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о наличии особенностей в активации системного и интратекального иммунного ответа при серозных (вирусных) и гнойных (бактериальных) менингитах у детей и могут быть использованы в качестве дополнительного дифференциально-диагностического критерия.

91
Аннотация

Протекция при туберкулезной инфекции во многом определяется способностью тканевых макрофагов организма хозяина ограничивать рост и распространение микобактерий. Способные к размножению внутри макрофагов хозяина микобактерии выработали ряд защитных механизмов, препятствующих слиянию фагосом с лизосомами, избегая тем самым разрушительного воздействия лизосомальных ферментов. Сапозины представляют собой небольшие, кислые, термостабильные, не обладающие ферментативной активностью гликолипопротеины, участвующие в качестве кофакторов в процессах деградации гликосфинголипидов с короткими олигосахаридными головными группами. Сапозины A, B, C и D образуются в кислых эндосомах в результате расщепления исходной молекулы просапозина. Влияние сапозинов на иммунный ответ человека на микобактериальную инфекцию обусловлено их участием в процессе презентации антигенов микобактерий на молекулах CD1. В предварительных исследованиях методом электронной микроскопии нами было обнаружено повреждающее действие сапозина Д на мембрану Mycobacterium tuberculosis в кислой среде. Эти данные позволили нам предположить, что сапозин Д является важным компонентом защиты от туберкулезной инфекции.

Цель исследования. Изучение влияния дефицита сапозина Д на формирование противотуберкулезного иммунного ответа и на способность макрофагов подавлять рост M. tuberculosis.

Материалы и методы. Работу проводили на интерстициальных легочных макрофагах и макрофагах перитонеального экссудата мышей родительской линии C57BL/6 и дефицитной по гену сапозина Д линии C57BL/6-SapD-/-.

Результаты. В результате проведенных исследований было установлено, что макрофаги мышей линии C57BL/6 дикого типа, как интерстициальные легочные, так и перитонеального экссудата, значительно более эффективно, чем макрофаги дефицитные по гену SAPD контролируют рост микобактерий in vitro. Для изучения возможности компенсации дефицита сапозина Д в макрофагах перитонеального экссудата мышей C57BL/6-SapD-/- была создана генетическая конструкция, содержащая искусственный ген сапозина Д, на основе лентивирусного вектора. Заражение дефицитных по гену SAPD перитонеальных макрофагов экспрессионным вектором приводило к компенсации дефицита сапозина Д в этих клетках и восстановлению их бактерицидной функции. Механизм действия всех известных на сегодня лекарств объясняется влиянием на различные пути метаболизма микобактерий (ингибиция биосинтеза жирных кислот, арабиногалактана, пептидогликана и биосинтеза белка; ингибиция ДНК-зависимых процессов, протоновых насосов и цитохром Р450-зависимых монооксигеназ).

Выводы. Показано, что дефицит сапозина Д препятствует активации бактерицидной функции макрофагов in vitro. Наше исследование может являться предпосылкой биологического обоснования возможности использования генетической конструкции на основе гена природного белка человека, а именно сапозина Д, в качестве нового противотуберкулезного препарата.
86
Аннотация

Цель исследования: изучить функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов крови у больных с инвазией Opisthorchis felineus с кожным синдромом. Материалы и методы. Всего было обследовано 92 больных хроническим описторхозом, из них 38 пациентов (20 мужчин и 18 женщин, средний возраст 35,7±3,9 лет) были с кожным синдромом и 54 пациента (28 мужчин и 26 женщин, средний возраст 36,5±4,1 лет) без кожного синдрома, и 32 практически здоровых пациентов (17 мужчин и 15 женщин, средний возраст 41,5 лет). Основным методом диагностики описторхоза являлось определение яиц или тел взрослых паразитов в дуоденальном содержимом и/или в кале, которое применялось у всех 92 пациентов с описторхозом. Фиброз печени определялся методом эластометрии по шкале METAVIR у всех 92 больных описторхозом. Исследование функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов в крови было проведено всем 92 больным описторхозом и 32 здоровым лицам из группы контроля методом хемилюминесцентного анализа с измерением интенсивности выработки активных форм кислорода в спонтанной и зимозан-индуцированной реакции в люцигенин- и люминол-зависимых процессах. Результаты. У больных описторхозом с кожным синдромом в сравнении с пациентами с описторхозом без кожного синдрома была зарегистрирована более высокая частота болей в правом подреберье, диспепсии, астеновегетативного синдрома, кожного зуда, эозинофилии крови, гипербилирубинемии, холестатического синдрома, холецистита, гепатомегалии, а также содержание иммуноглобулина Е. Фиброз печени F3-F4 по METAVIR определялся у 18,4% больных описторхозом с кожным синдромом и у 11,1% лиц с описторхозом без кожного синдрома (ОШ=1,78; ДИ 0,57-5,57; р=0,5). Как в люминол-зависимом, так и люцигенин-зависимом процессах у больных описторхозом с кожным синдромом регистрировалось значительное снижение функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов в сравнении с пациентами с описторхозом без кожного синдрома, о чем свидетельствовало значительное снижение максимальной интенсивности выработки активных форм кислорода и площади под кривой хемилюминесценции как в спонтанной реакции, так и в индуцированной зимозаном реакции. Заключение. Полученные результаты позволяют считать, что наличие кожного синдрома у больных описторхозом сопровождается более значимыми клинико-лабораторными проявлениями и снижением функциональной активности нейтрофилов крови, в связи с чем его можно считать маркером тяжести патологии. Проект «Иммуно-биохимическая модель прогнозирования выраженности предраковых изменений в печени у больных хроническим описторхозом» проведен при поддержке Красноярского краевого фонда науки (код заявки: 2019051404996).

98
Аннотация

Туберкулезный плеврит (pleural tuberculosis - pTB) является очень распространенной формой внелегочного туберкулеза (ТБ). Его диагностика представляет собой серьезную проблему во всем мире из-за ограничений доступных традиционных диагностических методов. К последним относятся микроскопическое исследование плевральной жидкости на наличие кислотоустойчивых микроорганизмов, культивирование микобактерий из плеврального экссудата на твердых или жидких средах, и гистологическое исследование биопсии плевры; эти тесты имеют признанные ограничения для клинического использования. Таким образом, чтобы преодолеть эти ограничения, внимание было направлено на разработку новых диагностических тестов, основанных на амплификации нуклеиновых кислот, таких как, полимеразная цепная реакция (ПЦР) и ПЦР в реальном времени (РТ-ПЦР), благодаря их точности, быстроте, высокой чувствительности и специфичности. В этом контексте данное исследование было проведено для оценки эффективности методов молекулярной диагностики при дифференциации микобактерий туберкулеза и нетуберкулезных микобактерий в плевральном экссудате. Пятьдесят пациентов с плевритом были включены в проспективное исследование в г. Рабат, Марокко. Эффективность ПЦР двух ДНК-мишеней - IS6110 и микобактериального внутреннего транскрибируемого спейсера (MYITS) для диагностики туберкулезного плеврита оценивали на основании сравнения с результатами гистологического исследования и культивирования. Наши результаты показали, что IS6110-ПЦР может выявить pTB с чувствительностью и специфичностью 41,6% и 85,7%, соответственно. Таким образом, полученные результаты подтверждают, что молекулярные тесты имеют относительно высокую специфичность для диагностики внелегочного туберкулеза, но более низкую чувствительность, поэтому положительный результат рассматривается как подтверждение pTB, тогда как отрицательный тест не может исключать заболевание. Хотя исследование было ограничено небольшим размером выборки, оно добавляет к совокупности доказательств полезности молекулярного тестирования в качестве дополнения к гистологическому исследованию для точной диагностики pTB, своевременного лечения и предотвращения появления и распространения лекарственно-устойчивого pTB. Необходимы дальнейшие усилия для повышения чувствительности молекулярных методов и определения оптимальных молекулярных мишеней, которые могут быть полезны в клинической практике.

99
Аннотация

Цель работы – изучить распространенность генетических детерминант адгезии штаммов уропатогенной Ecoli и оценить их связь с уровнем специфической и неспецифической адгезии. Объектами исследования являлись бактериальные культуры E. coli (n=33), выделенные от пациентов с инфекциями мочевыводящих путей. Принадлежность штаммов к филогенетической группе определяли с помощью Clermont quadriplex-ПЦР. Детекцию генов фимбриальных и афимбриальных адгезинов проводили методом ПЦР по конечной точке. Стандартными методами оценивали уровни специфической адгезии к эритроцитам, неспецифической адгезии к гидрофильной и гидрофобной поверхностям, а также биопленкообразующую способность штаммов. Среди исследуемых штаммов гены адгезинов были детектированы со следующими частотами: fimH – 75,76%, flu – 66,67%, iha – 39,40%, papC – 33,33%. С равной частотой 18,18% встречались sfaDE, upaG, afa/draBC и yqi, тогда как eaeA – 0%. Семь штаммов (21,21%) имели гены только фимбриальных адгезинов и три (9,09%) – только афимбриальных или белков наружной мембраны, у 21 (63,64%) штамма присутствовали одновременно гены обоих типов адгезинов. Среди 33 культур было обнаружено 23 индивидуальных адгезивных генотипа. В 45,45% случаев встречались четыре и более гена адгезии, при этом в 60% такие штаммы принадлежали к филогруппе В2. Расчет отношения шансов показал, что встречаемость генов адгезии yqi и sfaDE в E. coli филогруппы В2 была выше в 14 раз (OR=14,286), в 10 раз чаще встречался ген flu (OR=10,000). Не было обнаружено связи между наличием генов адгезии и уровнем специфической адгезии к эритроцитам, в то время как были получены достоверные отличия для неспецифической адгезии: fimH+, papC+ и upaG+ штаммы характеризовались более высоким уровнем прикрепления к стеклу. Показано, что фимбриальные адгезины в большей степени определяли бактериальную адгезию и биопленкообразование, чем афимбриальные. Тенденция к формированию более массивных биопленок на поверхности латексного катетера штаммами с положительным генетическим профилем была отмечена для всех носителей генов, участвующих в адгезии.

85
Аннотация

Возрастная макулярная дегенерация (ВМД) и центральная серозная хориоретинопатия (ЦСХ) - заболевания  заднего отрезка глаза, нередко  приводящие к снижению зрительных функций.   Их патогенез во многом не ясен. Среди факторов риска развития хронического воспаления рассматривают различные микроорганизмы,  в частности     Cytomegalovirus. Цель – анализ  гуморального ответа на  индивидуальные  белки     CMV  у пациентов с ВМД и ЦСХ в условиях хронической CMV- инфекции  и  ее реактивации.  Материалы и методы. Обследовано 104 пациента, серопозитивных к CMV: 75 - с ВМД  и 29 - с ЦСХ.  В иммуноферментном анализе определяли IgM- и  IgG-антитела к поздним вирусным антигенам и  IgG-антитела к основному неструктурному предраннему антигену CMV (IE). В линейном иммуноанализе определяли  IgG-антитела к индивидуальным антигенам CMV: основному неструктурному предраннему белку (IE), ДНК-связывающему фосфопротеину рр52, фосфопротеинам тегумента  рр150, рр65, рр28. Использовали  рекомбинантные антигены IE, р52, р150, р65, р28, содержащие иммунодоминантные белковые фрагменты вирусных антигенов. Учитывали положительные (интенсивность окрашивания линии 2+) и сильно положительные результаты (интенсивность окрашивания линии 3+). Результаты. У пациентов с хронической CMV-инфекцией частота выявления антител к индивидуальным антигенам в обеих группах была сопоставима.  Уровень серопозитивности к р150 и р65 был существенно выше, чем к р52 и р28. У пациентов с ВМД, в отличие от ЦСХ, достоверно  преобладал умеренно положительный ответ  (2+) на все исследуемые  антигены. При реактивации хронической CMV-инфекции у больных с ВМД повышался  уровень серопозитивности ко всем антигенам,  увеличивалось число случаев с интенсивно положительным ответом на отдельные антигены, но по-прежнему   преобладали пациенты с умеренно положительным ответом. В группе с ЦСХ реактивация хронической CMV- инфекции отмечена всего у 6 пациентов,  что не позволяет провести сравнительных анализ между этими двумя группами. Заключение. Основное отличие между пациентами с ВМД и ЦСХ, хронически инфицированными CMV, состояло не в частоте выявления антител к разным рекомбинантным антигенам, а в интенсивности иммунного ответа:  у пациентов с ВМД в отличие от больных с ЦСХ  превалировала умеренная продукция (2+) антител. Существенное отличие касалось уровня антител к р150: при ВМД преобладал умеренный антительный ответ (2+), а при ЦСХ- интенсивно положительный (3+) (р<0.05).  Возможно, умеренно выраженный синтез антител к исследованным рекомбинантным антигенам  CMV у пациентов с ВМД отражает слабую экспрессию вирусных антигенов   в условиях хронической инфекции, в результате чего длительно поддерживается  антигенная стимуляция, приводящая к продолжительному воспалению.

   

 

 

 

 

 

 

Features of IgG-antibodies production to individual cytomegalovirus proteins in various eye diseases (age-related macular degeneration and Central serous chorioretinopathy)

V. V. Neroev1 , G. I. Krichevskay1, G. I. Alatortseva2 , M. V. Ryabina1, A. P. Sarygina1, L. N. Nesterenko2 , V. V. Dotsenko.2 , L. N. Lukhverchik2 2.

1Helmholtz National Medical Research Center of Eye Diseases, Moscow, Russia

²Federal State Budgetary Scientific Institution «I. Mechnikov Research Institute of  Vaccines and Sera», Moscow, Russia 

Summary. Age-related macular degeneration (AMD) and Central serous chorioretinopathy (CSC) are diseases of the posterior segment of the eye that often lead to a decrease in visual functions. Their pathogenesis is largely unclear. Among the risk factors for the development of chronic inflammation, various microorganisms are considered, in particular Cytomegalovirus. The goal is to analyze the humoral response to individual Cytomegalovirus proteins in patients with AMD and CSC in conditions of chronic infection and its reactivation. Material and methods. 104 patients who were seropositive to Cytomegalovirus were examined: 75 with AMD and 29 with CSС. In the ELISA, IgM- and IgG- antibodies to late viral antigens and IgG antibodies to the main non-structural immediate early (IE)  antigen were determined. IgG antibodies to individual Cytomegalovirus phosphoproteins: the main non-structural immediate early protein (IE), the DNA-binding phosphoprotein pp52, and the phosphoproteins of the tegument (pp150, pp65, and pp28) were determined in a Line-Immunoassay: Recombinant antigens containing immunodominant protein fragments of viral antigens (p52, p150, p65, p28) were used. Only positive (bands 2+) and strongly positive (bands 3+) results  were taken into account. Results. In patients with chronic CMV infection, the frequency of detection of antibodies to individual antigens in both groups was comparable. The level of seropositivity to р150 and р65 was significantly higher than to р52 and р28 (p<0.05). In patients with AMD, in contrast to CSС, a moderately positive response (2+) to all the studied antigens significantly prevailed. When reactivating chronic CMV infection in patients with AMD, the level of seropositivity to all antigens increased, the number of cases with an intensely positive response to individual antigens increased, but patients with a moderately positive response still prevailed. In the group with CSС, reactivation of chronic CMV infection was observed in only 6 patients, which does not allow for a comparative analysis between these two groups.  Conclusion.The main difference between patients with AMD and CSC who were chronically infected with CMV was not in the level of seropositivity to individual recombinant antigens, but in the intensity of antibody synthesis: in patients with AMD, in contrast to patients with CSC, moderate production (bands 2+) of antibodies prevailed. A significant difference was related to the level of antibodies to p150: in AMD, a moderate antibody response (bands 2+), and in CSC, a strongly positive response  (bands 3+) prevailed (p<0.05). Perhaps a moderate synthesis of antibodies to the studied recombinant CMV antigens in patients with AMD reflects weak expression of viral antigens in conditions of chronic infection, as a result of which antigenic stimulation is maintained for a long time, leading to prolonged inflammation.

83
Аннотация

Поиск новых таргетных терапевтических стратегий, базирующихся на изучении иммунопатогенетических механизмов возникновения ко-инфекций, является актуальным и может в дальнейшем способствовать не только оптимизации выбора иммунотропных лекарственных средств, но и достижению позитивной клинико-иммунологической ремиссии нетипично протекающих инфекционных процессов. Ранее нашими исследованиями было установлено, что возвратные вирусно-бактериальные респираторные инфекции ассоциированы дисфункциями нейтрофильных гранулоцитов (НГ) с разной степенью выраженности нарушений их эффекторных свойств. Зачастую дисфункции НГ сопряжены с различными фенотипическими профилями, характеризующимися разными уровнями и плотностью функционально-значимых триггерных рецепторов. Целью исследования было уточнение вариантов трансформации фенотипа субпопуляций
CD64-CD32+CD16+CD11b+НГ, СD64+CD32+CD16+CD11b+НГ в созданной экспериментальной модели вирусно-бактериальной ко-инфекции in vitro. Исследовано 52 образца периферической крови 13 здоровых взрослых добровольцев в возрасте от 21 до 32 лет. Для воспроизведения условий вирусной, бактериальной и вирусно-бактериальной инфекции образцы инкубировали с формил-метионил-лейцил-фенилаланин (fMLP), двухцепочечной РНК (дцРНК) и совместно, затем определяли фенотипические характеристики субпопуляций
CD64-CD32+CD16+CD11b+НГ, CD64+CD32+CD16+CD11b+НГ с использованием конъюгатов МКАТ CD16-ECD, CD64-FITC, CD32-PE, CD11b-PC5 («Beckman Coulter International S.A.», Франция). Анализ полученных данных продемонстрировал, что НГ здоровых взрослых лиц  представлены мажорной субпопуляцией СD64-CD16+CD32+CD11b+ НГ и минорной субпопуляцией СD64+CD16+CD32+CD11b+ НГ с разной плотностью мембранных молекул. Минорная субпопуляция СD64+CD16+CD32+CD11b+ НГ значительно увеличилась под влиянием дцРНК, fMLP и дцРНК + fMLP по сравнению с интактными образцами. Сравнительный анализ моно влияния иммунотропных субстанций позволил выявить их разные эффекты в отношении действия на поверхностные рецепторные молекулы CD16, CD32 и однонаправленные, но разной интенсивности на CD11b, как в мажорной, так и в минорной субпопуляциях.  Преинкубация с дцРНК с последующим добавлением fMLP в группе исследования позволила выявить эффекты совместного стимулирующего влияния субстанций на уровни поверхностных рецепторов обеих субпопуляции НГ. Нами была создана экспериментальная модель вирусно-бактериальной ко-инфекции в системе in vitro с использованием fMLP и дцРНК и установлены варианты трансформации фенотипа субпопуляций CD64-CD32+CD16+CD11b+НГ и CD64+CD32+CD16+CD11b+НГ. Данная модель может быть использована для оценки вариантов трансформации фенотипа других субпопуляций НГ, изучения функциональной активности НГ, особенностей формирования NET, влияния на НГ различных иммунотропных субстанций.

232
Аннотация

Резюме. Селезенка является вторичным иммунным и самым крупным органом ретикуло-эндотелиальной системы, активно вовлекаемым в процесс при инфекционном мононуклеозе. На клиническом уровне оценка степени участия органа в патологической процессе маловероятна. Как правило, для диагностики спленомегалии используется только пальпаторное и перкуторное определение размеров селезенки, что является поздним и субъективным признаком вероятной спленомегалии. Ультразвуковое исследование дает широкие возможности в изучении ответа селезенки на течение инфекционного мононуклеоза. Целью настоящего исследования являлось выявление морфометрических и доплерографических изменений селезенки у пациентов с инфекционным мононуклеозом. Материалы и методы. Было обследовано 24 пациента с инфекционным мононуклеозом, составивших группу исследования. Контрольная группа представлена 30 здоровыми студентами медицинского института. Все участникам проведено ультразвуковое исследование селезенки. Оценивались эхоструктура органа, четкость контура, измерялись линейные размеры: длина, ширина, толщина селезенки. Измерения скоростных показателей в селезеночной артерии и вене проводилось в области ворот селезенки. Позиционирование эластографического окна при фиброэластометрии выполнялось в окне стандартного серошкального исследования. Измерения производились в 5 и более точках паренхимы селезенки с отступом от капсулярной зоны и зоны крупных сосудов не менее чем на 4-5 мм. На основании полученных морфометрических измерений проведены расчеты массы и коэффициента массы селезенки (КМС), отношения массы селезенки и росту и площади поверхности тела. Результаты. В исследовании установлено, то у пациентов с инфекционным мононуклеозом длина, толщина и масса селезенки статистически значимо больше, чем у здоровых. Но, масса органа варьирует в широких пределах, в связи с чем выполнен расчет КМС, который является объективным критерием размеров селезенки. Установлено, что течение инфекционного мононуклеоза имеет три варианта ответа селезенки: уменьшение, КМС менее 1,5; нормальная величина, КМС находится в диапазоне от 1,5 до 4; спленомегалия, КМС более 4. Спленомегалия ассоциирована с повышением жесткости органа, пиковой скорости кровотока и давления в v. Lienalis, а также перипортальной лимфаденопатией.  Выявленные изменения характерна для пациентов молодого возраста. Заключение. Ультразвуковое исследование селезенки имеет высокую диагностическую ценность у пациентов с инфекционным мононуклеозом. С помощью метода возможна точная оценка состояния иммунных органов в остром периоде болезни. На доклиническом уровне возможна градация спленомегалии в зависимости от степени ее выраженности, оценка гемодинамики и жесткости органа. 

128
Аннотация

Дана молекулярно-генетическая характеристика клинического штамма Klebsiella pneumoniae KP254, принадлежащего к клональной группе 23, на основании результатов полногеномного секвенирования. Известно, что представители данной клональной группы могут обладать высоко вирулентными свойствами и являться возбудителями внебольничных инфекций. Фенотипически штамм K. pneumoniae KP254 характеризуется множественной лекарственной устойчивостью, включая карбапенемы. В структуре хромосомы обнаружены детерминанты антибиотикорезистентности (blaSHV-1, oqxAB, fosA) и патогенности, кодирующие фимбрии 1, 3 типов и синтез белка-сидерофора иерсинеобактина. Установлено отсутствие конъюгативного элемента ICEKp1, острова патогенности KPHPI208, а также генов аллантоинового регулона, которыми часто обладают высоковирулентные штаммы. Анализ нуклеотидных последовательностей in silico позволил выявить репликоны плазмид групп несовместимости FII, FIAHI1/FIIK, Col440I, ColpVC, FIBK, FIIpCRY. В результате объединения контигов относительно референсных последовательностей с использованием сервиса BLASTN определено наличие предположительно двух плазмид антибиотикорезистентности IncFII и IncFIIpCRY, и одной плазмиды вирулентности IncFIBK. В структуру плазмиды вирулентности входят детерминанты белка-сидерофора аэробактина, регулятора мукоидного фенотипа RmpA2, а также гены устойчивости к тяжелым металлам. Покрытие нуклеотидной последовательности плазмиды вирулентности составило 93% относительно плазмиды вирулентности pK2044 с уровнем идентичности 99,38%, делетированными оказались области ответственные за синтез сальмохелина и белка RmpA. Набор детерминант антибиотикорезистентности, выявленных в структуре мобилома, включает гены бета-лактамазы LAP-2 (плазмида IncFIIpCRY) - аналога TEM-1, а также бела-лактамазы расширенного спектра CTX-X-55 (плазмида IncFII). Обе детерминанты являются редко регистрируемыми на территории Российской Федерации. Дополнительно в составе плазмидной ДНК обнаружены широко распространенные гены blaOXA-1, aac(3')-IIa, ∆catB4, aac(6')-Ib-cr, tet(A), qnrS1, sul2, catA2. В структуре резистома отсутствую гены карбапенемаз, в то время как исследуемый штамм обладает устойчивостью к карбапенемам. В результате анализа транслированных последовательностей генов пориновых белков OmpK35 и OmpK36 обнаружены мутационные изменения, которые привели к формированию стоп-кодона в гене ompK35, а аминокислотная последовательность OmpK36 содержит большое количество замен, вставок и делеций. Наличие подобных изменений является одним из факторов, определяющих устойчивость к карбапенемам. Синергетический эффект может оказывать активность эффлюксных насосов, присутствующих в структуре генома K. pneumoniae KP254, в частности, AcrAB-TolC и KpnEF. Таким образом, у исследуемого штамма наблюдается сохранение наиболее значимых признаков, характерных для представителей эволюционной ветки высоковирулентных штаммов клебсиелл, и в тоже время приобретение генетических детерминант множественной лекарственной устойчивости.

193
Аннотация

Исследование новых противомикробных соединений включает определение механизма их воздействия на микробную клетку. Как правило, действие большинства современных синтетических противомикробных препаратов связано либо с подавлением синтеза ДНК, либо с подавлением бактериального белкового синтеза на уровне трансляции или транскрипции.

Существуют чувствительные и простые методы скрининга и мониторинга потенциальной генотоксической активности широкого спектра природных и синтетических соединений. До настоящего времени широко применялся тест Эймса, основанный на чувствительности штаммов сальмонелл к канцерогенным химическим веществам, хотя некоторые соединения, вызывающие негативные по Эймсу реакции, на самом деле могли быть канцерогенными для животных.

Аналогично, SOS-хромотест – это SOS-транскрипционный анализ, способный оценить повреждение ДНК, вызванное химическими и физическими мутагенами. Он измеряет экспрессию репортерного гена (β-галактозидазы). Фермент β-галактозидаза перерабатывает орто-нитрофенил галактопиранозид с образованием желтого соединения, обнаруженного при 420 нм. Затем индукцию β-галактозидазы нормализуют по активности щелочной фосфатазы, фермента, экспрессируемого конститутивно Escherichia coli. SOS-хромотест также широко используется для генотоксикологических исследований. Ответ быстрый (несколько часов) и не требует выживания тестерного штамма. Кривые доза-эффект для различных химических веществ включают линейную область. Наклон этой области берется как мера индукции SOS.

Поэтому для исследования выбран SOS-хромотест, позволяющий выявить ДНК-опосредованное действие исследуемых соединений.

Целью работы стала оценка SOS-индуцирующей активности противомикробных соединений на основе замещенных 1Н-индол-4-,5-,6-,7-иламинов.

В качестве тестерного штамма в исследовании использован штамм Escherichia coli PQ 37 с генотипом F- thr leu his-4 pyrD thi galE galК lacΔU169 srl300::Th10 rpoB rpsL uvrA rfa trp::Mис+ sfi A::Mud(Aр, lac)cts.  Благодаря присутствию «сшивки» генов sfi A::lac Z, экспрессия гена β-галактозидазы lacZ в штамме PQ 37 находится под контролем промотора гена sfiA, одного из компонентов SOS-регулона E.coli. Показателем SOS-индуцирующей активности исследуемых соединений в SOS-хромотесте является активность β-галактозидазы, которая оценивается относительно активности конститутивного фермента микроорганизмов – щелочной фосфатазы, что позволяет контролировать также токсический эффект исследуемых соединений на клетки бактерий.

Результаты исследований показали, что 4,4,4-трифтор-N-(6-метокси-1,2,3-триметил-1Н-индол-5-ил)-3-оксобутанамид (1), 4,4,4-трифтор-N-(6-метил-2-фенил-1Н-индол-5-ил)-3-оксобутанамид (2) и N-(1,5-диметил-2-фенил-1Н-индол-6-ил)-4,4,4-трифтор-3-оксобутанамид (3) не обладают SOS-индуцирующей активностью в исследуемых концентрациях. 4-Гидрокси-8-фенил-4-(трифторметил)-1,3,4,7-тетрагидро-2Н-пирроло[2,3-h]-хинолин-2-он (4), 9-гидрокси-5-метил-2-фенил-9-(трифторметил)-1,6,8,9-тетрагидро-7Н-пирроло-[2,3-f]хинолин-7-он (5), 6-гидрокси-2,3-диметил-6-(трифторметил)-1,6,7,9-тетрагидро-8H-пирроло[3,2-h]хинолин-8-он (6) и 1,2,3,9-тетраметил-6-(трифторметил)-1,9-дигидро-8H-пирроло[3,2-h]хинолин-8-он (7) в бактерицидных концентрациях оказывали дозозависимую SOS-индуцирующую активность. Полученные результаты исследований позволили выявить соединения 4,5,6,7, механизм действия которых включает воздействие на ДНК микробной клетки.

119
Аннотация

Медицинские работники – группа риска по контакту с больным и заболеванию корью. Инфицированные корью сотрудники учреждений здравоохранения могут способствовать внутрибольничному распространению кори и являться источником инфекции для наиболее уязвимого контингента пациентов, беременных женщин, новорождённых, больных с иммуносупрессией.  С целью изучения гуморального иммунитета к кори у медицинских работников и факторов, влияющих на него, проведено поперечное исследование с включением 847 медицинских работников Архангельской областной клинической больницы. Количественное определение антител (иммуноглобулины G) к вирусу кори проводилось методом иммуноферментного анализа ВектоКорь-IgG («ВЕКТОР-БЕСТ», Россия). Согласно инструкции к набору концентрация IgG выше 0,18 МЕ/мл расценивалась, как положительный результат (условно защитный титр), уровень антител 0,12-0,17 МЕ/мл – как сомнительный, а титр ниже 0,12 МЕ/мл – как отрицательный результат. Оценка влияния на серологический статус сотрудника таких факторов, как пол, возраст, место работы (отделение), занимаемая должность, осуществлялась при помощи логистической регрессии для бинарной переменной отклика. Большинство участников исследования было женского пола (92,1%). Медиана возраста составила 48 (39; 57) лет. Преобладали сотрудники соматических отделений (26,7%). У 93,7% медработников концентрация антител к вирусу кори превышала условно защитный титр (выше 0,18 МЕ/мл), 4,4% были серонегативны к кори, у 1,9% получили сомнительный результат обследования. Уровень антител к кори зависел от возраста медработника и не зависел от пола. Все сотрудники старше 60 лет были серопозитивны к кори. Среди медработников моложе 35 лет только 77% имели условно защитные титры антител. Персонал в возрасте от 35 до 60 лет был серопозитивным в 95,5% случаев. Доля серонегативных к кори лиц не зависела от должности (врач, медицинская сестра, уборщик), но значительно варьировала между отделениями, в котором работали участники исследования. По результатам логистической регрессии шансы серонегативного результата теста были в 4,4 раза выше у работников соматических отделений в сравнении с другими отделениями. Среди сотрудников, родившихся с 1968 по 1984 годы серонегативные встречались в 10 раз реже, чем среди рождённых после 1985 года. Среди лиц старше 60 лет серонегативные сотрудники выявлялись в 50 раз реже, чем среди лиц младше 35 лет. Медиана концентрации IgG к кори в крови привитых  медработников, 0,56 (0,23; 1,37) МЕ/мл, была статистически значимо ниже, чем у переболевших 4,2 (3,5; 5) МЕ/мл, U=137451, p<0,001. У обследованных в динамике сотрудников титр антител к кори за 5 лет снизился в среднем в 1,2-1,9 раза (в среднем – 1,5). Таким образом, в группе обследованных медицинских работников многопрофильной лечебной организации доля восприимчивых к кори составила 6,3%. Основным фактором, влияющим на уровень иммунитета, был возраст. Учитывая снижение поствакцинального иммунитета (в 1,5 раза за 5 лет), для предотвращения заноса кори в лечебно-профилактические организации необходимо проводить серомониторинг среди привитых медицинских работников не реже 1 раза в 5 лет с последующей ревакцинацией серонегативных.

63
Аннотация

В настоящее время практически отсутствует информация о структуре сообщества грибов рода Candida, которое может поразить организм ВИЧ-инфицированных пациентов и явиться этиологическим фактором кандидозного поражения. Сказанное определило цель работы: исследование структуры сообщества грибов рода Candida, колонизирующих ротоглотку ВИЧ-инфицированных пациентов с клиническими проявлениями орофаренгиального кандидоза. Проведено микробиологическое исследование ротоглотки 31 ВИЧ-инфицированного пациента (51,6% мужчин и 48,4% женщин) с клиническими проявлениями орофарингеального кандидоза, проходивших стационарное лечение в КИБ №2 г. Москвы в период 2015-2017 гг. В ходе исследования мы подтвердили разнообразие видов грибов рода Candida, обнаруживаемых в ротоглотке ВИЧ-инфицированных пациентов. Всего было выделено 52 изолята грибов рода Candida, среди которых доминирующее положение занимали C.albicans (57,7%). Из «non-albicans» видов с наибольшей частотой встречались C. glabrata (21,1%). «Минорные» компоненты были представлены C. tropicalis (11,5%) и C. krusei (9,6%). C. albicans и C. glabrata были чувствительны к полиенам, а «минорные» компоненты сообщества – к итроконазолу и клотримазолу. Подавляющее число штаммов было резистентно к флуконазолу. Было обнаружено, что сообщество грибов рода имеет определенную архитектуру. Микроб может присутствовать в биотопе ротоглотки ВИЧ-инфицированных пациентов как монокультура, так и ассоциация: гомогенная, состоящая из штаммов одного вида, или гетерогенная, образованная несколькими видами. У 18 пациентов (58,1%) грибы рода Candida были выделены в виде монокультуры, а у 13 (41,9%) – в форме ассоциаций,  сформированых 34 изолятами (65,4% от общего числа), из которых 16 (30,8%) – были выделены из гомогенных ассоциаций и 18 (34,6%) – гетерогенных. Двукомпонентных ассоциаций было 9 (69,2%), а состоявших их трех и более компонентов - 4 (30,8%). Оказалось, что архитектура рассматриваемого сообщества во многом определяется его видовым составом, что подтверждает ранее полученные данные. Наиболее часто образовывали ассоциации C. krusei (100,0%) и C. albicans (73,3%). При этом C. albicans чаще всего (72,7%) формировали гомогенный тип ассоциаций. Чувствительность грибов рода Candida к антимикотическим препаратам зависела также от архитектуры их сообщества. Так, C. albicans в условиях гетерогенных ассоциаций проявляла широкий спектр резистентности. Таким образом, грибы рода Candida присутствуют в биотопе ротоглотки ВИЧ-инфицированных пациентов с симптомами орофаренгиального кандидоза в виде монокультуры или ассоциаций: гомогенных или гетерогенных. Чувствительность данных грибов к антимикотическим препаратам зависит от архитектуры сообщества.

43
Аннотация

В статье изложены взгляды на условия формирования заболеваемости разных категорий военнослужащих (проходящих военную службу по призыву в воинских частях и соединениях, а также курсантов, обучающихся в военных образовательных организациях Министерства обороны Российской Федерации) острыми респираторными инфекциями верхних дыхательных путей, как имеющими наибольшую военно-эпидемиологическую значимость практически для всех воинских контингентов. По результатам изучения литературных данных выделены две группы условий формирования заболеваемости острыми респираторными инфекциями верхних дыхательных путей: внешние (связанные с воздействием на военнослужащих специфических факторов военной службы) и внутренние (связанные с особенностями индивидуальной восприимчивости к данной группе инфекций). На основе результатов ретроспективного эпидемиологического анализа заболеваемости острыми респираторными инфекциями верхних дыхательных путей показаны особенности течения эпидемического процесса инфекционных заболеваний из данной группы среди военнослужащих, проходящих военную службу по призыву в воинских частях и соединениях, а также в Военно-медицинской академии им.С.М.Кирова за 2011-2017 годы. Показано, что внутригодовая динамика заболеваемости (по среднемесячным показателям) распределялась неравномерно и формировала два чётко выраженных сезонных подъема, достоверно превышающих верхний предел круглогодичной заболеваемости. При этом выявлены различия в организации учебной и служебной деятельности различных категорий военнослужащих, оказывающие разное влияние на формирование заболеваемости. По результатам ретроспективного эпидемиологического анализа персонифицированной заболеваемости курсантов Военно-медицинской академии им.С.М.Кирова за 2011-2017 годы и сравнительного анализа обращаемости по законченным случаям показано наличие и относительно стабильная доля военнослужащих, чаще  других заболевавших острыми респираторными инфекциями верхних дыхательных путей на протяжении всего 6-летнего периода обучения. По результатам анализа рассчитанной среднегодовой частоты возникновения заболеваний острыми респираторными инфекциями верхних дыхательных путей установлена неравномерность распределения курсантов внутри обследованных факультетов Военно-медицинской академии им.С.М.Кирова в соответствии с четырьмя выделенными группами по среднегодовой частоте заболевания указанными инфекциями. Выделены курсанты, часто болеющие и редко болеющие острыми респираторными инфекциями верхних дыхательных путей. Приведены результаты комбинированного социо-психологического исследования в  группах часто- и редкоболеющих курсантов, показывающие индивидуальные признаки и поведенческие особенности, по которым отдельные военнослужащие могут быть отнесены к контингентам риска повышенной восприимчивости к острым респираторным инфекциям верхних дыхательных путей для целей организации персонализированных санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий.

119
Аннотация

Коксиеллез (лихорадка Ку) - природно-очаговое заболевание, общее для человека и животных, возбудителем которого являются бактерии вида Coxiella burnetii. Одним из факторов, показывающих возможность циркуляции патогена на определенной территории, является наличие иммунной прослойки у жителей региона.

Изучение иммунной структуры населения Гвинейской Республики в отношении коксиеллезов началось в 80-е годы прошлого столетия. Данная работа проводилась в 2015-2019 гг. с целью получения новых сведений об уровне иммунной прослойки населения Гвинейской Республики к возбудителю лихорадки Ку и сравнения с исследованиями, проведенными ранее. Специфические антитела класса IgG в крови жителей Гвинеи выявляли методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием набора реагентов производства ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера (Российская Федерация). Сыворотки исследовали в разведении 1:100. Антитела к Coxiella burnetii были обнаружены в 124 (5,3 % (ДИ 4,5-6,3)) образцах из 2346.

Проведенное исследование подтверждает полученные ранее данные о циркуляции возбудителя коксиеллеза во всех ландшафтно-географических зонах Гвинейской Республики. Природно-климатические условия региона, разнообразие обитающих на данной территории видов иксодовых клещей, являющихся резервуарами и переносчиками инфекции, а также большое количество сельскохозяйственных животных, находящихся в личной собственности населения, являются факторами для активной циркуляции возбудителя лихорадки Ку и возникновению вспышек вызываемого им заболевания. Полученные результаты показывают необходимость дальнейшего изучения распространения Coxiella burnetii на территории Гвинейской Республики. Учитывая эпидемиологическую значимость лихорадки Ку, актуальной задачей остается изучения вопроса о доле данной инфекционной болезни в общей структуре заболеваний, регистрируемых на территории Республики Гвинея. Также необходимо проведение регулярного эпизоотологического мониторинга территории с целью уточнения видов носителей и переносчиков Coxiella burnetii в разных ландшафтно-географических зонах Гвинейской Республики и изучение уровня иммунной прослойки к возбудителю в сыворотках крови крупного и мелкого рогатого скота, являющихся основными источниками заражения людей. Полученные сведения позволят определить наличие природного очага данной инфекции и его границы, а также разработать комплекс профилактических (противоэпидемических) мероприятий.

69
Аннотация

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) является значимой медико-социальной проблемой для многих развитых стран. При ВИЧ-ифекции  характерно развитие хронической патологии почек, а также развитие острого почечного повреждения. В ряде регионов определенный вклад в развитие почечной патологии у ВИЧ-инфицированных может вносить геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС). Целью исследования является выявление клинико-лабораторные особенности течения ГЛПС на фоне ВИЧ-инфекции. Проведено ретроспективное исследование. Сформированы две группы: первая – 9 больных, перенесших ГЛПС на фоне имеющейся ВИЧ-инфекции; вторая – 53 больных, перенесших ГЛПС и не имевших клинико-эпидемиологических указаний на ВИЧ-инфекцию. Сравниваемые группы сопоставимы по полу и возрасту. Средний возраст пациентов первой группы составил 34 года, второй – 31. Для статистического анализа использовали лицензированную программу SPSS 22.0. Критический уровень значимости p для статистических критериев принимали равным 0,05. В целом у всех больных течение ГЛПС сопровождалось характерными проявлениями: интоксикационным синдромом, нарушением зрения, геморрагической сыпью, болью в поясничной области, снижением диуреза, тромбоцитопенией, протеинурией, полиморфным мочевым синдромом и азотемией. Больных ГЛПС на фоне сопутствующей ВИЧ-инфекции чаще беспокоят сухость во рту, вздутие живота, видимая одышка. Лабораторные изменения описывают более тяжелое повреждения почек. Показана прямая сильная связь между количеством лейкоцитов и уровнем мочевины в крови у больных с сопутствующей ВИЧ-инфекцией (r=0,798; p=0,01). Сочетание ГЛПС и ВИЧ сопровождалось более легким течением ГЛПС – частота легкого течения заболевания почти в 6 раз выше среди этой группы больных. При этом не отмечено случаев тяжелого течения геморрагической лихорадки с почечным синдромом при сочетании ее с ВИЧ. В ходе данного исследования получены неоднозначные результаты. Предрасположенность ВИЧ-инфицированных к почечной патологии может стать определяющим фактором в поражении почек при возникновении ГЛПС: более выраженный подъем показателей креатинина, мочевины.  При этом в соответствии с балльной шкалой оценки тяжести ГЛПС формально получилось, что при сопутствующей ВИЧ-инфекции больные чаще соответствуют легкой степени тяжести заболевания, даже при наличии более выраженных почечных проявлениях. Возникновение острой почечной патологии у ВИЧ-инфицированных является жизнеугрожающим состоянием, фактором прогрессирования хронической почечной патологии и предиктором смерти. Следовательно, данный контингент пациентов нуждается в пристальном наблюдении как на стационарном, так и на амбулаторном этапе.

28
Аннотация

Вспомогательные репродуктивные технологии (ВРТ) являются одним из наиболее эффективных способов борьбы с бесплодием, однако на результативность их применения оказывают влияние различные факторы. Настоящее исследование сфокусировано на изучении значимости факторов риска неудачных исходов применения ВРТ, связанных с изменениями структуры микробиома женской репродуктивной системы.Проведенное по дизайну "случай-контроль"  исследование включило  в себя лабораторное обследование 129 бесплодных пар, обратившихся в отделение вспомогательных репродуктивных технологий для проведения процедуры экстракорпорального оплодотворения.Группу «случаев» составили  женщины, у которых не наступила  клиническая беременность  в результате применения ВРТ. В контрольную группу были включены женщины, у которых  беременность наступила и прогрессировала  в результате проведения цикла ВРТ.Для определения качественного и количественного состава микроорганизмов биоценоза влагалища, использовался метод мультипраймерной количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР-РВ) с применением набора реагентов «Фемофлор-16» («НПО ДНК-технология», Россия).Наличие Trichomonas vaginalis в вагинальных мазках, эякуляте устанавливали культуральным методом c использованием жидкой питательной  среды Trichomonas Modified CPLM Medium (HiMedia, Индия) c дальнейшим микроскопированием). Серологические исследования включали в себя определение иммуноглобулинов классов IgG и IgA к Chlamidia trachomatis с использованием иммуноферментного анализа (ИФА) (использовали тест-системы производства «ВекторБест» (РФ), «NovaTec» (Германия), ImmunoComb (Израиль)), а также обнаружение антител к предранним белкам вирусов герпеса 1, 2 типа («БиоСервис»,РФ)  и к предранним белкам вирусам герпеса 5 типа («ВекторБест», РФ). Выявление ДНК C. trachomatis и ДНК вирусов герпеса проводили методом ПЦР с помощью тест- систем «Амплисенс» (Интерлабсервис, РФ).В результате проведенного исследования выявлена высокую пораженность   бесплодных пар, обращающихся в стационар для проведения ЭКО, инфекциями, передающимися преимущественно половым путем.Значимыми факторами ненаступления беременности являлись наличие нарушений нормального микробиоценоза влагалища (ОШ = 7,5 (95% ДИ 1,04 – 54,1) р=0,02) и выделение Trichomonas vaginalis (ОШ = 2,6 (95% ДИ 1,12 – 6,4) р= 0,01).Дисбиотические состояния репродуктивной системы, в том числе, возникающие на фоне трихомонадной инфекции, ассоциированы со снижением результативности ВРТ.  Очевидна необходимость своевременного выявления урогенитальных инфекций и дисбиотических состояний в процессе подготовки бесплодных пар к проведению циклов ЭКО.

1
Аннотация

Воспалительные заболевания влагалища, связанные с нарушением микрофлоры являются одними из самых распространённых гинекологических заболеваний, с которыми в первую очередь приходится сталкиваться врачу-гинекологу в амбулаторной практике. Значительно ухудшая качество жизни пациенток, эти заболевания серьёзно отражаются в негативном плане и на репродуктивной функции женщины, приводя как к нарушению фертильности, так и к развитию патологии беременности. На сегодняшний день существует множество различных схем лечения и профилактики этих заболеваний, но недостаточная эффективность терапии и наличие частых рецидивов требует новых исследований в данном направлении. Целью проведенного исследования явилась оценка влияния комбинированного препарата «Эльжина» (Вертекс, Россия), содержащего противомикробный, противопротозойный, противогрибковый и глюкокортикоидный компоненты на состояние местного иммунитета у женщин с бактериальным вагинозом и неспецифическим вагинитом. Проведено обследование и лечение 24 женщин. Всем женщинам проведен гинекологический осмотр (осмотр в зеркалах и бимануальное гинекологическое исследование), микроскопическое исследование эпителия шейки матки, определение кариопикнотического индекса. Особое внимание было уделено исследованию местных иммунологических факторов, были исследованы цитокины ИЛ-6, ИЛ-10, ФНО-α в вагинальном секрете до терапии препаратом «Эльжина» и после терапии.

В результате исследования установлено, что после окончания терапии препаратом «Эльжина» происходит уменьшение клинической симптоматики, нормализация показателей микроскопии отделяемого мочеполовых органов. Применение препарата не приводит к угнетению пролиферации эпителия влагалища, снижает секрецию провоспалительного цитокина ФНОα в вагинальном секрете и приводит к смещению баланса в сторону противовоспалительных цитокинов. С точки зрения противовоспалительной терапии это является патогенетическим обоснованием для назначения «Эльжины» у женщин с бактериальным вагинозом и неспецифическим вагинитом. Многочисленными рандомизированными клиническими исследованиями доказаны высокая эффективность и безопасность двухэтапной терапии воспалительных заболеваний слизистой влагалища – это использование антибактериальной терапии с последующим восстановлением микрофлоры. На наш взгляд эту концепцию следовало бы дополнить и третьим этапом, заключающимся в коррекции местного иммунитета, направленной на нормализацию баланса про- и противовоспалительных цитокинов.

КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ

115
Аннотация

Целью исследования было выявление взаимосвязи между полиморфизмами, ассоциированными с развитием ишемической болезни сердца, и патогенетическими особенностями описторхозной инвазии. Проведено сопоставление лабораторных показателей функционирования иммунной системы организма у больных хроническим описторхозом (вызванным Opisthorchis felineus) с различными генотипами – наличием и отсутствием мутаций в локусах, ассоциированных с предрасположенностью к развитию ишемической болезни сердца. Обнаружено, что при обусловленных мутациями нарушениях функций аденозинмонофосфат-дезаминазы 1, фактора индуцируемого гипоксией 1 альфа, аполипопротеина Е по сравнению с пациентами без минорных аллелей, воздействие описторхозной инвазии приводит к изменению иммунного реагирования. При этом у пациентов, имеющих мутацию гена аденозинмонофосфат-дезаминазы 1, обнаружена меньшая выраженность адаптивного клеточного (сниженное количество CD8+-лимфоцитов), адаптивного гуморального иммунитета (сниженное количество Ig A). У больных описторхозом, имеющих редкий аллель гена HIF1A, выявлена активация адаптивного иммунитета и снижение активации врожденного иммунитета. Наличие мутации rs42935 гена APOE приводит к снижению активности адаптивного клеточного иммунного ответа, что усугубляет течение описторхозной инвазии. Наличие минорного аллеля полиморфизма rs1333049 гена CDKN 2A/2B (ингибиторы циклин-зависимой киназы), не приводит к значительным изменениям иммунного реагирования.

Таким образом, при обусловленных мутациями нарушениях функций определенных белков воздействие описторхозной инвазии приводит к разнонаправленным изменения показателей иммунного ответа, при этом приближение показателей разных звеньев иммунной системы к «нормальному» уровню при наличии хронической паразитарной инвазии не всегда можно интерпретировать как «протективный» эффект того или иного полиморфизма. Наибольшие изменения в иммунном реагировании у пациентов с хроническим описторхозом выявлены при наличии полиморфизма в гене фактора индуцируемого гипоксией-1 альфа.

Полученные результаты позволяют предполагать участие исследованных генетических полиморфизмов, в предрасположенности к проявлению определенных клинических форм заболевания при заражении возбудителем описторхоза.

237
Аннотация

Резюме

Инфекция мочевой системы (ИМС) является актуальной проблемой современной педиатрии, педиатрической нефрологии и урологии. Клиническая картина ИМС у детей полиморфна, может быть достаточно стертой и меняться с возрастом. Классические симптомы инфекции мочевой системы у новорожденных и детей раннего возраста нередко протекают субклинически. Среди многочисленных факторов в развитии ИМС приоритетное значение имеют биологические свойства микроорганизмов, колонизирующих почечную ткань. В последние годы увеличилось этиологическое значение Enterococcus faecalis в развитии данной патологии. Цель исследования: определить клинические признаки инфекции мочевой системы ИМС, ассоциированной с E. faecalis у детей и выявить его биологические особенности для оценки их клинической значимости. Материалы и методы: проведен анализ этиологической структуры ИМС у детей в многопрофильной детской клинической больнице за 9 лет, представлены результаты клинико-лабораторного обследования 181 ребенка с ИМС от 3 дней до 17 лет, из мочи которых был выделен E.faecalis, результаты микробиологического исследования 60 штаммов E.faecalis, выделенных из мочи исследуемых детей. Результаты. Представлена клинико-лабораторная характеристика ИМС, ассоциированной с E.faecalis, возрастная вариабельность симптомов. Преобладающими в клинической картине являются интоксикационный синдром и лихорадка. Ключевым признаком ИМС является дисфункция желудочно-кишечного тракта (у новорожденных и детей первого года жизни) и боль в поясничной области (у детей старшего возраста). Выявленные клинические симптомы могут быть связаны с поражением верхних отделов мочевыводящих путей, наличием сопутствующих заболеваний и с патогенными свойствами E. faecalis. Другие симптомы встречались реже, соответствовали возрасту пациентов, хотя абдоминалгия одинаково часто встречалась у детей всех возрастных групп.

Результаты лабораторного обследования также зависели от возраста пациентов. Отмечено, что лейкоцитоз, тромбоцитоз более выражены у новорожденных детей; лейкоцитурии и протеинурии - у детей старше года, хотя в этой группе клинические симптомы менее выражены.

Указаны особенности и клиническая значимость биологических свойств E.faecalis, их неоднородность с учетом возраста пациентов, от которых они выделены. Выявлена связь патогенных свойств между собой и определенными клиническими симптомами. Заключение: доминирующие клинические симптомы (интоксикация, гипертермия), свидетельствующие о поражении верхних отделов мочевыделительной системы, связаны, в том числе, с комплексом биологических свойств E.faecalis, обладающих гистоповреждающим и цитолитическим действием.

 

Abstract

Urinary tract infection (UTI) is a topical problem in modern pediatry, pediatric nephrology and urology. The clinical presentation of UTI in children is polymorphic, it can effaced and change with age. The classic symptoms of urinary tract infections often occur subclinically in infants and young children.

Among the many factors in the development of UTI, the biological properties of microorganisms colonizing kidney tissue are of priority importance. The etiological significance of Enterococcus faecalis in development of this pathology has increased in recent years. Purpose of the study was to determine the clinical signs of urinary system infections associated with E. faecalis in children and to reveal its biological characteristics for assessing clinical significance of enterococci. Materials and methods: an analysis of the etiological structure of UTI in children in a multidisciplinary pediatric clinical hospital for 9 years was carried out. Results of a clinical and laboratory examination of 181 children with UTI in age from 3 days to 17 years and of microbiological study of strains 60 E. faecalis, isolated from those patients urine, were submitted.

Results: The clinical and laboratory characteristics of the UTI associated with E. faecalis and the age variability of the symptoms were presented. An intoxication syndrome and fever were prevailing in the clinical picture. A key sign of UTI were gastrointestinal dysfunction (in newborns and children of the first year of life) and pain in the lumbar region (in older children). The identified clinical symptoms may be associated with the upper urinary tract damage, presence of concomitant diseases, and the pathogenic properties of E. faecalis. Other symptoms were less common, consistent with the age of the patients, although abdominalgia was equally common in children of all age groups.

Laboratory examination results also depended on the age of the patients. It was noted that leukocytosis, thrombocytosis were more pronounced in newborns; leukocyturia and proteinuria - in children older than a year, although in this group the clinical symptoms were less pronounced.

Specific features and clinical significance of the biological properties of E.faecalis, their heterogeneity, taking into account the age of the patients from which they were isolated, were indicated. The relationship of pathogenic properties to each other and to certain clinical symptoms were revealed. Conclusion: the dominant clinical symptoms (intoxication, hyperthermia), indicative of the lesion of the upper parts of the urinary system, are related, among other things, to the complex of biological properties of E. faecalis, which have histo-damaging and cytolytic effects.

91
Аннотация
Целью исследования явилось изучение фенотипического состава В-лимфоцитов периферической крови у больных распространенным гнойным перитонитом (РГП) в динамике послеоперационного лечения в зависимости от исхода заболевания. Обследовано 52 пациента с острыми хирургическими заболеваниями и травмами органов брюшной полости, осложнившимися РГП. Забор крови производили перед операцией (дооперационный период), а также на 7-е, 14-е и 21-е сутки послеоперационного периода. В зависимости от исхода заболевания в послеоперационном периоде, все больные РГП были разделены на две группы: больные с благоприятным исходом заболевания (n=34), пациенты с неблагоприятным исходом (n=18). В качестве контроля обследовано 68 здоровых людей. Исследование фенотипа В-лимфоцитов крови проводили методом проточной цитометрии с использованием прямой иммунофлуоресценции цельной периферической крови с моноклональными антителами. Установлено, что в дооперационном периоде у больных РГП на фоне низкого абсолютного уровня В-лимфоцитов в крови выявляется понижение содержания В1-клеток относительно контрольных значений. При этом у больных с неблагоприятным исходом РГП наблюдается более высокое количество активированных (по CD23) В1-лимфоцитов в крови, чем у пациентов с благоприятным исходом заболевания. В наблюдаемом периоде после операции (7 – 21 сутки) динамика изменений содержания В-лимфоцитов значительно различается в зависимости от исхода заболевания. У больных с благоприятным исходом РГП в течение послеоперационного периода наблюдается снижение количества большинства субпопуляций В-лимфоцитов (в том числе, и активированные клетки), тогда как уровни содержания различных фракций В-клеток у пациентов с неблагоприятным исходом заболевания в послеоперационном периоде практически не меняются. В течение всего послеоперационного периода количество общих В-лимфоцитов, наивных В-клеток и В2-лимфоцитов, неэкспрессирующих и экспрессирующих CD23-рецептор, у больных с неблагоприятным исходом РГП выше, чем у лиц с благоприятным исходом заболевания. Содержание некоторых других фракций В-лимфоцитов у больных с неблагоприятным исходом также выше, чем при благоприятном исходе РГП, но только на отдельных стадиях послеоперационного лечения. Предполагается, что установленные особенности в уровнях В-лимфоцитов в крови в зависимости от исхода определяются тем, что у больных с неблагоприятным исходом РГП снижен уровень миграции клеток в рамках развития иммунного ответа, а также пониженным уровнем чувствительности иммунной системы к послеоперационном антибактериальной терапии.
241
Аннотация
Yersinia enterocolitica является возбудителем иерсиниоза – острого инфекционного заболевания желудочно-кишечного тракта. Y. enterocolitica один из наиболее часто встречающихся возбудителей внутрибольничных инфекций. Проблема кишечного иерсиниоза, вызываемого Y. enterocolitica, является весьма актуальной для медицины и ветеринарии и требует использования серо- и иммунодиагностики для выявления возбудителя в организме человека, животных и продуктах животноводства. Одним из самых популярных наноносителей антигенов, используемых для иммунизации и вакцинации, являются наночастицы золота. Преимуществами использования наночастиц золота в качестве средств доставки вакцин являются их относительно небольшой размер, который позволяет легко проникать в ткани, малая токсичность и длительная циркуляции in vivo, низкая стоимость, воспроизводимость. В настоящее время с использованием наночастиц золота ведутся работы по созданию новых диагностических тестов и вакцин против вирусных, бактериальных, паразитарных инфекций, в том числе против бактерий рода Yersinia. Целью исследования было изучение применения наночастиц золота как иммуномодулятора при иммунизации и вакцинации антигеном, выделенным из Y. enterocolitica. Выделенный антиген Y. enterocolitica конъюгировали с 15-нм наночастицами золота. Синтезированный конъюгат был использован для иммунизации лабораторных животных. Методами иммунохимического анализа определены чувствительность и специфичность полученных антител. Для установления протективного эффекта животных вакцинировали конъюгатами антигена и препаратами сравнения. При иммунизации животных конъюгатом наночастиц золота с антигеном Y. enterocolitica была получена антисыворотка, специфически распознающая в блот-анализе иерсиниозные белки с молекулярными массами ~35 и ~14 кДА. Обнаружен перекрест с бактериями вида Y. pseudotuberculosis и отсутствие перекрестов с клетками бактерий кишечной группы Escherichia coli, Salmonella enterica, Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris, что указывает на родовую специфичность полученных антител. Для определения протективного эффекта животных вакцинировали конъюгатами антигена c наночастицами золота и препаратами сравнения. Через две недели после последней вакцинации мышам внутрибрюшинно вводили культуру патогенного штамма Y. enterocolitica. Группы, иммунизированные конъюгатом антигена с наночастицами золота, показали выживаемость 70-80%, при этом контрольные мыши погибли все. Показано, что конъюгаты наночастиц золота с иерсиниозным антигеном обладают более высокой иммуномодулирующей активностью по сравнению с неконъюгированным антигеном. Полученные антитела можно использовать для эффективной иммунодиагностики иерсиниозов. Конъюгаты наночастиц золота с антигенами Y. enterocolitica могут послужить основой для создания профилактической вакцины.
102
Аннотация
Одним из актуальных направлений современной иммунологии является изучение роли про- и противовоспалительных цитокинов в иммунном и воспалительном ответе. К настоящему времени получено большое количество данных, касающихся цитокинового статуса при воспалительных процессах в желудочно-кишечном тракте. Однако многие вопросы до сих пор остаются недостаточно освещенными. Кроме того, большинство исследований направлено, в основном, на изучение уровня цитокинов в биоптатах из различных отделов желудочно-кишечного тракта или в желудочном соке. В статье представлены результаты изучения особенностей продукции провоспалительных цитокинов у пациентов с сочетанием аллергического ринита и H. pylori-ассоциированных заболеваний верхнего отдела желудочно-кишечного тракта. Обследовано 225 пациентов в возрасте от 18 до 40 лет (средний возраст составил 29,5 ± 6,71 лет). Среди пациентов, включенных в исследование, 43 человека имели аллергический ринит, 66 человек – воспалительные заболевания верхнего отдела желудочно-кишечного тракта (хронический гастрит/гастродуоденит), 69 человек – аллергический ринит с сопутствующими воспалительными заболеваниями верхнего отдела желудочно-кишечного тракта. Деление пациентов на группы осуществлялось в зависимости от наличия аллергического ринита и H. pylori-инфекции. У всех пациентов было определено содержание IL-6 и IL-8 в сыворотке крови, а также показатели общего анализа крови. Статистическую значимость различий частот в независимых группах определяли с помощью точного критерия Фишера или критерия χ2. Показано, что у H. pylori-негативных пациентов значения IL-6 в сыворотке крови укладывались в пределы референтного интервала с единичными выпадами, в то время как при наличии H. pylori-инфекции синтез данного цитокина был значительно усилен и не зависел от наличия аллергопатологии. По частоте повышенных значений IL-8 группы пациентов с заболеваниями желудочно-кишечного тракта вне зависимости от наличия H. pylori-инфекции и аллергического ринита были сопоставимы между собой и отличались от группы здоровых лиц достоверно более высокими показателями. Также выявлена взаимосвязь между сывороточным уровнем IL-8 и количеством лейкоцитов периферической крови, что представляет интерес для прогнозирования течения воспалительного процесса. Таким образом, сывороточный уровень IL-8 при воспалительных заболеваниях верхнего отдела желудочно-кишечного тракта увеличивался вне зависимости от наличия H. pylori-инфекции и аллергического ринита, а повышение уровня IL-6 в сыворотке крови отмечалось только у H. pylori-позитивных пациентов.
74
Аннотация

Резюме. Данная работа является частью проекта по созданию «ловушек» вирусных частиц. Создание подобных «ловушек» происходит за счет ковалентной иммобилизации на поверхности нано- или микрочастиц на полимерной основе рекомбинантного рецептора, специфического для данного вируса. Предполагается, что полученные конъюгаты белок-частица будут способны к связыванию с вирионами, с последующим поглощением клетками иммунной системы организма. Целью работы являлось изучение влияния микро- и наночастиц на основе поли(молочной кислоты) (ПМК), а также блок-сополимера ПМК и поли(этиленгликоля) (ПМК-ПЭГ), на клеточный иммунный ответ в отношении антигена, связанного с данными полимерными частицами. Материалы и методы. Методом аффинной хроматографии был получен рекомбинантный химерный модельный белок бета2-микроглобулин – зеленый флуоресцентный белок (β2M-sfGFP). Рекомбинантный белок иммобилизовали на полимерных частицах, которые использовали для иммунизации мышей. В работе использовали мышей самок-гибридов F1 (CBA x C57BL) массой в среднем 20-25 г (возраст 4-6 месяцев). Опытные и контрольные группы составляли по 15 животных. Для оценки клеточного иммунного ответа был использован метод внутриклеточного окрашивания цитокинов. Результаты и обсуждение. Показано, что наночастицы на основе сополимера полимолочной кислоты и полиэтиленгликоля способны связывать 10 мкг белка на 1 мг полимера. Микрочастицы на основе полимолочной кислоты – 2,3 мкг белка на 1 мг полимера. Первая группа мышей была иммунизирована конъюгатом частиц на основе сополимера полимолочной кислоты и полиэтиленгликоля диаметром 100 нм с модельным белком. Вторая – смесью этих же частиц с растворимым модельным белком. Третья группа была иммунизирована конъюгатом частиц на основе полимолочной кислоты диаметром 1400 нм с модельным белком. Четвёртая - смесью этих же частиц с растворимым модельным белком. Селезёнки забирали через 2 недели после четырёхкратной внутрибрюшинной иммунизации. Сравнение иммунного ответа между группами было осуществлено при помощи непараметрического критерия Краскела-Уоллиса с поправкой Тьюки. Было показано, что количество антигенспецифических Т-клеток фенотипа CD4+ (Т-хелперы), вырабатываемых к модельному белку, значимо выше при иммунизации мышей конъюгатом частиц и β2M-sfGFP по сравнению с контрольными группами, где иммунизация проводилась смесью белка и немодифицированных частиц. Разница оказалась достоверной (p < 0,001). При этом было установлено, что количество антиген-специфических CD8+ T-клеток к модельному белку β2М-sfGFP не отличалось между всеми исследуемыми группами.

МЕТОДЫ

242
Аннотация

Резюме. Цель исследования – разработка способа идентификации бактерий вида Acinetobacter nosocomialis по совокупности фенотипических признаков с использованием признака уреазной активности. Объектами исследования были 116 штаммов бактерий группы Acinetobacter baumannii (Ab) и 2 штамма Acinetobacter calcoaceticus. Клинические штаммы были выделены в 2018-2019 годах в бактериологической лаборатории Военно-медицинской академии им.С.М. Кирова (Санкт-Петербург), из них A. baumannii – 85 штаммов, A. nosocomialis – 12 штаммов, A. pittii – 10 штаммов. Кроме того, девять штаммов A. nosocomialis были выделены из проб воды, взятой из реки Невы в городской черте Санкт-Петербурга. Два штамма A. calcoaceticus из коллекции НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера были изолированы из цианобактериальных матов Антарктиды. Принадлежность штаммов к группе A. baumannii (Ab) устанавливали по совокупности фенотипических признаков: грамотрицательные кокко-бактерии, неподвижные, аэробы, растут при 370С, 410С или 440С, не дают гемолиз на среде с кровью барана; не имеют цитохромоксидазы и нитратредуктазы, имеют каталазу; не ферментируют, но окисляют D-глюкозу на среде Хью-Лейфсона и микрометодом; утилизируют этанол, L-арабинозу, L-аргинин, L-гистидин, путресцин, трикарбаллиловую кислоту на плотной минимальной солевой среде с 0,2% субстрата в качестве единственного источника углерода;  не утилизируют D-глюкозу. Штаммы бактерий культивировали на Колумбийском агаре. Уреазную активность бактерий определяли микрообъемным методом. Использовали  среду с мочевиной  рН=7,0±0,1 следующего состава: Na2HPO4 - 1,1 г; KH2PO4  - 1,1 г; NaCl - 5,0 г;  0,4% водно-щелочной раствор фенолового красного - 5 мл; мочевина 10,0÷15,0 г; вода дистиллированная - 1л. Ингредиенты, кроме мочевины, растворяли в дистиллированной воде, разливали во флаконы, стерилизовали 20 мин при 121оС, затем добавляли во флаконы мочевину в расчетном количестве. Среду с мочевиной вносили по 0,1 мл в лунки планшета, затем засевали по полной петле (диаметром 2 мм) суточной агаровой культуры исследуемых и контрольных штаммов и инкубировали в аэробных условиях при 37 °C. Результаты реакции на уреазу быстрой активности учитывали через 3 часа по изменению исходной окраски среды. Для выявления уреазы слабой активности реакцию учитывали через 7 - 24 часа. Полученные данные уреазной активности сравнивали с результатами видовой идентификации всех исследуемых штаммов методом матрично-ассоциированной лазерной десорбции/ионизации время пролетной (MALDI-TOF) масс-спектрометрии. Было установлено, что у бактерий группы Ab уреазную активность имели 100% штаммов A. nosocomialis и 18,82% штаммов A. baumannii. При этом уреазу быстрой активности имели все штаммы A. nosocomialis и только один  штамм A. baumannii (1,17%). У бактерий видов A. pittii и A. calcoaceticus уреаза как быстрой, так и слабой активности не была выявлена. Следовательно, уреаза высокой активности имеет таксономическое значение как маркер бактерий вида A. nosocomialis отличающий этот вид от других видов группы A. baumannii. Чувствительность и специфичность способа идентификации штаммов A. nosocomialis, основанного на определении уреазы быстрой активности в совокупности с фенотипическими признаками группы Ab, относительно идентификации методом MALDI-TOF масс-спектрометрии исследуемых штаммов составили 100% и 98,83% (χ2=103,2; Р<0,0001) соответственно.



Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2220-7619 (Print)
ISSN 2313-7398 (Online)